杨志
- 作品数:27 被引量:101H指数:5
- 供职机构:韶关学院医学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
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- Toll样受体3参与双链RNA对小鼠妊娠结局的影响被引量:2
- 2006年
- 目的:探讨Toll样受体3(TLR3)与双链RNA(dsRNA)相互作用对BALB/c和NOD/SCID小鼠妊娠结局的影响。方法:比较经过和未经预先TLR3阻断条件下同基因妊娠的BALB/c和NOD/SCID小鼠在dsRNA刺激后的胚胎吸收率(RR),并采用流式细胞术检测CD45+TLR3+细胞和CD45+CD80+细胞在CD45+细胞群中、以及CD8α+CD80+细胞在CD8α+细胞群中的百分率。结果:在dsRNA刺激下BALB/c小鼠RR显著升高,而对NOD/SCID小鼠无显著影响。BALB/c小鼠胎盘CD45+细胞群中TLR3表达率升高,并伴有CD45+CD80+细胞和CD8α+CD80+细胞百分率的升高。另可检测到CD45+细胞内IL-2表达率增高,而IL-10表达率下降;而在NOD/SCID模型中未观察到这种趋势。阻断TLR3能消除dsRNA对BALB/c小鼠胚胎排斥的诱导作用,并同时降低CD45+细胞群中CD80的表达率。结论:dsRNA与TLR3的相互作用可能参与CD45+CD80+细胞和CD8α+CD80+细胞的动员,随后母-胎界面IL-2表达增强,而IL-10表达减弱,最终导致胚胎被排斥。dsRNA引起的胚胎排斥过程可能需要具有正常功能的T细胞和NK细胞参与。
- 林羿张家玮狄静芳杨志陈艺菁曾耀英
- 关键词:动物模型免疫缺陷TOLL样受体
- 双黄连粉针剂对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响被引量:5
- 2008年
- 目的:探讨双黄连粉针剂(以下简称SHL)对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖的影响。方法:MTT法检测SHL对小鼠淋巴细胞的毒副作用;双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术分析SHL对小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂(ConA)刺激下体外活化抗原CD69表达的影响;MTT法以及羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记技术结合流式细胞术分析SHL对小鼠T淋巴细胞在ConA诱导下体外增殖的影响。结果:SHL对小鼠淋巴结来源的淋巴细胞毒副作用非常小;终质量浓度为60、80、100、120mg/L的SHL对ConA刺激下的T淋巴细胞体外活化抗原CD69表达具有抑制作用(P<0.01);MTT法和CFDA-SE染色法都显示,终质量浓度为60、80、100、120mg/L的SHL对ConA诱导的T淋巴细胞增殖作用具有明显的抑制作用(P<0.01)。结论:SHL对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖具有明显的抑制作用。
- 杨志曾耀英黄秀艳滕菲李林宋兵姚满林
- 关键词:双黄连粉针剂T淋巴细胞体外活化增殖
- 淫羊藿提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量:1
- 2008年
- 目的研究淫羊藿水溶性提取物对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法无菌分离小鼠各部位淋巴结,制备单细胞悬液,加入不同终质量浓度(5、25、50mg/L)的淫羊藿提取物,以MTT法检测药物对T细胞活性的影响;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料CFDA-SE染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果MTT法检测淫羊藿提取物在50mg/L时细胞存活率达52.36%。ConA作用6h后,对照组CD69+表达率为(4.61±0.85)%,ConA组CD69+T细胞的比率上升至(38.30±2.54)%,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L时均抑制ConA诱导的CD3+T淋巴细胞CD69的表达(P<0.01),其表达率分别下调为(36.16±2.14)%,(30.5±1.72)%,(15.99±0.87)%。培养48、72后,对照组增殖指数(PI)分别为1.01±0.01和1.05±0.01,ConA组PI分别达到1.42±0.01、2.32±0.01,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L均抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),48h时PI分别为1.28±0.01、1.26±0.01、1.21±0.01;72h时PI分别为2.30±0.03、2.13±0.02、2.10±0.01。结论淫羊藿提取物能明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性。
- 滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林
- 关键词:淫羊藿提取物T淋巴细胞活化增殖
- 米诺环素对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的抑制作用被引量:4
- 2009年
- 为了分析MNC对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的药理效应,探讨其在体内免疫抑制作用的机制,我们采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发后48 h,取小鼠双耳称重分析MNC对DTH模型小鼠耳组织肿胀、炎性细胞浸润度和胸腺指数、脾脏指数的影响;光学显微镜下观察小鼠耳廓组织学变化;噻唑兰(MTT)法检测淋巴结淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖情况。双耳称重结果显示,MNC(70 mg/ml)处理组与DTH组相比,能明显抑制DNFB引起的炎症反应(P<0.05);耳廓局部组织学检测也表明,MNC能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润;MNC能降低DTH小鼠胸腺指数和脾脏指数,抑制淋巴结淋巴细胞(P<0.05)和脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05)。实验结果提示,MNC可显著抑制DTH小鼠耳组织肿胀和淋巴细胞浸润程度,降低胸腺和脾脏指数,抑制淋巴细胞的增殖可能是其作用机制之一。
- 姚满林曾耀英狄静芳黄秀艳杨志宋兵
- 关键词:米诺环素迟发型超敏反应淋巴细胞增殖
- 芹菜素对RAW264.7细胞增殖、分泌NO和吞噬功能的影响被引量:2
- 2008年
- 为研究芹菜素(Apigenin,AP)对RAW264.7细胞增殖、分泌一氧化氮(nitrogen monoxidum,NO)和吞噬功能的影响,首先培养RAW264.7细胞至细胞对数生长期,然后MTT法检测不同浓度(25、50、100、150和200μmol/L)的AP对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW264.7细胞增殖的影响,再用Griess试剂盒检测上述浓度AP对LPS刺激的RAW264.7细胞分秘NO的影响,并用荧光微球检测其吞噬功能的变化.结果显示25~200μmol/LAP显著抑制LPS刺激的RAW264.7细胞的增殖,并明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞分泌NO,同时明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞的吞噬功能(P〈0.01),且呈剂量依赖关系.故在一定浓度范围内,AP显著抑制LPS刺激的RAW264.7细胞增殖、分泌NO和吞噬功能,故有望通过进一步研究将其开发成为免疫调节药物.
- 梁兆端曾耀英黄秀艳杨志
- 关键词:芹菜素RAW264.7细胞增殖一氧化氮
- 红车轴草提取物对小鼠同种异基因皮片移植的影响被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosaeextract,TLE)对小鼠同种异基因皮片移植的影响。方法:受体BALB/c小鼠分为生理盐水对照组(physiologicsaline,PS)与TLE处理组,通过背-背法进行C57BL/6的全厚皮皮片移植,以观察TLE处理组移植皮片生长情况是否优于PS组。取受体小鼠淋巴细胞进行羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE)标记的增殖追踪及混合淋巴细胞反应。结果:尾静脉注射TLE25μg/kg每天的处理组移植皮片生长情况优于PS组。TLE处理组BALB/c小鼠淋巴细胞增殖低于PS组。结论:TLE可能参与了小鼠免疫系统调节,诱导了其对同种异基因皮片的耐受。
- 杨志黄秀艳狄静芳曾耀英
- 关键词:红车轴草提取物皮片移植同种异基因增殖混合淋巴细胞反应
- Forskolin对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量:2
- 2009年
- 通过研究Forskolin对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠体外CD3+T淋巴细胞活化、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α及增殖的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞中期、晚期活化标志CD25、CD71的表达水平;LuminexTM100检测晚期活化淋巴细胞培养上清中5种细胞因子的变化;羧基荧光素已酰已酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、ModFitLT软件,分析CD3+T细胞增殖情况。结果显示,终浓度为10-7、10-6、10-5mol/L的Forskolin均能降低CD3+T细胞中CD25、CD71的表达水平和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI),还能抑制IL-10、IL-2、TNF-α的产生和淋巴细胞的增殖,但能促进IFN-γ的产生,对IL-4的影响却不大。表明Forskolin在一定浓度范围内通过改变T淋巴细胞细胞因子的表达水平,进而抑制T淋巴细胞的活化和增殖,发挥免疫抑制作用。
- 宋兵曾耀英黄秀艳李林滕菲杨志姚满林
- 关键词:FORSKOLIN活化细胞因子增殖
- 淫羊藿甙对小鼠同种异基因皮片移植的影响被引量:3
- 2009年
- 目的:研究淫羊藿甙(ICA)对小鼠同种异基因皮片移植的影响。方法:试验分为腹腔注射生理盐水、ICA、环孢素A(CsA)以及CsA与ICA联用4组,5 d后将C57BL/C小鼠的背部皮片移植到BALB/c小鼠的相同位置,用眼科缝合线缝合,观察皮片愈合情况并记录皮片外观性状、排斥时间,于第11天取移植皮片做病理石蜡切片,取淋巴结细胞和脾细胞做增殖实验(CFDA-SE染色)。结果:CsA+ICA联用能够延长皮片排斥时间,使皮片愈合得更好,胸腺和脾脏指数均比单独CsA组高,切片显示浸润的炎症细胞也较少,其淋巴结细胞增殖能力明显降低。结论:CsA与ICA联合能抑制移植造成的免疫排斥反应,可能是通过抑制受体小鼠的反应性T细胞的活化增殖来降低细胞免疫反应。
- 滕菲曾耀英黄秀艳狄静芳杨志
- 关键词:淫羊藿甙皮片移植增殖流式细胞术
- 黄芩苷对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响被引量:22
- 2009年
- 目的:分析黄芩苷(BA)对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(CFDA-SE)染色,不同终浓度的BA预孵育4h,加入刀豆蛋白(ConA)或佛波醇酯类多克隆刺激剂PDB和离子霉素Ion进行刺激,以流式细胞术(FCM)结合荧光抗体染色技术检测黄芩苷对CD3+T细胞增殖率的影响;以碘化丙锭(PI)染色结合FCM分析其细胞周期分布。结果:BA(10、15、20、25mg/L)对ConA或PDB和Ion诱导的小鼠CD3+T细胞增殖均有明显的抑制作用(P<0.05),且呈浓度依赖性。对细胞周期分析表明,BA能使ConA或PDB和Ion刺激的小鼠淋巴细胞停滞于G0/G1期、S期,阻止其进入G2/M期,阻止作用随浓度的增加而增强。结论:BA对ConA或PDB和Ion诱导的小鼠CD3+T细胞增殖有明显抑制作用,能够将淋巴细胞阻滞在G0/G1期和S期,表现出明显的周期特异性。本研究提示黄芩苷有发展成免疫抑制剂的潜力。
- 李林曾耀英黄秀艳宋兵杨志滕菲姚满林
- 关键词:黄芩苷T细胞细胞增殖细胞周期
- 米诺环素对PDB刺激的小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量:1
- 2008年
- 为了分析米诺环素(MNC)对小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响,探讨其免疫抑制作用机制.我们通过分离小鼠淋巴结细胞,以佛波醇酯(PDB)刺激,用不同终浓度的MNC与淋巴细胞共培养,荧光抗体染色结合流式细胞术,检测淋巴细胞早期和中期活化抗原CD69与CD25的表达;以CFSE染色,加入多克隆刺激剂佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)进行刺激,以流式细胞仪分析MNC对淋巴细胞增殖的影响;结果,荧光抗体染色显示MNC能显著抑制PDB诱导的T细胞CD69和CD25的表达;CFSE染色结果显示,MNC对佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)诱导48 h的小鼠淋巴细胞增殖,具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性.从而我们认为MNC对小鼠淋巴细胞的体外活化和增殖具有明显的抑制作用.具有独立于其抗菌活性的抗炎作用.
- 姚满林曾耀英黄秀艳宋兵李林杨志滕菲
- 关键词:米诺环素流式细胞术T细胞活化