杨雨
- 作品数:6 被引量:23H指数:3
- 供职机构:中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 针对DEK原癌基因的siRNA真核表达载体的构建被引量:1
- 2010年
- 目的以 DEK基因为靶基因,针对其特定核苷酸序列,构建psiRNA-hHDEK表达载体,转染宫颈癌CaSki细胞,观察DEK siRNA对DEK基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的靶向沉默效应。方法根据DEK核苷酸序列,利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA,克隆至siRNA真核表达载体psiR-NA-hHl neo中,构建能在真核细胞中表达的靶向DEK基因的siRNA重组质粒;应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株,用RT-PCR和Western Blot检测转染后DEK mRNA和蛋白表达。结果筛选出阳性克隆,抽提质粒,经限制性内切酶AseI酶切鉴定及测序分析证实合成的siRNA序列正确,并已准确克隆入psiRNA-hHl neo载体中。DEK特异性siRNA载体构建成功。经RT-PCR和Western Blot测定分析,转染质粒psiRNA-hHDEK CaSki细胞组DEK mRNA和蛋白的表达明显减少。结论成功构建了DEK特异性siRNA表达载体。设计构建的真核表达载体可以特异性干扰DEK原癌基因的表达,为进一步研究DEK基因的功能奠定了基础。
- 刘岿然杨雨冯天达张淑兰
- 关键词:宫颈癌DEKRNA干扰转染
- 超声测盆腔积液深度在评估异位妊娠腹腔内出血量中的应用被引量:10
- 2012年
- 目的通过比对异位妊娠患者术前盆腔积液深度的彩色超声测量结果与术中记录的实际腹腔内积血量,建立估测术前腹腔内出血量的方法。方法选择2008年1月至2009年12月在本院诊断为异位妊娠并行急诊手术的患者500例。术前患者取半卧截石位,行阴式超声检查。按彩超提示盆腔积液深度(x)和术中记录与之对应的腹腔内实际出血量(y),利用SPSS 16.0统计软件行统计学分析并建立方程。结果盆腔积液深度(x)与腹腔内实际出血量(y)符合方程:y=43.306e0.704x,R2=0.983,P<0.05。按此方程推算腹腔内实际出血量,当盆腔积液深度为3、3.5、4.0及4.5 cm时,腹腔内实际出血量分别为357.91、508.92、732.64及1 028.95 ml。结论根据盆腔积液深度可估算出异位妊娠患者腹腔内出血的量,从而为患者提供更准确的治疗依据。
- 刘岿然王昌霆杨雨张淑兰
- 关键词:异位妊娠超声检查盆腔积液腹腔内出血
- psiRNA—hHDEK的构建及其对CasKi细胞生物学特性影响的研究
- 2011年
- 目的观察DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡、衰老的影响,为探索防治人类宫颈癌的新方法提供依据。方法根据siRNA设计原则和Genebank中DEK核苷酸序列,利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA,克隆至siRNA真核表达载体psiRNA-hHlneo中,应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株,用RT-PCR和Western blot检测转染后DEKmRNA和蛋白表达,转染后48hMTr法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变、SA-β-半乳糖苷酶细胞化学染色鉴定细胞衰老。结果转染质粒psiRNA—hHDEK组DEKm RNA及蛋白的表达明显减少(0.28±0.02),DEK基因沉默后CaSki细胞增殖能力下降,细胞周期阻抑,细胞凋亡率增加,衰老细胞增多。结论成功构建表达DEK siRNA的真核表达质粒psiRNA-hHDEK,并能够有效沉默CaSki细胞中DEK基因表达。DEK基因沉默后能够诱导CaSki细胞凋亡和细胞衰老。DEK基因在宫颈癌发生和演变中发挥重要作用,其既是衰老抑制基因,又是凋亡抑制基因。
- 刘岿然杨雨赵敏张淑兰
- 关键词:癌基因基因沉默RNA干扰
- 宫颈癌组织中HPV16/18感染与Hpa基因表达的相关性研究被引量:3
- 2012年
- 目的:研究HPV16/18、Hpa基因在宫颈癌组织中的表达及二者的相关性。方法:采用免疫组织化学方法对宫颈癌石蜡标本45例、CINⅢ25例、CINⅠ~Ⅱ20例、正常宫颈组织10例进行HPV16/18及Hpa基因检测。结果:①HPV16/18在宫颈癌组织、ClNⅢ、CINⅠ~Ⅱ、正常宫颈组织中阳性表达率分别为86.7%、76.0%、25.0%、10.0%。宫颈癌组织中HPV16/18表达和阳性表达率普遍高于CIN组织和正常组织(χ2=11.91,P<0.05;χ2=20.53,P<0.01)。Hpa蛋白在宫颈癌组织、CINⅢ、CINⅠ~Ⅱ及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为75.6%、28.4%、21.4%和10.0%。宫颈癌组织中Hpa阳性表达率普遍高于CIN组织和正常组织(χ2=31.169,P<0.05;χ2=12.94,P<0.05)。Hpa的表达与宫颈癌的淋巴结转移有关。②在宫颈病变中HPV16/18感染和Hpa基因表达之间呈正相关(χ2=4.288,P=0.038,r=0.363)。结论:宫颈癌组织中HPV16/18及Hpa基因的表达提示二者在宫颈癌的病因学中起作用,Hpa可作为判断宫颈癌预后的参考指标。
- 杨雨刘岿然张淑兰
- 关键词:宫颈癌HPV16/18免疫组织化学
- 宫颈癌组织中Hpa与DEK基因表达的相关性研究被引量:3
- 2011年
- 目的研究DEK与Hpa基因在宫颈癌组织中的表达及二者的相关性。方法采用免疫组织化学方法对宫颈癌石蜡标本45例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)45例、正常宫颈组织10例进行Hpa及DEK基因检测。结果(1)DEK在宫颈癌组织、CIN、正常宫颈组织中阳性表达率分别为88.9%、24.4%、10.0%。宫颈癌组织中DEK阳性表达率高于CIN组织和正常组织(X2=38.05,P〈0.01;)(2=5.77,P〈0.05);Hpa基因在宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为75.6%、24.4%和10.0%,宫颈癌组织中Hpa阳性表达率高于CIN组织和正常组织(x2=31.69,12.94,P〈0.01)。(2)在宫颈癌组织中DEK基因表达与Hpa基因表达呈正相关(r=0.617,P=0.001)。结论宫颈癌组织及CIN组织中DEK、Hpa的表达共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生和发展。
- 刘岿然杨雨张淑兰
- 双胎妊娠孕妇的心理压力及压力源研究被引量:7
- 2011年
- 目的分析双胎妊娠孕妇的压力水平,探讨双胎妊娠孕妇主要压力源及压力管理。方法采用妊娠压力量表测量56例双胎妊娠孕妇的压力水平及压力源,56例单胎妊娠孕妇为对照组。结果双胎妊娠孕妇心理压力处于中度水平,高于单胎孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,"为确保母子健康和安全而引发的压力感"因子分值最高;"担心胎儿能否安全娩出"压力源发生频率居双胎及单胎孕妇压力源的首位。结论医务工作者应重视双胎妊娠孕妇的压力,有效进行压力管理,确保母婴健康。
- 刘岿然赵敏杨雨刘彩霞
- 关键词:双胎妊娠心理压力压力源压力管理