梁元存
- 作品数：60 被引量：525H指数：14
- 供职机构：山东农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 烟草赤星病菌(Alternaria longipes)角质酶的纯化和特性(英文)被引量：2
- 2009年
- 本文对烟草赤星病菌Alternaria longipes产生的角质酶进行了纯化及性质测定。在含有苹果角质(诱导物)的液体培养基中培养A.longipes,第8 d达到产酶高峰。发酵液经硫酸铵沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)Sepharose、Sephacryl S-100 HR和Phenyl-Sepharose 6 fast flow(high sub)进行纯化。通过SDS-PAGE测得蛋白分子量为59.5 kDa。该酶的最适温度为35℃,最适pH为9.0,在温度20℃～40℃及pH 4.0～10.0范围内,酶活较稳定。一些金属离子如Na+、Cu2+和Mn2+可以部分抑制角质酶活性。
- 刘辉刘菲魏芳芳梁元存赵蕾刘爱新
- 关键词：烟草赤星病菌蛋白纯化
- 利用致病毒素筛选植物抗病突变体的研究进展被引量：19
- 2001年
- 概述了国内外利用致病毒素筛选抗病突变体的历史、现状和进展 ,并对存在的问题进行了评述。
- 赵蕾梁元存张天宇
- 关键词：致病毒素抗病突变体抗毒素
- 禾谷镰刀菌缺氧诱导脱氢酶参与发育和致病性
- 2021年
- 缺氧诱导脱氢酶(hypoxia-induced dehydrogenase,HorA)参与辅酶Q(coenzyme Q,CoQ)的生物合成。在禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)基因组中确定了一个缺氧诱导脱氢酶基因,命名为FgHorA。通过同源重组的方法获得FgHorA敲除突变体。研究发现,FgHorA敲除突变体出现生长和产孢的缺陷,并且延迟了分生孢子萌发,FgHorA突变体不能产生子囊壳。FgHorA突变体在小麦胚芽鞘上的致病力和产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)毒素含量明显下降。FgHorA突变体表现出对盐胁迫的抗性提高,而对氧胁迫抗性降低。此外,FgHorA突变体产生的内源性活性氧明显减少。研究结果表明,禾谷镰刀菌FgHorA参与菌丝生长、无性和有性生殖、胁迫反应和致病性。
- 迟浩文丁一鸣杜凯月李伟东殷复伟陈蕾邹珅珅梁元存
- 关键词：禾谷镰刀菌
- 禾谷镰刀菌脂质转运蛋白Vps13的功能分析被引量：1
- 2022年
- Vps13蛋白家族是真核生物中高度保守的一类脂质转运蛋白,其在丝状真菌中的功能尚不清楚。小麦赤霉病主要由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)引起,是小麦最重要病害之一。禾谷镰刀菌含有酿酒酵母VPS13的一个同源基因FgVPS13。通过同源重组的方法获得禾谷镰刀菌FgVPS13敲除突变体。研究表明,FgVPS13敲除突变体出现生长、产孢和有性生殖的缺陷。FgVPS13敲除突变体在小麦胚芽鞘和麦穗上的致病力下降,产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)毒素含量也明显降低。而且,FgVPS13抑制线粒体自噬。总之,FgVPS13参与调控禾谷镰刀菌菌丝生长、无性和有性生殖、致病力和线粒体自噬。
- 迟浩文韩雪勤殷复伟商明清张莉于金凤梁元存
- 关键词：禾谷镰刀菌致病力
- 烟草赤星病菌(Alternaria longipes)产角质酶液体发酵条件的优化被引量：1
- 2009年
- 以基础培养基(查彼培养基+碳酸钙+苹果角质)为营养优化了长柄链格孢(Alternaria longipes)产角质酶的环境和营养条件。结果表明,最佳产酶的环境条件是:培养时间8d,培养温度25℃,pH5.5;通过正交试验确定最佳产酶的营养条件是:蔗糖3%,干酪素1%,吐温-800.3%;酶活高达175.2U/mL,是基础培养基酶活力的11.0倍。
- 刘辉刘爱新梁元存刘菲魏芳芳
- 关键词：烟草赤星病菌发酵条件
- 核黄素对烟草悬浮细胞活性氧和防卫反应的激活作用被引量：5
- 2009年
- 【目的】研究核黄素处理烟草悬浮细胞后,激活的氧迸发和防卫反应,以及钙信号和蛋白激酶对这些事件的影响。【方法】1mmol·L-1核黄素处理烟草悬浮细胞,用半定量RT-PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法测定一系列防卫反应,并用钙离子通道抑制剂LaCl3、钙离子螯合剂EGTA和一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂staurosporine处理细胞,测定防卫反应的变化。【结果】1mmol·L-1核黄素处理悬浮细胞后,产生了氧迸发、导致培养基质碱性化、增强4种防卫基因PR(pathogenesis-related)-1a、PR-1b、PAL(phenylalanine ammonia lyase)和LPO(lignin peroxidase)表达以及scopoletin的积累;LaCl3、EGTA和staurosporine可以不同程度地抑制这些防卫反应。【结论】核黄素能够激活烟草悬浮细胞的氧迸发和防卫反应,在信号转导中钙信号和蛋白质磷酸化参与了这些过程。
- 刘菲魏芳芳王蕾刘辉梁元存刘爱新
- 关键词：核黄素烟草活性氧防卫反应
- 病菌激发子诱导烟草抗赤星病的研究被引量：27
- 2000年
- 用来源于烟草赤星病菌(Alternariaalternata)弱毒株TBA16的病菌激发子诱导烟草,产生了系统诱导抗性,最大诱导效应可达54%。烟草幼苗经激发子处理后,苯丙氨酸裂解酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性有不同程度的增加,病程相关蛋白(PRP)也有量的积累,在诱导后第10d产生的蛋白量最多。以水杨酸(SA)处理作阳性对照,结果表明,水杨酸诱导比激发子产生的诱导诱导效应高,各种酶活性均比激发子诱导产生的大,PRP产生的量也较多。
- 梁元存商明清刘爱新董汉松
- 关键词：烟草赤星病激发子水杨酸诱导抗性
- 植物系统获得抗性中的信号被引量：15
- 2001年
- 系统介绍了植物系统获得抗性中的信号 ,包括水杨酸 (SA)、茉莉酸 (JA)及其甲酯 (MeJA)、系统素(systemin)、乙烯等信号分子和电信号。
- 梁元存刘爱新
- 关键词：系统获得抗性信号分子电信号茉莉酸茉莉酸甲酯系统素
- 产蛋白酶生防细菌的筛选及其对病原真菌的拮抗作用被引量：17
- 2008年
- 从小麦根际土壤中分离到一株高产蛋白酶并对多种植物病原真菌具有拮抗作用的生防细菌T2。通过形态特征、生理生化及16S rDNA同源性序列分析,初步鉴定该菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。其发酵液经硫酸铵沉淀后的粗酶液可明显抑制棉花枯萎病菌菌丝生长及孢子萌发,在显微镜下观察到棉花枯萎病菌孢子萌发的芽管短、孢子膨大变形呈泡囊状,菌丝呈串珠状膨大、细胞破裂、细胞质外渗,表明该细菌菌株产生的胞外蛋白酶可能与病菌菌丝生长受抑制密切相关。
- 邢介帅李然赵蕾梁元存竺晓平
- 关键词：生防细菌菌株鉴定胞外蛋白酶拮抗
- 尖孢镰刀菌FoPLC4参与调控孢子形成和致病性被引量：6
- 2014年
- 【目的】黄瓜枯萎病是黄瓜生产中的重要病害,其病原菌为尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)。研究旨在明确尖孢镰刀菌黄瓜专化型编码磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的FoPLC4在调控分生孢子形成和致病性等方面的功能。【方法】采用生物信息学方法,确定FoPLC4在染色体上的位置,分析FoPLC4结构。基于尖孢镰刀菌番茄专化型基因组数据库,采用特异性引物克隆黄瓜枯萎病菌FoPLC4。根据同源重组原理构建携带潮霉素磷酸转移酶(hygromycin phosphotransferase,HPH)基因的敲除载体,利用PEG(polyethylene glycol)介导的方法转化原生质体,获得黄瓜枯萎病菌的敲除突变体?FoPLC4和遗传回复突变体?FoPLC4/plc4。转化子经潮霉素B平板筛选后通过PCR和RT-PCR分子验证。在PDA(potato dextrose agar)培养基上测定?FoPLC4生物学性状。利用分生孢子接种黄瓜胚根测定?FoPLC4在黄瓜幼苗上的致病性。【结果】FoPLC4位于尖孢镰刀菌基因组的4号染色体,DNA全长3 282 bp,不含内含子,编码1 093个氨基酸;FoPLC4含有5个结构域,包括EF手形(EF-hand)区、PH(pleckstrin homology)区、C2区和2个催化区,属于PLCδ亚型。与野生型菌株相比,?FoPLC4菌落生长速率没有显著改变,但气生菌丝较疏松;?FoPLC4可以同时产生大型分生孢子和小型分生孢子,大型分生孢子只占孢子总数的12.1%,而野生型菌株在相同条件下只能产生小型分生孢子,?FoPLC4产孢量下降了82.2%。致病性测定表明?FoPLC4在黄瓜幼苗上的萎蔫症状明显减轻,接种10 d后病情指数下降了53.3%。回复突变体?FoPLC4/plc4在菌落生长、产孢和致病性等性状与野生型相比没有显著差别。【结论】尖孢镰刀菌黄瓜专化型FoPLC4全长3 282 bp,不含内含子,编码1 093个氨基酸。与野生型相比,?FoPLC4分生孢子的产孢类型明显改变、产孢数量和对黄瓜幼苗的致病性显著降低。FoPLC4在调控尖孢镰刀菌分生孢�
- 孙玲褚小静郝宇张洪滨梁元存
- 关键词：尖孢镰刀菌孢子形成
