徐大庆
- 作品数：39 被引量：299H指数：7
- 供职机构：河北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 小麦叶锈菌(Pucciniareconditaf.sp.tritici)毒性及RAPD多态性分析
- 该文以来自河北、江苏两地的22株小麦叶锈菌作为供试菌株,采用27个小麦抗叶锈近等基因系进行了毒性测定,并且对供试菌株基因组DNA进行RAPD扩增.计算出菌株间遗传相似系数,根据聚类分析树状图进行了毒性和DNA多态性分析....
- 徐大庆
- 关键词：小麦叶锈菌毒性RAPD遗传多态性
- 文献传递
- 甜菜夜蛾围食膜几丁质结合蛋白SeCBP66在不同体系中的表达
- 2012年
- 分析甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)围食膜几丁质结合蛋白SeCBP66氨基酸序列,利用PCR技术扩增获得缺失信号肽编码区围食膜几丁质结合蛋白的基因△(s)-secbp66。将△(s)-secbp66克隆到表达载体pET28a和pPIC9K,分别转化大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115进行原核及真核表达;将△(s)-secbp66克隆到质粒pFastBacTM,转化大肠杆菌DH10Bac构建重组Bacmid,转染昆虫细胞系Sf9及BTI-TN-5B1-4(HighFive)从而在昆虫细胞系中进行表达。结果表明:SeCBP66在原核细胞中未见表达,在酵母细胞中表达产物呈弥散状,而在昆虫细胞系中则能稳定的表达116kDa的特异蛋白。
- 刘彬李瑞军郭巍孙伟明赵丹单鸣徐大庆
- 关键词：甜菜夜蛾原核表达系统毕赤酵母表达系统昆虫细胞系
- 谷氨酸棒杆菌乳酰谷胱甘肽裂合酶基因克隆、表达及活性分析
- 2019年
- 乳酰谷胱甘肽裂合酶是生物体内降解丙酮醛的重要酶之一。食品级微生物谷氨酸棒杆菌ATCC13032基因组上的NCgl0106预测为乳酰谷胱甘肽裂合酶基因,但尚缺乏实验验证。本试验首先通过pCR技术扩增出预测的谷氨酸棒状杆菌ATCC13032乳酰谷胱甘肽裂合酶基因lac,并将之与表达载体pET-28a连接,转化BL21(DE3)感受态细胞,成功获得工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-28a-lac。然后,使用IpTG诱导E.coli BL21(DE3)/pET-28a-lac表达重组蛋白Lac。SDS-PAGE试验结果表明:重组Lac蛋白在大肠杆菌进行了可溶性表达,其分子量约为14 kDa。最后对重组Lac蛋白进行了分离纯化、活性检测及酶学特性分析。应用His-tag纯化获得的重组蛋白溶液浓度为604.9μg/mL;活性检测显示重组Lac蛋白能催化丙酮醛和谷胱甘肽生成S-D-乳酰谷胱甘肽,表明谷氨酸棒杆菌lac基因是乳酰谷胱甘肽裂合酶基因;酶学特性分析表明重组乳酰谷胱甘肽裂合酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为7,金属离子K^+和Ca^(2+)对其活性略有增强作用,Ba^(2+)对酶活性几乎没有影响,Zn^(2+)、Mg^(2+)和Fe^(2+)对酶活性有一定的抑制作用,Co^(2+)和Mn^(2+)几乎完全抑制其活性,酶反应米氏常数K_m值为0.223 2 mmol/L,最大反应速率为0.025 mmol/(L·min)。
- 郝成伟李贺丹张献徐大庆
- 关键词：谷氨酸棒状杆菌酶活分析
- 小麦抗叶锈基因Lr37 ISSR分子标记的初步研究被引量：7
- 2004年
- 利用ISSR(内部简单重复序列)技术对感病品种Thatcher及20个以Thatcher为轮回亲本的小麦抗叶锈病近等基因系进行分析,找到1个与Lr37基因连锁的ISSR标记。经过多次重复发现,在一套ISSR引物中,引物UBC812在小麦抗叶锈基因Lr37近等基因系间表现多态性。当用这个引物对已知含Lr37基因的3个抗病材料及其它不含Lr37基因的感病材料进行检测时,多态性标记UBC812-1200可以从3个含Lr37基因的抗病材料中检测到1条1200bp的多态性带,而在其它感病材料中均未出现。
- 张立荣徐大庆杨文香刘大群
- 关键词：小麦近等基因系抗叶锈基因ISSR标记
- 华北大黑鳃金龟成虫周年发生动态及影响因素分析被引量：2
- 2015年
- 华北大黑鳃金龟[Holotrichia oblita(Faldermann)]是一种为害多种作物的重要地下害虫,为了解其近年的发生动态以便针对性防治,于2010-2013年对其成虫出土规律进行了周年系统研究,并对其发生期和发生量影响因素进行了初步分析。结果表明,2010-2013年华北大黑鳃金龟的出土盛期仍在5月份,与文献相比总体一致,但出土期略滞后并且时间有所延长;而2013年始发期明显晚于其他年份,对其气象因素分析发现,2013年春季干旱,首次降雨在5月26日,明显晚于其他年份,其始发期也较其他年份偏晚,说明土壤湿度可能影响成虫出土始期。出土盛期成虫出土量与气象因素的灰色关联度分析表明,成虫日出土量与平均相对湿度关联最密切,其次是日均温和降雨量。研究结果为华北大黑鳃金龟的预测预报以及针对性防治提供了基础。
- 梁超郭巍陆秀君李瑞军于浩海王伟赵丹徐大庆
- 关键词：华北大黑鳃金龟气象因子灰色关联度分析
- 华北大黑鳃金龟人工饲养饲料配方及制作方法
- 本发明公开了一种华北大黑鳃金龟幼虫人工饲料及其制备方法，所述人工饲料组成为：酵母粉80g、蔗糖30g、玉米秸秆粉10g、甘蔗秸秆粉20g、Vc6g、Vb2g、氯化胆碱2.8g、山梨酸2g、琼脂17g、甲醛1mL，最终配置...
- 郭巍梁超陆秀君徐大庆李瑞军赵丹王伟
- 文献传递
- 一株新的拮抗细菌SL19及其抑菌活性物质被引量：9
- 2011年
- 生防菌SL19对多种植物病原菌有抑菌活性。通过形态观察、生理生化实验和基于16S rDNA同源性序列分析构建系统发育树,鉴定该菌为Bacillus velezensis。利用对峙实验测定了该菌的抑菌谱,发现该菌对大丽轮枝菌、尖孢镰刀菌、灰葡萄孢菌、立枯丝核菌、疮痂链霉菌等多种植物病原微生物有明显的抑菌作用。利用硫酸铵盐析法分离纯化活性物质,并对其理化性质进行初步探索显示:抑菌活性物质经60°C、80°C处理20 min后的抑菌活性不变;经100°C处理20 min,活性降低为原来的75.3%;经120°C处理20 min后抑菌活性完全丧失。对胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K、氯仿、紫外光均不敏感,SDS-PAGE检测发现该抑菌活性物质中含有分子量约为50 kD的蛋白质,初步推测该菌分泌的抑菌活性物质主要是蛋白质类物质。实验表明,该抗菌蛋白能够抑制大丽轮枝菌菌丝的生长及孢子的萌发,为该菌用于生物防治提供了理论基础。
- 刘莲娜孙伟明郭巍冯丽娜徐大庆刘大群
- 关键词：BACILLUS生物防治
- 谷氨酸棒杆菌信号肽探测载体的构建及强信号肽筛选被引量：1
- 2021年
- 强信号肽的使用是提高蛋白分泌效率的关键,筛选强信号肽具有重要的应用价值。本试验以大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌基础穿梭载体pAU2为骨架,以枯草芽孢杆菌的碱性丝氨酸蛋白酶AprE为报告蛋白,分别使用强启动子tac-M和谷氨酸棒杆菌核糖体结合位点一致序列来控制报告基因的转录和翻译,成功构建谷氨酸棒杆菌信号肽探测载体pAU20。分别对来自枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、以及谷氨酸棒杆菌中共16种Sec型信号肽编码序列进行PCR扩增,与pAU20连接,转化谷氨酸棒状杆菌,获得重组信号肽探测载体工程菌株。工程菌株摇瓶发酵培养物上清液AprE酶活测定结果表明,C. glutamicum/pAU20-Vpr、C. glutamicum/pAU20-BprA上清液比酶活分别为180.02和167.6U/mg蛋白质,均显著高于C.glutamicum/pAU20-cgr2070上清液比酶活(105.09 U/mg蛋白质);C. glutamicum/pAU20-oppA、C. glutamicum/pAU20-Epr、C. glutamicum/pAU20-cgr2063和C.glutamicum/pAU20-ywaD上清液比酶活分别为96.68、86.18、82.52和80.56U/mg蛋白质,均稍低于C. glutamicum/pAU20-cgr2070上清液比酶活。这些结果表明,信号肽Vpr、BprA、cgr2070、oppA、Epr、cgr2063和ywaD都属于谷氨酸棒杆菌强信号肽。
- 李川敏张玮祎张献刘红星徐大庆
- 关键词：谷氨酸棒状杆菌
- 益生菌发酵对大黄抑制大肠杆菌的影响被引量：6
- 2015年
- 试验研究大黄发酵后对大肠杆菌的抑菌活性,为发酵中草药饲料添加剂的研制提供参考。试验对益生菌发酵大黄的盐浓度、pH值、接种量、温度和时间等发酵条件进行优化。最终确定大黄的发酵条件为MgSO4添加量为6g、pH值7、接种量2%、温度37℃、时间24h,此条件下,发酵大黄对大肠杆菌的抑菌作用最为明显。
- 韩佳慧郭云霞李晔徐大庆吴国江郝庆红魏萌
- 关键词：大肠杆菌益生菌抑菌发酵
- 一种昆虫的诱捕装置
- 本实用新型涉及一种用于控制农业有害昆虫的诱捕装置，具有使用方便、诱捕方法简单、诱捕效率高等优点。这个装置充分利用昆虫的趋光特性或信息素诱集特性，使昆虫能快速准确的进入到装置中，而不能出来，兼具诱杀多种农作物害虫，例如金龟...
- 康占海郭巍李瑞军陆秀君徐大庆李星
- 文献传递
