宋玉林
- 作品数：51 被引量：149H指数：7
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学天文地球一般工业技术更多>>
- 血管内皮生长因子165、神经营养因子3、血管生成素1基因转染诱导骨髓间充质干细胞向神经元及血管内皮细胞分化被引量：8
- 2018年
- 背景:骨髓间充质干细胞是一种多功能间充质干细胞,具有多向分化潜能,可通过腺病毒转染等方法对其进行基因修饰,使其能够产生多种生长因子,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、神经营养因子3(neurotrophin 3,NT-3)、血管生成素1(angiopoietin 1,Ang-1)等,从而应用于组织工程研究中。目的:探讨VEGF165、NT-3、Ang-1基因转染大鼠骨髓间充质干细胞向神经元及血管内皮细胞诱导分化的可能性。方法:采用差速贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行流式细胞术和成骨、成脂诱导分化能力鉴定。以巨细胞病毒(CMV)作为启动子,构建2个腺病毒载体,其一为双顺反子载体,携带h VEGF165及Ang-1基因(Adv-Bic);其二为携带NT-3基因载体,即Adv NT-3。以不同感染复数值将Adv-Bic(绿色荧光)及Adv NT-3(红色荧光)同时转染大鼠骨髓间充质干细胞,转染2 d后根据荧光显微镜下绿色及红色荧光蛋白表达情况确定最佳感染复数值。将生长良好的第3代骨髓间充质干细胞分为2组,实验组以最适感染复数值转染Adv-Bic(无荧光标记)及Adv NT-3(无荧光标记);对照组以相同感染复数值转染空白对照病毒。两组分别于体外培养7 d后进行免疫荧光及q PCR检测。结果与结论:(1)间质干细胞表面分子CD29、CD44呈阳性表达,造血干细胞表面分子CD34、CD45呈阴性表达。骨髓间充质干细胞能够定向分化为成骨细胞及脂肪细胞;(2)病毒转染骨髓间充质干细胞48 h后荧光显微镜下观察有绿色及红色荧光蛋白表达,随着感染复数值增大荧光表达量逐渐增强,感染复数值为100时荧光表达最强烈;(3)免疫荧光及q PCR结果显示,实验组VEGF165、NT-3、Ang-1表达水平高于对照组,且血管内皮特异性标记物CD31、CD34表达水平高于对照组,神经元特异性标记物NSE、Nestin表达水平高于对照组;(4)结果提示,VEGF165、NT-3、Ang-1基因转染骨髓间充质干细胞
- 蒋星海赵彪吴凯肖仁顺王晓梅宋玉林
- 关键词：骨髓间充质干细胞基因转染血管内皮生长因子165神经营养因子3血管生成素1神经化干细胞神经营养因子3血管生成素1
- 外固定支架在开放性耻骨联合分离中的临床应用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨外固定支架在开放性耻骨联合分离中的临床效果。方法自2005-2009年采用外固定支架治疗开放性耻骨联合分离患者共10例,耻骨联合分离距离平均3.5 cm,平均随访时间15个月(14～28个月),并根据Majeed骨盆骨折评价标准进行评分。结果 10例患者均获得随访,其中优6例,良3例,可1例,差0例,优良率为90%。2例患者发生钉道反应,经过钉道周围通畅引流、加强钉道护理、口服抗生素后好转。无血管、神经并发症发生。结论外固定支架是一种有效的治疗开放性耻骨联合分离的方法。
- 付晓玲刘大仁吴凯殷明吴庆宋玉林
- 关键词：外固定支架
- 三嵌段高分子骨组织工程支架材料的制备及细胞粘附性研究被引量：9
- 2005年
- 目的 制备三嵌段高分子骨组织工程支架材料———聚丙交酯 /乙交酯 /天冬氨酸 聚乙二醇 ,并比较与聚丙交酯 共 乙交酯材料对骨髓基质细胞的粘附性 ,为骨组织工程支架材料的选择提供依据。方法 通过本体开环共聚法合成聚丙交酯 /乙交酯 /天冬氨酸 聚乙二醇三嵌段共聚物 ,用红外光谱检测 ;利用高温显微镜测定两种材料的表面接触角 ;体外培养骨髓基质细胞 ,然后分别接种至上述两种材料上 ,测定细胞粘附率和细胞粘附力 ,并进行扫描电镜观察。结果 红外光谱证明聚丙交酯 /乙交酯 /天冬氨酸 聚乙二醇三嵌段共聚物形成 ;聚丙交酯 /乙交酯 /天冬氨酸 聚乙二醇材料的表面接触角是 6 3 3度 ,聚丙交酯 共 乙交酯材料的表面接触角是 6 7 5度 ;细胞粘附率分别为 6 9 .7%和 6 1. 3% ;细胞粘附力分别为 32 1 . 1 5± 92. 39× 1 0 - 1 0 牛顿和 2 1 6. 96± 73 .76× 1 0 - 1 0 牛顿 ;扫描电镜观察结果为聚丙交酯 /乙交酯 /天冬氨酸 聚乙二醇材料表面粘附的细胞数明显多于聚丙交酯 共 乙交酯材料表面粘附的细胞数。结论 聚丙交酯 /乙交酯 /天冬氨酸 聚乙二醇材料的粘附性优于聚丙交酯 共 乙交酯材料的粘附性 ,是一种理想的骨组织工程支架材料。
- 郝杰郑启新郭晓东杨大志宋玉林全大萍罗丙红
- 关键词：生物材料细胞粘附骨髓基质细胞
- 两亲性肽自组装凝胶与神经干细胞相容性研究被引量：1
- 2008年
- 目的将鼠神经干细胞(Neural Stem Cells,NSCs)接种于肽自组装凝胶内部,观察凝胶与NSCs的相容性。方法机械分离法从乳鼠大脑皮层获取细胞,免疫组织化学鉴定;1wt%两亲性肽溶液在DMEM/F12触发下自组装为三维多孔凝胶,透射电镜观察凝胶超微结构;1×105 cells/ml的NSCs悬液分别接种于凝胶内部(三维培养体系)及多聚赖氨酸包被的盖玻片表面(二维培养体系),Calcein-AM和PI荧光标记,激光共聚焦显微镜观察NSCs的成活及增殖情况,CCK-8绘制细胞生长曲线。结果分离的细胞为Nestin阳性的NSCs,可分化为NSE阳性神经元及GFAP阳性胶质细胞;透射电镜显示凝胶由纳米纤维构成,纤维直径有3～5nm,长度100～1500nm;Calcein-AM/PI荧光双标显示:三维培养体系中,1h后NSCs有部分死亡;培养24h时,开始增殖;培养48h时,细胞增殖活跃,聚集成团。较二维培养明显。CCK-8酶标法显示:三维培养体系细胞增殖活力高于二维培养,且有显著性差异(p<0.05)。结论肽自组装三维凝胶与NSCs具有良好的细胞相容性,可促进NSCs增值。
- 宋玉林郑启新郑剑锋黄华斌
- 关键词：细胞相容性三维培养体系
- Apofix内固定联合Halo-Vest支架治疗Hangman骨折
- 2011年
- 目的总结Apofix内固定联合Halo-Vest支架治疗Hangman骨折的临床疗效,并初步评价其安全性。方法 2007年8月-2008年12月,收治11例Hangman骨折患者。男8例,女3例;年龄27～51岁,平均38岁。按Levine-Edwards分型标准分型:Ⅱ型5例,ⅡA型2例,Ⅲ型4例,其中2例合并C2、3椎间盘突出。脊髓功能根据美国脊髓损伤学会(ASIA)标准:B级3例,C级2例,D级3例,E级3例。受伤至手术时间5～10 d,平均7 d。采用后路Apofi x内固定联合Halo-Vest支架外固定治疗,其中2例合并C2、3椎间盘突出者同期行颈椎前路椎间盘切除、椎间植骨钛板内固定术。术后复查X线片示骨折愈合后拆除Halo-Vest支架及Apofi x内固定。结果术后切口均Ⅰ愈合。11例均获随访,随访时间21～36个月,平均28.5个月。术后6个月X线片示骨折均获骨性愈合,未见内固定物松动及断裂。9例未行颈椎前路手术者颈部活动基本正常,2例术前合并C2、3椎间盘突出者颈部屈曲受限。末次随访时脊髓功能ASIA评分为(88.6±19.1)分,较术前(55.3±14.3)分显著改善,差异有统计学意义(t=0.009,P=0.002)。根据Mayo(McGrory)颈椎创伤评分标准进行疗效评价,获优8例,良2例,可1例,优良率91.0%。结论应用Apofix内固定联合Halo-Vest支架治疗Hangman骨折是一种安全、有效的方法。
- 付晓玲吴凯殷明吴庆宋玉林
- 关键词：HANGMAN骨折APOFIX内固定HALO-VEST支架
- 神经组织工程支架材料的研究进展
- 2007年
- 神经组织工程运用于中枢神经损伤与疾病治疗,用以恢复病变或损伤的中枢神经系统的解剖结构与功能,神经支架材料发挥支撑与营养作用。对神经组织工程中支架材料的研究现状进行综述,并提出面临的问题及今后的研究方向。
- 宋玉林郑启新
- 关键词：神经组织工程
- 新型两亲性肽自组装凝胶与神经干细胞相容性研究
- 2009年
- 体外培养出神经干细胞(NSCs),接种于两亲性含IKVAV序列肽基三维凝胶内部,观察凝胶与NSCs的细胞相容性。从乳鼠大脑皮层机械分离获取NSCs,免疫组织化学方法鉴定;1wt%两亲性肽溶液在DMEM/F12触发下自组装为三维多孔凝胶,透射电镜(TEM)观察凝胶超微结构;1×105/mlNSCs悬液接种于三维凝胶内部(三维培养体系)及多聚赖氨酸包被的盖波片表面(二维培养体系),无血清培养,DAPI/Brdu免疫荧光双标,荧光显微镜观察NSCs的成活及增殖情况。分离培养的细胞为Nestin阳性的NSCs,可分化为NSE阳性的神经元样细胞及GFAP阳性的神经胶质样细胞;TEM显示凝胶由纳米纤维构成,纤维直径有3～5nm,长度100～1500nm;二维培养体系中,Brdu标记细胞较为稀少,多呈单个分布,而在三维培养体系中标记的细胞大多聚集为球;三维培养Brdu标记细胞阳性率明显高于二维培养(P<0.001)。肽自组装三维凝胶与NSCs细胞相容性好,可促进NSCs增殖。
- 宋玉林黄华斌郑启新廖琦
- 关键词：细胞相容性三维培养体系
- IKVAV多肽自组装纳米纤维促进PC12细胞的黏附性能被引量：3
- 2006年
- 目的:细胞黏附性能是评价神经组织工程基质材料的重要指标,拟对包含神经活性多肽片断的IKVAV多肽两亲性分子在体外进行自组装,并且检测其对PC12细胞黏附的影响。方法:实验于2005-12/2006-03在华中科技大学附属协和医院骨科实验室完成。IKVAV多肽两亲性分子委托上海波泰生物科技公司合成,并用高效液相色谱仪和质谱仪进行纯化和分析。在IKVAV多肽两亲性分子中加入稀盐酸降低pH值引发其自组装,用不同浓度的IKVAV自组装材料包被培养板,培养PC12细胞,检测IKVAV对PC12细胞黏附的影响。结果:①当IKVAV自组装材料的密度为0.58～15.0μg/cm2时,能明显增强PC12细胞黏附,而且在一定的范围内随密度增加PC12细胞的黏附率升高。②在1h和3h各IKVAV密度组的细胞黏附率之间差异无显著性。结论:IKVAV能够促进PC12细胞黏附,而且有一定的量效关系。同时,IKVAV促进PC12细胞黏附的作用迅速、稳定。
- 吴永超郑启新杜靖远宋玉林吴斌郭晓东
- 关键词：神经组织细胞粘附
- 含IKVAV肽体内诱导血管生成的实验研究
- 2007年
- 目的探讨含IKVAV肽体内自组装成凝胶材料诱导血管生成的可行性。方法实验组:配制1%的肽溶液,pH=9．0。对照组:配制16．67%的明胶,pH=7．4。各取1毫升,分别注射植入大鼠背部脊柱两侧皮下。观察植入后一周内鼠的全身反应及植入部位的皮肤变化。结果二周后取材,固定,常规HE染色及VEGF免疫组织化学染色。术后一周实验动物存活良好,无全身不良反应,植入部位皮肤无红肿、无坏死。实验组:植入点的1%的肽自组装成凝胶,HE染色显示,凝胶与周围组织间整合好,无炎性细胞浸润,周围有血管长入凝胶内部,血管腔内可发现红细胞,术后两周,VEGF免疫组织化学染色阳性。对照组:HE染色,明胶与组织的相容性好,在明胶内未发现血管;VEGF免疫组织化学染色阴性。结论含IKVAV肽体内可自组装成凝胶,并且可诱导新生血管在凝胶内生成。
- 肖锋吴永超郑启新宋玉林
- 关键词：血管生成自组装凝胶IKVAV
- 多肽自组装支架材料的研究进展
- 2007年
- 多肽自组装构建神经组织工程支架材料用以恢复神经组织的解剖结构，为中枢神经系统损伤提供一种可行的治疗方法，对多肽自组装支架材料的研究现状进行综述。
- 宋玉林郑启新
- 关键词：自组装神经组织工程
