王华菁
- 作品数：39 被引量：113H指数：6
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市博士后基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B的功能表位、与其特异性结合的单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物技术领域，更具体地，本发明公开金黄色葡萄球菌肠毒B的功能表位<Sup>195</Sup>SFWYDMMP<Sup>202</Sup>、<Sup>12</Sup>HKSSKFTGL<Sup>20</Sup>、...
- 郭亚军戴建新王华菁
- 文献传递
- 肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞的凋亡被引量：7
- 2001年
- 目的 :研究肝癌细胞表面 Fas/ Fas L系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。 方法 :采用流式细胞术和RT- PCR检测肝癌细胞株 Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas和 Fas L的表达 ;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞 Fas L表达及 Fas L表达上调后的肝癌细胞触发淋巴细胞株 Jurkat细胞凋亡的作用。结果 :Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5肝癌细胞株Fas表达均阴性 ;Hep G2 Fas L m RNA的表达为阴性 ,而 Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas L m RNA的表达均阳性。经争光霉素(0 .6 mg/ m l)诱导后 ,上述肝癌细胞 Fas的表达无明显变化 ,而其 Fas L的表达却增加 ,与 Jurkat细胞混合孵育则触发后者发生显著性凋亡。结论 :肝癌细胞可能一方面降低或不表达 Fas而对 Fas介导的凋亡耐受 ,另一方面又增强自身 Fas L的表达以诱发与之接触的 T淋巴细胞凋亡 ,在完成免疫逃避的同时 ,可对周围的
- 梁云陆斌李晓冬王华菁崔贞福李博华胡慧红杨扬郭亚军刘彦君
- 关键词：肝肿瘤T淋巴细胞FAS/FASL系统
- 靶向VEGF双特异性抗体及其用途
- 本发明在Bevacizumab及全人源单克隆抗体B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>基础上构建一个针对VEGF两个表位的双特异性抗体Bev‑B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>BsAb，实...
- 李博华汪超孟艳春王华菁杨扬
- 文献传递
- 抗CD3人源化抗体恒定区突变体的制备及其生物学活性被引量：1
- 2004年
- 为了降低抗CD3人源化抗体hu12F6对T细胞的激活作用以克服首剂效应 ,构建了恒定区特定位点突变的hu12F6重链表达载体 ,将其与hu12F6的轻链表达载体共转染CHO细胞 .ELISA和RT PCR证实 ,恒定区特定位点突变的人源化抗体hu12F6m在CHO细胞中获得了表达 .竞争抑制实验证实hu12F6m具有与原鼠源抗体及hu12F6相似的特异性和亲和力 .增殖实验表明hu12F6m对T细胞的刺激作用明显弱于hu12F6 .实验结果为深入探讨hu12F6m的生物学特性奠定了基础 .
- 李博华王皓杨扬陆斌王华菁张大鹏钱卫珠季军捷李晓东郭亚军
- 关键词：CD3人源化抗体定点突变首剂效应
- 内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用被引量：2
- 1996年
- 目的：研究内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用。方法：采用地高辛标记探针原位杂交的方法，检测了正常肝脏、肝癌组织及癌旁肝组织中内皮细胞选择素（Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ）及其配体合成的关键酶岩藻糖转移酶（Ｆｕｃ－Ｔ）的转录水平。结果：Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ的转录只局限于内皮细胞，且在肝癌及正常肝组织之间没有差别；但Ｆｕｃ－Ｔ的转录水平在肝癌与正常肝组织之间差别明显，表现为多发肝癌中子瘤的水平明显高于母瘤，母瘤明显高于单发肝癌，单发肝癌明显高于癌旁组织，而癌旁组织又明显高于正常肝组织。结论：Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ与其配体的相互粘附，在肝癌的转移中起了重要作用。
- 谢天培吴孟超顾天爵范俊刘彦君王皓王华菁郭亚军
- 关键词：肿瘤转移岩藻糖转移酶肝肿瘤
- 骨桥蛋白单克隆抗体的制备及其特异性分析被引量：2
- 2008年
- 为了研制骨桥蛋白(OPN)特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性。本研究在毕赤酵母中表达具有良好免疫原性的重组人OPN蛋白的基础上,用重组人骨桥蛋白(rhOPN)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选杂交瘤细胞,并结合免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别的抗原位点进行分析。结果共获得4株能够识别OPN不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,3株为IgG1,1株为IgG2a。这些mAb能与重组人OPN特异性结合。本研究的四株抗体中,只有4G2B5能够检出与肿瘤转移密切相关的OPN-c的条带,预示该抗体可用于判断肿瘤预后和高转移肿瘤的临床检测。本研究成功获得了针对骨桥蛋白的特异性mAb,同时为进一步研究OPN蛋白的结构和功能提供了重要工具。
- 曹志国杨海鸥樊克兴王华菁姬广辉袁林林康延申戴建新
- 关键词：骨桥蛋白肿瘤侵袭单克隆抗体
- 高效、低毒免疫毒素SM5-1-PE38KDEL的构建及其抗肿瘤作用研究
- 目的免疫毒素是由具有导向能力的分子和具有细胞毒性的分子组合而成的具有特异性杀伤能力的杂合分子。SM5-1是本研究所自主筛选克隆的小鼠抗人单克隆抗体,其抗原p230特异表达于人肝癌、乳腺癌和黑色素瘤细胞表面。本研究拟通过计...
- 戴建新樊克兴王华菁郭亚军
- 关键词：绿脓杆菌外毒素免疫毒素定点突变
- 文献传递
- 激活型人源化抗人CD137单克隆抗体的研制与生物学活性鉴定
- 2018年
- 目的制备鼠抗人CD137抗体,并对该抗体进行人源化改造。方法构建h CD137-p CDNA3.4真核表达质粒,经293F细胞表达纯化及鉴定后,获得CD137蛋白。制备p HAGE-CMV-MCS-IRES-Zs Green-h CD137的慢病毒,感染HEK-293FT细胞,获得用来筛选杂交瘤的CD137转基因细胞株。将CD137蛋白免疫小鼠,检测小鼠血清抗体效价,将免疫小鼠的脾脏和骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用ELISA方法及流式细胞术对小鼠杂交瘤进行筛选。将筛选后的杂交瘤细胞接种小鼠,获得腹水。对抗体亚型和抗体效价进行测定,并通过竞争结合抑制实验等方法对所获的CD137单抗的生物学特性进行分析鉴定。提取该m Ab杂交瘤细胞株的总RNA逆转录成c DNA,进行鼠抗人CD137抗体可变区序列克隆,构建人源化抗体重链和轻链表达载体,瞬时转染HEK-293FT,检测分析各重组人源化抗体与抗原的亲和力。结果获得1株CD137单抗(6F5),该抗体与CD137L有竞争作用。蛋白结合表位在A.A 30-100。6F5能够激活NF-κB信号通路,对外周血单个核细胞增殖具有显著促进作用,且人源化后抗体的亲和力不变。结论成功制备1株CD137人源化抗体,该人源化抗体为下一步开展体内肿瘤治疗奠定了基础。
- 何妍王华菁王华菁徐依云黄勇杨焕凤
- 关键词：CD137单克隆抗体T细胞激活
- TRAIL及其5种受体DNA片段的扩增与序列分析
- 2005年
- 目的制备TRAIL及其5种受体的特异性基因探针。方法以PHA刺激人外周血淋巴细胞(PBL)增殖,从而诱导TRAIL及其受体的mRNA转录水平提高,然后用RTPCR方法扩增出TRAIL及其5种受体的DNA基因片段,并采用基因测序法确证所得基因片段序列的正确性。结果获得了TRAIL及其5种受体的DNA基因片段。结论所用方法正确,为研究TRAIL及其受体调控细胞凋亡的机制提供了有价值的工具。
- 季军捷王华菁黑振宇彭玲王皓李晓冬时玉舫郭亚军
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体植物血凝素凋亡反转录聚合酶链反应
- 肝细胞癌变时对转铁蛋白有效利用率的影响及促进肝癌细胞增殖的研究被引量：1
- 1996年
- 采用生物化学及细胞培养的方法,测定了肝细胞癌变时变化最为明显的神经节苷脂GM_3、GD_3,对细胞的生长、转铁蛋白与其受体的结合,以及转铁蛋白受体介导的内吞作用的影响和肝癌细胞上转铁蛋白受体及去唾液酸糖蛋白受体含量的变化。结果表明:肝细胞癌变时GM_3、GD_3含量的变化能够明显促进肝癌细胞的生长,并且这种影响与转铁蛋白对细胞的作用直接相关。研究表明:神经节苷脂的这种变化并不影响转铁蛋白与其受体的结合,但却能明显加快转铁蛋白受体介导的内吞作用,增加肝癌细胞对转铁蛋白的摄取。同时,肝癌组织中转铁蛋白受体的含量增高,而去唾液酸糖蛋白受体的含量降低,这不但有利于肝癌细胞对转铁蛋白的有效摄取,可能也增加了其对高度唾液酸化的转铁蛋白的相对特异性摄取,上述变化能够促进肝癌细胞的生长与增殖。
- 谢天培吴孟超沈锋施乐华刘彦君王华菁钱卫珠郭亚军
- 关键词：肝癌转铁蛋白神经节苷脂
