朱丹丹 作品数:8 被引量:21 H指数:3 供职机构: 广州中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
外源抗菌肽在转基因鱼腥草中的表达及抗茎腐病研究 被引量:9 2011年 [目的]鉴定转基因鱼腥草中外源抗菌肽的表达,分析抗茎腐病的能力。[方法]通过SDS-PAG电泳和Western blot方法检测转基因鱼腥草植株中外源抗菌肽的表达,接种不同浓度的立枯丝核菌孢子,比较转基因植株与非转基因植株的染病情况。[结果]外源抗菌肽能在转基因鱼腥草中表达;立枯丝核菌的最佳侵染孢子浓度为3×105/ml,观察时间以3d为宜,转基因鱼腥草较非转基因鱼腥草的抗茎腐病能力增强。[结论]外源抗菌肽的表达能增强转基因鱼腥草植株的抗茎腐病能力。 易浪 董燕 周联 刁玲武 朱丹丹关键词:抗菌肽 抗病性 外源抗菌肽在转基因鱼腥草中的表达及抗茎腐病研究(摘要)(英文) 被引量:1 2011年 [目的]鉴定转基因鱼腥草中外源抗菌肽的表达,分析抗茎腐病的能力。[方法]通过SDS-PAG电泳和Western blot方法检测转基因鱼腥草植株中外源抗菌肽的表达,接种不同浓度的立枯丝核菌孢子,比较转基因植株与非转基因植株的染病情况。[结果]外源抗菌肽能在转基因鱼腥草中表达;立枯丝核菌的最佳侵染孢子浓度为3×105/mL,观察时间以3d为宜,转基因鱼腥草较非转基因鱼腥草的抗茎腐病能力增强。[结论]外源抗菌肽的表达能增强转基因鱼腥草植株的抗茎腐病能力。 易浪 董燕 周联 刁玲武 朱丹丹关键词:抗菌肽 抗病性 鱼腥草叶片总RNA提取方法的比较与分析 被引量:4 2012年 【目的】建立提取鱼腥草叶片高质量RNA的有效方法。【方法】采用RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、十二烷基硫酸钠(SDS)Ⅰ法和SDSⅡ法提取鱼腥草叶片总RNA。在匀浆上清液抽提时分别选用6种试剂组合,通过现象观察,检测紫外吸光度值和琼脂糖凝胶电泳图,考察RNA的纯度、产率和完整性,比较各方法提取效果的差异。【结果】RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue法、CTAB法和SDSⅡ法使用苯酚/氯仿/异戊醇或NaCl加苯酚/氯仿/异戊醇抽提后,所得RNA纯度和完整性均好,最大得率为172.6μg/g。【结论】确定了鱼腥草总RNA提取的有效方法,为鱼腥草转录组研究打下基础。 朱丹丹 董燕 周联 华贵煌关键词:鱼腥草 RNA提取 农杆菌介导的抗菌肽基因转化阳春砂愈伤组织的研究 被引量:2 2012年 目的确定遗传转化条件,将抗菌肽CN基因转入阳春砂愈伤组织。方法以阳春砂愈伤组织为受体材料,以农杆菌EHA105/pCAMBIA1305.2-CN工程细胞介导抗菌肽CN基因转化阳春砂,设计正交实验,通过分析gus报告基因的瞬时表达比较转化影响因素,并对目的基因CN进行PCR检测。结果农杆菌浓度、侵染时间、共培养温度、共培养时间及乙酰丁香酮浓度对转化率的影响有显著差异性。阳春砂愈伤组织遗传转化的最佳条件组合是:农杆菌浓度为OD600=0.5,侵染时间10 min,共培养温度24℃,共培养时间4 d,共培养培养基添加乙酰丁香酮200μmol.L-1。gus基因瞬时表达呈阳性的愈伤组织DNA经目的基因CN的PCR检测可见清晰的目的条带。结论建立了农杆菌介导的阳春砂愈伤组织的转化条件,目的基因CN已转入阳春砂愈伤组织。 董燕 刁玲武 周联 易浪 朱丹丹关键词:农杆菌 抗菌肽 影响因素 转基因中药前期安全性评价技术探讨 被引量:2 2013年 转基因技术既可赋予中药植株有利的预期效应,也可产生不利的非预期效应。应用分子生物学技术、依据实质等同性原则对转基因中药进行基因组功能及代谢终产物的分析,可初步检查非预期效应,获得具有一定预见性的前期评价结果,为进一步的药理学、毒理学评价提供参考信息。本文探讨转基因植物相关评价技术在转基因中药中的应用。 董燕 易浪 朱丹丹 华贵煌 周联关键词:安全性评价 组学技术 实质等同性 外源抗菌肽对鱼腥草基因组功能影响的mRNA差异分析 目的:通过mRNA差异显示RT-PCR技术分析转基因鱼腥草和非转基因鱼腥草在转录组水平上的差异,探讨外源基因转化对鱼腥草基因组功能的影响,为转基因鱼腥草非预期效应的分析及进一步的安全性评价提供信息和依据,为转基因中药的安... 朱丹丹关键词:鱼腥草 安全性评价 文献传递 转抗菌肽基因鱼腥草的筛选及稳定性分析 2011年 【目的】筛选转基因鱼腥草,并初步分析外源基因在鱼腥草植株中的稳定性。【方法】以选择培养基中生长的转基因鱼腥草为材料,通过卡那霉素(Kan)叶片涂抹法进一步筛选抗性植株,并进行Kan抗性基因nptⅡ和目的基因CN(cecropin B/NP-1)的PCR分析。【结果】Kan叶片涂抹法筛选的最佳浓度为5 000 mg/L,观察时间以4 d为宜;经PCR检测验证,Kan抗性植株的nptⅡ基因阳性率达到96%,其中目的基因CN阳性率为37%。【结论】建立了适用于转基因鱼腥草的快速筛选方法,转基因鱼腥草中目的基因CN的稳定性低于抗性基因。 董燕 易浪 周联 刁玲武 朱丹丹关键词:基因 植物 阳春砂愈伤组织诱导的多因子正交试验研究 被引量:3 2011年 【目的】优化阳春砂愈伤组织诱导方法,以提高愈伤组织诱导率。【方法】采用正交设计法,观察以未成熟及成熟种子为外植体,以及培养基中添加的不同植物生长物质对阳春砂愈伤组织诱导的影响。【结果】最佳培养基为MS+二氯苯氧乙酸(2,4-D)(0.5 mg/L)+6-苄基腺嘌呤(6-BA)(2 mg/L)+AgNO3(6 mg/L)+酸水解酪蛋白(1 mg/L),植物生长物质中2,4-D对阳春砂愈伤组织的形成影响最关键,未成熟的阳春砂种子是最佳外植体,愈伤组织诱导率最高达到65.41%。【结论】植物生长物质中2,4-D对阳春砂愈伤组织的形成不可或缺,成熟程度低的阳春砂种子更适宜作为愈伤组织诱导的外植体。 刁玲武 董燕 周联 易浪 朱丹丹关键词:愈伤组织 正交试验