安晓雪
- 作品数：15 被引量：21H指数：3
- 供职机构：四川农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 多头带绦虫六钩蚴Tm45W基因的克隆与原核表达
- 头蚴病是由多头带绦虫Teania multiceps的中绦期幼虫脑多头蚴Coenuruscerebralis寄生于绵羊、山羊、牛、羚牛和鹿等家养及野生偶蹄动物脑、脊髓内引起的一种严重致死性寄生虫病.本病呈世界性分布,在我...
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- 关键词：基因
- 多头带绦虫六钩蚴Tm45W基因的克隆表达与免疫原性分析被引量：1
- 2011年
- 为分析多头带绦虫Tm45W重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术首次从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增出多头带绦虫Tm45W基因。将扩增产物重组于原核表达载体pET32a(+)中,构建pET32a-Tm45W表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm45W重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果显示,Tm45W基因全长为813bp,其开放阅读框为765bp,编码255个氨基酸,与多头带绦虫新疆株多头蚴45m基因(序列号:EU326106)的部分序列同源性为90.60%;表达的重组蛋白大小为45ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫后第1周血清中即可检测到抗Tm45W蛋白的特异性抗体,并于免疫后第35天达到高峰。结果表明Tm45W重组蛋白具有较好的反应活性,能引起机体较强的体液免疫反应。
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- 关键词：六钩蚴克隆原核表达免疫原性
- 多头带绦虫多头蚴Tm7基因的克隆与原核表达
- 脑多头蚴病是由多头带绦虫Teania multiceps的中绦期幼虫脑多头蚴Coenurus cerebralis寄生于绵羊、山羊、牛、羚牛和鹿等家养及野生偶蹄动物脑、脊髓内引起的一种严重致死性寄生虫病。本病呈世界性分布...
- 安晓雪杨光友王颖旺牟静古小彬杨应东韦雷飞文建国王淑贤边尧
- 关键词：多头蚴
- 文献传递
- 一种检测羊多头蚴的酶联免疫试剂盒
- 本发明公开一种检测羊多头蚴的酶联免疫试剂盒，涉及寄生虫病免疫抗体检测技术领域。其包被原是羊多头蚴基因重组抗原蛋白，酶标记物是酶标抗抗体；酶标抗抗体是羊脑多头蚴病阳性羊血清为一抗，辣根过氧化物酶偶联兔抗羊IgG为二抗；羊多...
- 杨光友安晓雪古小彬彭雪蓉王淑贤
- 多头带绦虫Tm18抗原基因的克隆、表达与免疫原性分析被引量：2
- 2011年
- 目的为分析多头带绦虫Tm18重组蛋白的免疫原性。方法利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm18基因,将扩增产物亚克隆入pGEX-4T-1载体中,构建pGEX-4T-rTm18表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm18重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果多头带绦虫Tm18基因序列长为552 bp,包括1个396 bp的开放性阅读框。表达的重组蛋白大小约为39.4 kDa,与脑包虫患羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm18蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结论 Tm18重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑包虫疫苗的候选抗原。
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- 关键词：克隆原核表达
- 长毛兔和獭兔白细胞介素-2基因的克隆与真核表达被引量：2
- 2010年
- 采用RT-PCR法从ConA诱导培养的德系安哥拉长毛兔和白色獭兔外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到白细胞介素-2基因(IL-2),经序列测定表明,长毛兔和獭兔IL-2基因大小均为462 bp,两序列碱基组成无差异,该基因编码一个由153个氨基酸组成的多肽,包括20个氨基酸残基的信号肽和133个氨基酸残基的成熟肽。德系安哥拉长毛兔和白色獭兔IL-2基因间同源性为100%,与欧洲野兔及中国白兔的IL-2基因同源性分别为99.4%和98.9%。与GenBank中报道的猿、人、猕猴、狒狒、猫、马、大熊猫、犬、猪、水牛、山羊和鼠的IL-2核苷酸同源性分别为86.9%、86.7%、86.2%、86.1%、84.3%、84.3%、82.8%、82.6%、81.4%、76.9%、76.7%、75.0%。进化树分析发现,兔和猿的IL-2亲缘关系最近。通过脂质体法转染COS-7细胞,获得具有一定生物学活性的IL-2蛋白。
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- 关键词：长毛兔獭兔白细胞介素2克隆真核表达
- 多头带绦虫四川株的生物学特性被引量：6
- 2010年
- 通过对2只试验犬在人工感染脑多头蚴后节片排出情况和对随机选取的50个孕卵节片内虫卵数量与大小的观察,以及用终浓度为10g/L次氯酸钠溶液,在显微镜下对虫卵孵化过程的观察,期望能为动物脑包虫病预防措施的制定以及进一步开展该虫的相关研究奠定基础。结果显示,2只试验犬分别在感染后的第45、50d开始排出节片且试验犬体内孕卵节片排出的持续时间分别为142d和54d,每日排节片数最高可达64片;孕卵节片内虫卵数最少约为780枚,最多约为16 035枚,平均为5 278.800±3 696.769枚,虫卵数量主要集中在2 000～6 000范围内,共占总节片数的52%;虫卵大小为(33.74±2.71)μm×(32.33±2.09)μm;虫卵的整个孵化过程大致需要4～5min,且随着孵化时间的延长虫卵原有的外形和整个胚膜结构消失,可见透明的六钩蚴。
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- 关键词：脑多头蚴孵化
- 多头带绦虫Tm16基因的克隆表达与免疫原性分析被引量：2
- 2010年
- 为分析多头带绦虫Tm16重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm16基因,将扩增产物亚克隆入pET32a(+)载体中,构建pET32a-Tm16表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm16重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果显示,多头带绦虫Tm16基因序列长569bp,包括1个399bp的开放阅读框,与已报道的Tm16基因(序列号:EF672036)的序列同源性为99.8%。表达的重组蛋白大小约为30.69ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm16蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结果表明Tm16重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑多头蚴病疫苗的候选抗原。
- 王颖旺杨应东杨光友牟静安晓雪古小彬王淑贤边尧
- 关键词：克隆免疫原性
- 利用基因重组抗原检测羊多头蚴病的酶联免疫试剂盒
- 本发明公开一种利用基因重组抗原检测羊多头蚴病的酶联免疫试剂盒，涉及寄生虫病免疫抗体检测技术领域。其包被原是羊多头蚴基因重组抗原蛋白，酶标记物是酶标抗抗体；酶标抗抗体是羊脑多头蚴病阳性羊血清为一抗，辣根过氧化物酶偶联兔抗羊...
- 杨光友安晓雪古小彬彭雪蓉王淑贤
- 文献传递
- 多头带绦虫多头蚴Tm7基因的克隆与原核表达
- 脑多头蚴病是由多头带绦虫(Teania Multiceps)的中绦期幼虫脑多头蚴(Coenurus cerebralis)寄生于绵羊、山羊和牛等动物脑、脊髓内引起的一种严重致死性人兽共患病。该病呈全球性分布，在我国主要以...
- 安晓雪
- 文献传递
