杨文利
- 作品数:59 被引量:93H指数:7
- 供职机构:中山大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广州市科委科技攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学天文地球更多>>
- 一种海葵神经毒素基因Sr5及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr5及其编码的蛋白,以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT-PCR的方法,从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr5,其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
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- 一种人白细胞介素-10基因序列及含该基因序列的大肠杆菌
- 本发明涉及一种人白细胞介素-10基因序列的人工合成及含该序列的大肠杆菌,其主要特征在于:在Human interleukin-10的35个位点进行密码子替换,替换成大肠杆菌偏爱密码子;并在以上基础上进行pTRX-hIL-...
- 徐安龙吴文言杨红彭立胜钟肖芬梁东卫剑文杨文利
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- 重组海葵溶细胞素及平颏海蛇磷脂酶A_2对血管外膜成纤维细胞增殖的影响被引量:1
- 2004年
- 目的观察重组海葵溶细胞素(rSrc)及平颏海蛇磷脂酶A2(rPLA2)对成纤维细胞增殖的影响。方法体外培养成纤维细胞,应用不同浓度的rSrc和rPLA2分别进行作用并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定成纤维细胞的增殖状态。结果各组细胞增殖率分别为:对照组0.840±0.061、rSrc 100 μg/ml组0.263±0.044、rSrc 10 μg/ml组0.418±0.054、rSrc 1 μg/ml组0.605±0.063、rSrc 100 ng/ml组0.772±0.054、rSrc 10 ng/ml组0.906±0.072、rPLA2 100 μg/ml组0.498±0.076、rPLA2 10 μg/ml组0.937±0.112、rPLA2 1 μg/ml组0.978±0.145。统计分析显示,低至1 μg/ml的rSrc仍能明显抑制大鼠成纤维细胞的增殖(P<0.01),并呈现剂量依赖性(P<0.05)。rPLA2 100 μg/ml组与对照组相比细胞增殖率有显著差异(P<0.05);rPLA2 10 μg/ml和rPLA2 1 μg/ml组与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。结论rSrc和rPLA2分别对血管外膜成纤维细胞增殖有一定的抑制作用。
- 欧阳平姜孝玉杨文利赖文岩徐安龙
- 关键词:血管外膜成纤维细胞细胞增殖
- 平颏海蛇PLA_2在大肠杆菌中的融合表达被引量:1
- 2002年
- 将编码平颏海蛇磷脂酶A2 的基因 (PLA2 9)分别克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pThioHisC和pTRX的HP trxA和trxA基因的 3′末端 ,构建符合读码框的融合表达载体pThioHisC PLA2 和pTRX PLA2 。 2 5℃下经IPTG诱导 ,PLA2 融合蛋白在两种原核系统中均能获得较高表达 ,但PLA2 在pTRX系统下的表达量和蛋白溶解性优于pThioHisC系统。将两种系统下的表达产物进行金属螯合亲和层析纯化 ,Trx PLA2 融合蛋白的纯度可达 85 %以上 ,而HP Trx PLA2 不表现出对介质的亲和性 ,难以得到纯化。由此 ,将pTRX PLA2 载体系统确立为进一步大量表达和纯化的载体系统。
- 杨文利叶兰汀邹兰汪枫徐安龙
- 关键词:平颏海蛇PLA2大肠杆菌磷脂酶A2蛇毒
- 平颏海蛇短链神经毒素以及编码该毒素的基因
- 本发明通过构建平颏海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文库和DNA测序,得到三个编码短链神经毒素的基因,分别称为sn12、sn36和sn160。采用PCR方法改造并扩增该三个cDNA,克隆到表达载体PE...
- 徐安龙钟肖芬彭立胜卫剑文吴文言杨文利
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- 家蚕质多角体病毒片段IV的全序列测定被引量:2
- 2003年
- 在随机引物建库的基础上 ,通过交叉设计引物及加单链DNA接头 ,应用RT PCR技术克隆了家蚕质多角体病毒dsRNA片段Ⅳ的全长cDNA ,并测定了它的全序列。该片段长 3,2 6 2bp ,含有一个完整的开放读码框 ,编码一个长 1 ,0 5 8氨基酸的成熟多肽。序列分析表明 ,该片段与日本BmCPV片段Ⅳ的核苷酸序列同源性为 89% ,氨基酸序列同源性为 95 %。
- 林伟杨文利徐安龙梁玉尧陈森雄戴伟君张景强
- 关键词:双链RNART-PCR
- 海蛇碱性PLA2 His48的定点突变及生理活性分析
- 反向PCR及分子克隆技术对平颏海蛇碱性磷脂酶A2PLA2-9的酶活性相关位点第48位氨基酸进行His→Asn的定点突变,将突变扩增的pTRX-PLA2-9质粒DNA片段连接后转化大肠杆菌得到重组突变表达质粒pTRX-M4...
- 杨文利卫剑文董美玲苏菁徐安龙
- 关键词:海蛇磷脂酶定点突变抗血小板聚集分子克隆
- 一种水母半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因及其表达与应用
- 本发明公开了一种新的水母半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因,以及该基因的表达及其在抑制蛋白酶水解中的应用;本发明的基因所编码的蛋白为131个氨基酸组成的前体蛋白,包括18个氨基酸的信号肽和113个氨基酸的成熟蛋白,其中成熟蛋白的分...
- 徐安龙杨彦臻彭立胜于萃玲卫剑文杨文利
- 文献传递
- 一种海葵神经毒素基因Sr6及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr6及其编码的蛋白,以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT-PCR的方法,从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr6,其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
- 文献传递
- 一种平颏海蛇磷脂酶A<Sub>2</Sub>以及编码它的基因
- 本发明通过构建平颏海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文库和DNA测序,分离出一个新的磷脂酶A<Sub>2</Sub>(简称PLA<Sub>2</Sub>)基因,命名为PLA2-9,由此推倒其编码146...
- 徐安龙杨文利卫剑文吴文言彭立胜钟肖芬
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