李珅
- 作品数：12 被引量：20H指数：3
- 供职机构：齐齐哈尔医学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用双语教学优化设计性实验被引量：1
- 2007年
- 设计性实验是科研能力培养的前奏,双语教学是本科教学持续性发展的内在要求,它们具有很多共同的优点,笔者将双语教学融合到设计性实验中,经教改研究发现,提高了设计性实验八个方面提高教学质量:突出学生的主体地位、实验课收获程度、提高学习兴趣、促进自学能力、培养独立学习能力、培养创新思维、提高查阅文献的能力、培养科研能力。所以双语教学与设计性实验的融合可以进一步提高教学质量。
- 李珅陈松张梅郭红艳冯丽孙晓杰
- 关键词：设计性实验双语教学教学效果
- PEI介导VEGFR-3siRNA转染对VEGF-C诱导LEPCs分化的影响
- 2014年
- 目的应用聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)介导淋巴管内皮祖细胞(lymphatic endothelial progenitor cells,LEPCs)VEGFR-3基因siRNA,体外沉默LEPCs VEGFR-3基因表达,观察VEGFR-3siRNA对VEGF-C诱导LEPCs分化的影响。方法采用Ficoll法分离人脐血单个核细胞,流式细胞仪、免疫荧光分选并鉴定LEPCs。PEI包裹前期实验抑制效果最好的VEGFR-3siRNA体外转染入LEPCs,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率。流式细胞仪检测经VEGF-C诱导7天各组LEPCs CD133+细胞所占比例,14天后各组LYVE-1+细胞所占比例。结果 VEGFR-3siRNA成功转染入LEPCs,转染效率30%,与lipofectimine转染效率无差异,VEGFR-3siRNA转染组7天的LEPCs CD133+细胞所占比例明显高于VEGF-C诱导组(P<0.05),而14天后两组之间LYVE-1+细胞所占比例无显著差异(P>0.05)。结论体外经由PEI介导的siRNA能有效的沉默LEPCsVEGFR-3的表达,从而抑制VEGF-C诱导的LEPCs分化。
- 陈永春金海峰谢立平王丽芳张梅李珅高喜仁李静平
- 关键词：VEGFR-3聚乙烯亚胺SIRNAVEGF-C
- RNAi体外沉默淋巴管内皮祖细胞VEGFR-3基因表达
- 2014年
- 目的应用聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹淋巴管内皮祖细胞(lymphatic endothelial progenitor cells,LEPCs)血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)基因siRNA,体外沉默VEGFR-3基因表达,研究抑制LEPCs分化抗肿瘤淋巴管新生的作用。方法 Ficoll法分离人脐血单个核细胞,流式细胞仪、免疫荧光分选并鉴定LEPCs。PEI包裹VEGFR-3siRNA并转染入LEPCs,流式细胞仪检测转染效率。RT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白质水平VEGFR-3基因沉默效果。结果 VEGFR-3siRNA成功转入LEPCs,转染效率30%。VEGFR-3siRNA转染组LEPCs VEGFR-3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论体外经由PEI介导的siRNA能有效的抑制LEPCs VEGFR-3的表达,为以LEPCs为靶点抑制肿瘤淋巴管新生提供了实验依据。
- 陈永春金海峰谢立平王丽芳张梅李珅高喜仁李静平
- 关键词：VEGFR-3聚乙烯亚胺SIRNA淋巴管新生
- PI3Kp55γ调节亚基N末端对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)调节亚基p55γN末端24个氨基酸表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭转移的影响。方法:通过脂质体介导用pEGFPC1和pEGFPN24表达质粒转染MDA-MB-231细胞,建立表达稳定融合蛋白GFP-N24和GFP的细胞系;MTT法观察转染细胞的增殖情况;流式细胞术分析细胞周期;细胞侵袭实验观察N24p55γ对细胞侵袭力的影响;明胶酶谱实验观察N24p55γ表达对基质金属蛋白酶9(MMP9)活性的影响。结果:N24p55γ的表达抑制细胞体外增殖,使细胞生长速度减慢,细胞周期G0/G1期百分率由(42.1±1.637)%上升到(51.4±0.78)%,P<0.05。N24p55γ过表达抑制MDA-MB-231细胞的运动和迁移,与对照组细胞相比,差异有统计学意义,P<0.05;明胶酶谱实验结果显示,N24p55γ抑制活化型MMP-9的表达。结论:N24p55γ不仅能抑制乳腺癌细胞的体外增殖,而且抑制乳腺癌细胞的运动和迁移,抑制细胞周期以及肿瘤转移相关基因MMP-9表达和分泌可能是其发挥作用的主要机制。
- 孙晓杰王淑英李珅吴琦赵玫黄常志
- 关键词：流式细胞术细胞增殖
- 蛋白激酶SGK2α在大肠杆菌中的表达纯化及抗体制备被引量：1
- 2010年
- 目的该研究通过SGK2α基因的克隆、原核蛋白表达以及纯化,制备抗SGK2α抗体,为进一步研究SGK2α蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用原核表达载体PGEX-4T-3构建重组质粒,并在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备抗SGK2α多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价,免疫印迹法检测抗体的特异性。结果构建了PGEX-4T-3-SGK2α原核表达质粒,经原核表达和亲和层析获得GST-SGK2α融合蛋白,蛋白纯度在90%以上;利用GST-SGK2α融合蛋白制备多克隆抗体,抗体效价阳性且具有较强的特异性。结论利用原核表达的GST-SGK2α融合蛋白成功地制备了抗SGK2α多克隆抗体,可用于免疫组织化学和免疫印迹检测以及功能研究。
- 孙晓杰周启兵赵玫李珅吴琦郭红艳黄常志
- 关键词：重组蛋白纯化多克隆抗体
- 腺病毒介导p55γ基因N末端的过表达对胃癌细胞增殖和迁移的抑制被引量：2
- 2009年
- 背景与目的:通过腺病毒介导,观察PI3K P55γ调节亚基N末端对胃癌细胞增殖和迁移的影响。材料与方法:在腺病毒E1基因转化的人胚肾细胞HEK293中扩增复制缺陷型重组腺病毒Ad-N24-GFP以及空载体病毒Ad-GFP,分别用Ad-GFP和Ad-N24-GFP感染MGC803细胞后,通过荧光显微镜观察病毒对肿瘤细胞的感染效率,计数活细胞,制作细胞生长曲线,观察Ad-N24-GFP对细胞生长的影响;并采用流式细胞术和细胞迁移实验分别检测Ad-N24-GFP对MGC803细胞周期和细胞运动迁移能力的影响。结果:重组腺病毒经过感染HEK293细胞后大量扩增,在病毒感染复数(MOI)为100时病毒对细胞的感染效率最高。与感染空载体的细胞相比,感染Ad-N24-GFP的MGC803细胞生长速度减慢、细胞倍增时间延长;Ad-N24-GFP的过表达使MGC803细胞G0/G1期百分率由(68.7±5)%上升到(84.2±5.4)%,差异具有统计学意义(P<0.05);感染Ad-N24-GFP的MGC803细胞其细胞迁移能力明显降低,与空载体组细胞相比,差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论:腺病毒介导p55γN末端24肽的过表达能够显著抑制胃癌MGC803细胞的增殖和迁移,其在胃癌的基因治疗上可能具有潜在的应用前景。
- 冯丽孙晓杰高涵李珅张梅
- 关键词：腺病毒胃癌细胞增殖迁移
- 医学院校生化教学中引入实际病例的效果观察被引量：3
- 2009年
- 采用多种教学方式与手段,提高教学质量与增强学生综合素质,是基础医学中很值得探索的课题。生化教学中引入实际病例的教学方法使学习者建构起广博而灵活的知识基础,发展有效理解、分析和解决问题的能力;具有传统教学方法不可比拟的优势,为课堂教学领域增添新的活力,转变课堂教学以知识为主导的局面,使得在课堂上培养学生实践能力成为可能。
- 李珅郭红艳张梅樊华冯丽孙晓杰
- 关键词：病例教学生物化学教学法
- PI3K p55γN末端氨基酸过表达对胃癌MGC803细胞迁移的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:观察p55γN末端24个氨基酸的过表达对胃癌MGC803细胞迁移的影响.方法:通过脂质体介导用pEGFPN24和空载体pEGFPC1质粒进行基因转染,建立稳定表达融合蛋白GFP-N24和GFP的细胞系;通过细胞划痕实验和迁移实验观察GFP-N24的过表达对细胞运动迁移的影响;明胶酶谱实验观察其对肿瘤转移相关基因MMP9表达和分泌的影响;免疫印迹实验检测GFP-N24的过表达对PI3K-Akt信号通路活性的影响.结果:建立了稳定表达融合蛋白GFP-N24的MGC803/GFP-N24细胞系和表达GFP的MGC803/GFP细胞系.细胞划痕实验和细胞迁移实验发现表达GFP-N24的MGC803细胞运动迁移能力下降(t=0.003,P<0.01).GFP-N24通过减少磷酸化Akt的表达而抑制PI3K-Akt信号的活性,但其对MMP9的表达和分泌没有影响.结论:PI3Kp55γN末端24个氨基酸通过抑制PI3K-Akt信号通路的活性而抑制胃癌MGC803细胞的迁移,其在胃癌的治疗上可能具有潜在的应用前景.
- 李珅郭红艳吴琦张梅高涵孙晓杰
- 关键词：磷脂酰肌醇3-激酶胃癌细胞
- 血清和糖皮质激素调节蛋白激酶2α过表达通过Wnt/β-Catenin信号通路抑制肝癌细胞株BEL7402增殖被引量：4
- 2010年
- 血清和糖皮质激素调节蛋白激酶(SGK)家族参与调节生长因子和激素的信号转导.为了研究SGK家族成员SGK2α在细胞中的功能,构建了真核表达质粒pEGFP-N1-SGK2α并瞬时转染HEK293细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现融合蛋白SGK2α-GFP主要定位于细胞浆,免疫共沉淀实验发现SGK2α与糖原合成激酶3β(GSK3β)存在相互作用.利用PCDNA6-V5-HisB-SGK2α质粒转染肝癌BEL7402细胞,建立稳定表达SGK2α蛋白的细胞系,通过细胞增殖实验发现,SGK2α的过表达使BEL7402细胞生长速度减慢、细胞倍增时间延长.裸鼠成瘤实验发现,与对照组细胞相比表达SGK2α的BEL7402细胞在裸鼠中的成瘤能力明显降低.免疫印迹实验证实,SGK2α的过表达不影响GSK3β的表达,但却使β-catenin和Cyclin D1的表达下调.提示影响Wnt/β-catenin信号通路关键分子的表达可能是外源性SGK2α蛋白过表达抑制BEL7402细胞增殖的分子机制.
- 孙晓杰周启兵赵玫李珅郭红艳吴琦黄常志
- 关键词：肝癌细胞增殖WNT/Β-CATENIN信号通路
- 生物化学教学中“助教协助的活力小组”学习模式的应用研究
- 2010年
- 张梅刘秀财李珅冯丽郭红艳高涵王淑英
- 关键词：生物化学教学医学基础课程助教医学生医学院校
