杨章萍
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心更多>>
- 发文基金：福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 辅酶Q_(10)菌种选育及高通量筛选研究进展被引量：1
- 2012年
- 辅酶Q10在预防和治疗人体疾病上起到非常重要的作用,广泛应用于化妆品和保健品领域,其市场需求和工业产量均持续扩大。微生物发酵法制备辅酶Q10是目前最经济且有前景的方法,而选育获得高产菌株是微生物发酵生产的关键。通常,采用传统或现代遗传改造技术处理菌株,产生大量突变后代,然后从中筛选出增幅最大的高产菌株。由于微生物突变是随机不定向的,因此高通量的筛选技术是实现突变库快速高效筛选和提高育种效率的保障。综述了近年来国内外在辅酶Q10高产菌株选育方面的技术和原理进展,以及显色定量法、紫外薄层色谱、HPLC,UPLC等技术在其高通量筛选方面的应用等相关研究进展。
- 庄秀红陈林杨章萍王明兹林清强柯崇榕黄建忠
- 关键词：辅酶Q10育种高通量
- 黑曲霉原生质体诱变选育果胶酶高产菌株被引量：9
- 2011年
- 通过UV和NTG诱变筛选获得了2株高产果胶酶突变株。以果胶酶产生菌黑曲霉EIM6为诱变材料,采用1.5%的溶壁酶和1.5%的纤维素酶处理其对数生长期菌丝体2 h获得高质量的原生质体。采用UV25S或50μg/mL NTG诱变30 min,构建原生质体突变库,经刚果红果胶平板筛选获得果胶酶突变株,通过液体深层培养复筛获得高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5,酶活力分别从46 598.08、46 598.08 U/mL提高至68 596.57、68 879.56 U/mL,分别提高了47.21%、47.82%。连续8次传代经发酵测酶活力表明高产突变株EIM6-U11、EIM6-N5具有较高的遗传稳定性。
- 陈林王明兹柯崇榕高媛媛庄秀红杨章萍牛俊巍黄建忠
- 关键词：黑曲霉果胶酶原生质体NTG诱变
- 木聚糖酶高产菌株EIM-30的鉴定及其产酶条件的优化被引量：1
- 2012年
- 通过对木聚糖酶高产菌株EIM-30基于形态学和18SrDNA序列的系统发育进化分析，鉴定为里氏木霉Trichoder撇reesei。在单因子实验确定EIM-30产木聚糖酶的最适碳源和氮源的基础上，通过Plackett—Burman实验对影响其产酶的相关因素进行评估并筛选出3个显著效应因子，然后应用最陡爬坡实验和响应面分析确定最适产酶培养基配方为：酵母浸膏1．50％，蛋白胨1．00％，NaC10．50％，PPG-20000．10％，MgS041．20％，CaC20．18％，（NH4）2S040．45％，甘油4．18％，乳糖3．05％，K2唧041．59％。优化后TrichodermareeseiEIM-30的液体发酵产木聚糖酶的活力可达9．857×105V／mL，较优化前提高1．98倍。
- 杨章萍蔡少丽柯崇榕黄平刘小琳余清梅庄秀红陈林林国滟黄建忠
- 关键词：木聚糖酶里氏木霉液体发酵
- 里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质被引量：5
- 2013年
- 摘要采用冻干浓缩，硫酸铵盐析，SephacrylS-200HighResolution凝胶柱层析，HiTrapDesalting凝胶柱脱盐，HiTrap’TM SP（HP）离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化，获得两个纯化的木聚糖酶组分，分别命名为XylanaseA和XylanaseB。纯化倍数分别为3．58和3．29，回收率分别为7．02％和28．29％。SDS—PAGE结果均为单一条带，分子质量分别为29．6ku和20．9ku。酶学性质研究结果表明：XylanaseA和XylanaseB的最适反应温度分别为55℃和60℃；温度低于50℃，两种酶的稳定性都很好；最适pH一样，都为5．0；pH稳定范围也一样，都为3．5～7．0；Mn2＋、Tris对XylanaseA有激活作用，Fe2＋、Cu2＋、SDS则对该酶有抑制作用；Mn2＋对XylanaseB有激活作用，Zn2＋、Ca2＋、Fe2＋、Cu2＋、Ba2＋、Mg2＋及SDS则对该酶有抑制作用。
- 蔡少丽杨章萍黄建忠
- 关键词：里氏木霉木聚糖酶分离纯化酶学性质
- 中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达被引量：2
- 2011年
- 利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。
- 林国滟蔡少丽黄平郑海英柯崇榕杨章萍蔡水淋林艺平黄建忠
- 关键词：特异腐质霉毕赤酵母异源表达
