康慧芳
- 作品数：11 被引量：13H指数：2
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- 蚯蚓体内一组脱氧核糖核酸酶的酶学性质研究被引量：2
- 2008年
- 目的:研究一组新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(earthworm desoxyribonucleases,EWDs)的主要生化性质。方法:采用SDS-PAGE、MALDI-TOF、紫外分光光度方法。结果:确定了EWD1,EWD2、EWD3(总称为:EWDs)的分子量分别为157.2kDa,69.1kDa和63.5kDa。37℃,pH4.6以小牛胸腺DNA为底物时,EWDs的Km值分别为1.58mg/ml,3.95mg/ml,1.52mg/ml;Vmax分别为5.36mg/(ml·min),2.87mg/(ml·min),4.89mg/(ml·min)。EWDs在55℃保温10min,酶活性完全丧失,在40℃以下酶活性都比较稳定。这3种脱氧核糖核酸酶最适pH值分别是5.2,4.4,4.8,酸性条件下较稳定。Mn2+,Ca2+是蚯蚓组织脱氧核糖核酸酶EWD1,EWD2,EWD3的抑制剂,Mg2+对EWD3有较明显的抑制作用。结论:蚯蚓组织中发现的脱氧核糖核酸酶EWDs具有独特的酶学特征,不同于已经发现的DNaseⅠ和DNaseⅡ,是种新型的脱氧核糖核酸酶,但其作用机理和分类有待于进一步的研究和归类。
- 刘志贞樊慧杰康慧芳姚建强杨利军牛勃
- 关键词：分子量酶学性质
- 一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶酶学性质的研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究蚯蚓组织中1种新型脱氧核糖核酸酶(EWD1)的主要酶学性质。方法用SDS-PAGE凝胶电泳、质谱分析、毛细管等点聚焦电泳法和酶活性测定等方法。结果EWD1的相对分子质量约为157000。Mn2+、Ca2+是该酶的抑制剂,Mg2+对酶的活性基本上没有影响。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为5.2,等电点为6.12。以小牛胸腺DNA为底物,测得Km为1.58 mg/mL,Vmax为5.36 mg/(mL.min)。结论蚯蚓组织中发现的此种脱氧核糖核酸酶EWD1具有特殊的酶学性质,明显区别于已知的脱氧核糖核酸酶类。
- 王晓媛姚建强康慧芳樊慧杰杨利军牛勃
- 关键词：蚯蚓脱氧核糖核酸酶酶学性质
- 研究蚯蚓DNase的干琼脂糖薄膜覆盖法
- 2007年
- 目的研究蚯蚓脱氧核糖核酸酶(DNase)的测定方法。方法应用干琼脂糖薄膜覆盖法(DAFO)检测蚯蚓DNase。结果DAFO用于蚯蚓DNase的种类、数量的确定,新DNase类的筛选以及DNase活性的测定。结论DAFO是研究脱氧核糖核酸酶的一种重要方法。为蚯蚓DNase及其他DNase的测定提供了可行的实验方法。
- 樊慧杰康慧芳罗佳王建华杨利军牛勃
- 关键词：地龙酶活性测定
- 一种赤子爱胜蚓脱氧核糖核酸酶作用机制的研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究赤子爱胜蚓组织中脱氧核糖核酸酶1(EWD1)作用于底物的机制。方法采用ZORBAX-Oligo柱-高效液相色谱法(HPLC)、琼脂糖电泳、紫外分光光度法等分析技术,进行了蚯蚓EWD1对环状、线状DNA、单链DNA的降解中间产物和终产物的观察和分析。结果EWD1对所有形式的DNA底物均有降解作用,对单链DNA的降解产物为较均一的、<18bp的寡核苷酸,并显示EWD1无降解RNA的作用。结论蚯蚓组织中发现的EWD1能够分解多种来源的遗传物质,属于脱氧核糖核酸内切酶。
- 康慧芳刘志贞樊慧杰张建林罗佳杨利军牛勃
- 关键词：地龙底物
- 减压沸腾技术用于达芬奇手术器械清洗效果的研究
- 2021年
- 探讨对达芬奇手术器械采用减压沸腾技术完成清洗后获得的应用效果。方法:选取2021年3月1日~2021年7月31日使用后的达芬奇手术器械60套进行清洗研究;随机分为参照组(遵循厂家说明书及指导手册完成手术器械清洗)和试验组(采用减压沸腾技术完成手术器械清洗),各30套;比较两组器械总功能异常(破损、裂痕、松动、错位)率、清洗质量评分(操作器械、内窥镜、辅助器械、连接线)。结果:试验组器械总功能异常(破损、裂痕、松动、错位)率(6.67%)低于参照组(40.00%)(P<0.05);试验组操作器械、内窥镜、辅助器械、连接线评分均高于参照组;选择表面擦拭采样对潜血残留进行检测后发现,试验组合格率同参照组比较,未呈现出明显差异(P>0.05);选择钳/剪口以及鞘管液面下张合采样后,试验组合格率高于参照组(P<0.05)。结论:减压沸腾技术有效应用后,观察组器械总功能异常率、清洗质量评分,获得明显改善,可促进达芬奇手术器械清洗综合效果显著提升。
- 李雯李雯李雯李彦洁
- 蚯蚓体腔液抗病毒活性及其机制的研究被引量：7
- 2008年
- [目的]以赤子爱胜蚓为原料,研究其体腔液的抗病毒活性及可能的机制,为新型抗病毒药物的开发提供思路。[方法]用分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法测定蚯蚓体腔液蛋白酶活性和核酸酶活性;用鸡胚培养检测其抗流感病毒的活性,乙型肝炎病毒表面抗原及e抗原诊断试剂盒检测其对乙型肝炎病毒表面抗原及e抗原的破坏作用。[结果]蚯蚓体腔液具有蛋白酶活性、核酸酶活性和抗病毒活性;各种不同浓度的蚯蚓体腔液对流感病毒的增殖都有显著的抑制作用,且可以抑制乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原表达,呈浓度依赖关系。[结论]蚯蚓体腔液具有抗病毒活性,其可能机制是蛋白酶、核酸酶及各种活性成分单独和/或协同作用的结果。
- 刘志贞康慧芳樊慧杰李方杨利军牛勃杨琦
- 关键词：赤子爱胜蚓抗病毒活性蛋白酶活性
- 蚯蚓脱氧核糖核酸酶的底物特异性及降解产物的特性被引量：1
- 2008年
- 目的研究蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶(EWD)的底物特异性及降解产物的特性。方法采用ZOR-BAX-Oligo柱-HPLC、琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法等技术,分析EWD对环状质粒DNA、线状λ-DNA、大肠杆菌基因组的降解作用,及对真核鲱精DNA、单链DNA等的降解中间产物和终产物的特性,并观察其对RNA的降解作用。结果EWD对这几种DNA均有降解作用,降解产物为较均一的、小于18bp的寡核苷酸。但EWD对RNA无降解作用。结论EWD为脱氧核糖核酸内切酶类。
- 刘志贞康慧芳樊慧杰王晓媛杨利军杨琦牛勃
- 关键词：蚯蚓脱氧核糖核酸酶底物降解产物
- 地龙脱氧核糖核酸酶的部分性质研究及作用初探被引量：1
- 2008年
- 目的研究地龙体内两种新型脱氧核糖核酸酶(LDs)的部分生化性质,并对其作用进行初步探索。方法采用Sephacryl-200柱层析、毛细管等电聚焦电泳法、琼脂糖凝胶电泳等方法。结果初步得出LD1、LD2分子量为126、62kDa;确定了等电点分别为6.12、6.05。LD1、LD2对细菌质粒DNA、λDNA均有分解作用。结论地龙中的LDs是一种新型的脱氧核糖核酸酶。明确LDs的分子量、等电点有助于优化LDs的提取工艺以及LDs的进一步研究。对细菌质粒DNA、λDNA的降解提示LDs有可能对抗细菌的耐药性。
- 樊慧杰康慧芳姚建强王晓媛杨利军牛勃
- 关键词：地龙脱氧核糖核酸酶分子量等电点
- 双胸蚓组织中一种核酸酶的纯化及其底物特异性的研究
- 目的:
1.双胸蚓组织中核酸酶粗提物的制备及核酸酶的纯化。
2.核酸酶粗提物琼脂糖凝胶测活体系的建立。
3.纯化核酸酶酶学性质的研究4.双胸蚓组织核酸酶底物特异性的初步研究方法:
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- 康慧芳
- 关键词：核酸酶底物特异性琼脂糖凝胶
- 文献传递
- 蚯蚓组织脱氧核糖核酸酶EWD3的生化性质被引量：1
- 2008年
- 目的研究赤子爱胜蚓组织中1种脱氧核糖核酸酶（EWD3）的主要生化性质。方法采用Lowry法测定酶的蛋白含量，SDS-PAGE和MALDI-TOF方法测定相对分子质量，毛细管等点聚焦电泳法测定等电点，并测定EWD3酶的酸、碱稳定性、温度稳定性、激动剂和抑制剂对酶活性的影响及酶促反应米氏常数Km值。结果EWD3酶的蛋白含量为2．1mg／ml，相对分子质量为63460，等电点为6．20，Km值为1．52mg／ml，最适pH值为4．4～5．2，不耐高温。Mg^2＋、ca^2＋、Mn^2＋、10和20mmol／LEDTA对EWD3酶活性有抑制作用。这些参数与已发现的各种DNases相比有明显差异。结论蚯蚓组织中已发现的脱氧核糖核酸酶EWD3具有特殊的酶学特征。
- 康慧芳樊慧杰王晓媛姚建强杨利军牛勃
- 关键词：赤子爱胜蚓脱氧核糖核酸酶生化性质
