张新昌
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
- 供职机构：山东大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 抗棉铃虫组织蛋白酶B单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2004年
- 分别以棉铃虫组织表达的组织蛋白酶B和基因重组的大肠杆菌表达的组织蛋白酶B为抗原免疫BALB c小鼠 ,选择血清抗体滴度高的免疫小鼠 ,取其脾细胞和Sp2 0骨髓瘤细胞进行细胞融合 .经ELISA法筛选阳性克隆和有限稀释法克隆细胞 ,共获得分泌抗组织蛋白酶B的单克隆抗体杂交瘤细胞 3株 ,分别命名为 9D5 ,10 0E2和10 0H6 .以ELISA法和Westernblotting法对 3株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行了特异性鉴定 ,其中 9D5和10 0E2能够同时识别两种不同来源的组织蛋白酶B ,而 10 0H6只能识别基因重组的大肠杆菌表达的组织蛋白酶B .
- 杨晓梅侯立静康翠洁邵红莲张新昌杜欣军王金星赵小凡
- 关键词：棉铃虫组织蛋白酶B单克隆抗体WESTEMBLOTTING
- 棉铃虫组织蛋白酶B酶原在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2006年
- 棉铃虫组织蛋白酶B(Helicoverpa armigeraCathepsin B,HCB)属于半胱氨酸蛋白酶类,参与胚胎发育中卵黄蛋白水解供给胚胎发育的氨基酸。将HCB基因克隆到pPIC9K载体并转化毕赤酵母KM71菌株,经甲醇诱导,HCB表达并分泌到培养上清中。表达产物经SDS-PAGE测定分子量为38kDa,与HCB基因编码的蛋白质分子量一致。用HCB的特异性抗体检测表明重组表达产物为棉铃虫组织蛋白酶B,原位水解实验显示重组表达的蛋白酶具有蛋白水解活性,表明在毕赤酵母中表达了有活性的棉铃虫组织蛋白酶B,可用于组织蛋白酶B酶原活化机理研究及开发新蛋白酶产品。
- 董杜鹃扈进冬张新昌李子劲王金星赵小凡
- 关键词：毕赤酵母
- 从大豆中纯化棉铃虫组织蛋白酶B抑制因子HCB-SoyI被引量：2
- 2005年
- 棉铃虫组织蛋白酶B(Helicoverpa armigeracathepsin B,HCB)在胚胎发育过程中降解卵黄蛋白为氨基酸,供给胚胎发育必需的养料,是棉铃虫胚胎正常发育的重要因素。许多植物种子中存在蛋白酶抑制因子,如大豆和向日葵种子。用棉铃虫组织蛋白酶B为酶源,通过硫酸铵沉淀、排阻层析和离子交换层析等方法,从大豆中分离纯化到了一种对HCB有抑制活性的蛋白酶抑制因子,命名为HCB_SoyI。用牛血清白蛋白为底物进一步证明该抑制因子对HCB具有抑制作用。该抑制因子的纯化为进一步克隆其基因奠定了基础,为转基因抗虫作物研究提供了新的候选靶标。
- 张新昌刘杨王金星赵小凡
- 关键词：棉铃虫大豆组织蛋白酶B纯化
- 棉铃虫蜕皮调节转录因子HHR3基因克隆与表达模式
- ＜正＞ 激素接受子3（hormone receptor 3,HR3）属于核激素接受子超家族,在昆虫体内蜕皮激素滴度升高时短暂表达,可能参与调控鳞翅目昆虫蜕皮级联反应中的基因表达或失活。我们用RT-PCR方法克隆了棉铃虫蜕...
- 赵小凡邵红莲徐夏莲李照民扈进冬张新昌张玉宝康翠洁王金星
- 文献传递
- 两种棉铃虫组织蛋白酶B抑制因子的纯化及性质研究
- 在动植物组织中，广泛存在着抑制蛋白酶分解活性的物质，这种物质被称为蛋白酶抑制因子(proteinaseinhibitor，PI)，棉铃虫组织蛋白酶B(HelicoverpaarmigeracathepsinB，HCB)抑...
- 张新昌
- 关键词：棉铃虫组织蛋白酶B肿瘤细胞纯化工艺
- 文献传递
