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精子介导法制备转基因鸡的研究被引量：3: 2007年; 以LacZ基因为报告基因,构建载体质粒p-OV-β-Gal,转移到鸡早期胚胎内,对外源基因的整合及表达情况进行检测分析,为制备转基因鸡探索新的方法。采用脂质体介导法、精子介导法以及电激法相结合的方法将载体质粒p-OV-β-Gal转移到鸡早期胚胎内,进行转基因鸡研究,结果发现其外源基因整合阳性率为13.2%(7/53),表达阳性率为20.7%(11/53)。说明该方法可作为制备转基因鸡的有效方法。; 苗向阳丁淑燕郝慧芳杨文胜; 关键词：转基因精子介导法

牛输卵管上皮对小鼠胚胎发育的影响被引量：4: 2007年; 模拟发情期（0-6 d）母牛外周血雌激素和孕酮浓度的变化,添加17β-雌二醇和孕酮至TCM-199中,体外培养间情期牛输卵管上皮细胞（BOECs）,同时观察了BOECs分泌蛋白（BOEP）、发情期母牛输卵管冲洗蛋白（BOP）和小牛输卵管冲洗蛋白（COP）对小鼠胚胎发育的影响。结果表明：①类固醇激素可以调节和启动体外培养的间情期牛输卵管上皮细胞的分泌活动;②BOEP比BOP和COP能极显著地促进胚胎的分裂和发育（P〈0.001）;③与对照组（未添加外源蛋白质,只添加胎牛血清）相比,BOEP的囊胚形成率极显著低于对照组（P〈0.01）,可能是缺乏某些分子量低于10 kD蛋白因子的协同作用,同时30~56kD分泌蛋白的存在,也可能参与了抑制和阻碍胚胎分裂和发育的过程。; 方昌阁苗向阳杨文胜; 关键词：早期胚胎体外培养

外源激素处理乏情母猪效果观察被引量：12: 1994年; 外源激素处理乏情母猪效果观察＊冯书堂，蔡正华，陶涛，杨文胜（中国农科院畜牧研究所１０００９４）陈庚芳（天津市实验动物研究中心）前言＊提高母猪年单产仔猪头数，是提高养猪业经济效＊益的一个重要指标。为实现这一目标，国际上许多养猪＊学者，探讨利用外源激素处...; 冯书堂蔡正华陶涛杨文胜陈庚芳; 关键词：母猪乏情外源激素

类固醇激素对牛输卵管上皮细胞特异性糖蛋白基因表达作用的研究被引量：2: 2004年; 模拟发情期母牛体内类固醇激素水平,在培养乏情期母牛输卵管上皮细胞的体系中添加雌二醇(E2)、孕酮(P)和血小板激活因子(plateletactivatingfactor,PAF),以诱导细胞的分泌作用。借助Northern的斑点杂交技术分析输卵管上皮特异性糖蛋白(OGP)基因的mRNA水平,研究激素及生长因子对体外培养的乏情期母牛输卵管上皮细胞分泌OGP的影响。结果显示:E2、P和PAF可以促进乏情期母牛输卵管上皮细胞OGP基因的表达。; 苗向阳方昌阁杨文胜; 关键词：类固醇激素特异性糖蛋白基因斑点杂交技术乏情发情期

类固醇激素对牛输卵管上皮细胞分泌的调节及其分泌物对小鼠胚胎发育的影响被引量：2: 1997年; 模拟发情期（０～６ｄ）母牛外周血浆雌激素和孕酮变化水平，在添加相应水平１７β－雌二醇和孕酮的ＴＣＭ－１９９液中，培养间情期牛输卵管上皮细胞（ＢＯＥＣ）。５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＢＯＥＣ分泌物，发现上皮细胞受类固醇激素作用分泌的２类蛋白质分子量与自然发情期（０～６ｄ）分泌的特异蛋白相似。证明类固醇激素可以调节和启动间情期ＢＯＥＣ的分泌活动。当雌二醇浓度高达１ｍｇ／Ｌ时，即使不加孕酮，ＢＯＥＣ仍能分泌这２类蛋白质。在培养小鼠原核胚的ＣＺＢ培养液内添加牛输卵管上皮细胞分泌蛋白（ＢＯＥＰ），与添加间情期牛输卵管冲洗蛋白（ＢＯＰ）和小牛输卵管冲洗蛋白（ＣＯＰ）相比，能显著提高通过２－细胞阶段胚胎的百分率和桑囊形成率，表明ＢＯＥＰ能较好地促进胚胎的分裂和发育。但ＢＯＥＰ组的桑囊形成率显著低于对照组，表明ＢＯＥＰ中可能缺少某些低于Ｍｒ１．０×１０４的蛋白因子的协调作用，以及含有Ｍｒ３．０×１０４～５．６×１０４的分泌蛋白的抑制作用而阻碍胚胎分裂与发育。; 杨文胜李建凡马云生程怀江许罕华朱裕鼎刘冬梅沈孝宙; 关键词：类固醇激素输卵管上皮细胞胚胎发育

小鼠早期胚胎性别鉴定的研究被引量：1: 1993年; 用改进的细胞遗传学方法制备染色体标本,鉴定了小鼠晚期桑椹胚(晚桑)、囊胚和扩展囊胚(扩囊)的性别。在实验中,利用小鼠早期胚胎染色体标本制备的理想实验参数,鉴定了242枚小鼠晚桑、囊胚和扩囊的性别,性别鉴定成功率分别为80.4％、99.0％和94.5％。以细胞遗传学方法鉴定小鼠早期胚胎性别的结果为标准,得出用间接免疫荧光法和PCR(聚合酶链反应)扩增SRY(y染色体的性别决定期)部分序列法分别鉴定100枚和26枚小鼠胚胎性别的准确率相应地为74.0％和92.3％。; 杨文胜朱裕鼎; 关键词：性别鉴定囊胚间接免疫荧光早期胚胎性别决定

转基因猪研究中供体母猪激素水平与胚胎发育阶段的关系被引量：2: 1994年; 选择３６头青年母猪进行超数排卵，发现孕酮含量与黄体数（排卵点数）呈显著相关（ｒ＿１＝０．４４４１，ｐ＜０．０１）；但与冲出胚胎数没有相关（ｒ＿２＝０．２２９６，Ｐ＞０．０５）；与２细胞以上胚胎数（不包括２细胞）均表现出强正相关（ｒ＿３＝０．６６９２，Ｐ＜０．０１）。因此，孕酮含量在一定程度上可作为胚胎发育阶段的指标。; 蔡正华冯书堂陶涛杨文胜吴兰欣刘殿魁; 关键词：母猪超数排卵孕酮

母兔超数排卵方法的研究被引量：9: 1996年; 采用相同品种、月龄和体重的处女母兔进行超数排卵试验。ｈＣＧ剂量为５０ＩＵ／ｋｇ时，按每公斤体重肌注不同的ＰＭＳＧ剂量：２０ＩＵ、３０ＩＵ、４０ＩＵ、５０ＩＵ和６０ＩＵ，平均每只母兔胚胎数（Ｎ分别为：１０．０±５．７、１６．３±１２．０、２０．１±７．３、１７．５±９．９和９．７±４．７，ＰＭＳＧ为４０ＩＵ／ｋｇ的超排效果最好。当ＰＭＳＧ４０ＩＵ／ｋｇ时，ｈＣＧ剂量分别为５０ＩＵ／ｋｇ、７０ＩＵ／ｋｇ和９０ＩＵ／ｋｇ，Ｎ相应地为２２．３±１０．５、２２．８±１４．８和２６．０±１８．４随着ｈＣＧ剂量升高，超排效果逐渐改善，但三者之间差异不显著。结果表明，过低或过高剂量的ＰＭＳＧ，显著降低母兔的超排效果，ｈＣＧ剂量的提高，有助于提高排卵率，获得较多的胚胎。; 杨文胜倪和民郭勇刘万辰李建凡朱裕鼎; 关键词：母兔超数排卵

H-Y抗血清的制备及其在小鼠胚胎性别鉴定上的应用: 1993年; 建立了完善的检测H-Y抗体的CELISA法。首次获得了C57BL/6小鼠对H-Y抗原的抗体应答曲线。高效价的H-Y抗血清明显地提高了小鼠胚胎性别鉴定的准确率。; 谭国杨文胜周鼎年朱裕鼎; 关键词：H-Y 抗原抗体胚胎性别鉴定

水平显微注射法制备转基因小鼠的研究被引量：2: 2006年; 由于传统显微注射法具有操作繁琐、技术要求高和外源基因导入率低等局限性,本试验对常规显微注射法进行改进,旨在建立一套比较完善的水平显微注射方法。采用水平微注射系统,将外源DNA片段导入胚胎的雄原核中,获得子代鼠,分娩后3周提取鼠尾基因组DNA,PCR法筛选转基因阳性鼠。本试验采用Puc/BLG IN S和Chym os in基因,共使用710枚鼠原核胚进行研究,胚胎经注射后移植了25只受体,产下仔鼠77只;妊娠率分别为33.3%(5/15)和50%(5/10),胚胎成活率分别为9.47%(41/433)和l3.00%(36/277),阳性率分别为4.88%(2/41)和8.33%(3/36)。将阳性雌鼠配种妊娠后,对外源基因整合情况进行检测,结果表明初步获得了转基因阳性小鼠。; 苗向阳杨文胜方昌阁; 关键词：小鼠转基因

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杨文胜

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