孟欣
- 作品数：18 被引量：55H指数：5
- 供职机构：中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅资助项目辽宁省科技厅科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BAG2对蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡作用影响的观察
- 2014年
- 背景与目的：蛋白酶体抑制剂对不同组织来源的肿瘤均有抑制其增长和促进细胞凋亡的作用，其作用机制可能与Bcl-2相关抗凋亡基因2（Bcl-2-associated athanogene 2，BAG2）有关，本研究探讨BAG2在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法：选取人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC1、KTC2、KTC3、8305C和8505C，分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组；利用实时定量逆转录聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测各组细胞BAG2 mRNA表达及MG132诱导其表达的时效性；利用蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞BAG2蛋白表达。结果：MTT结果显示，FRO和KTC2细胞系对蛋白酶体抑制剂最为敏感，与空白对照组相比，MG132能不同程度的增加各种细胞BAG2 mRNA及蛋白的表达水平（P〈0.01），在FRO和KTC2细胞中，BAG2 mRNA水平较对照组增加20-25倍，蛋白质的表达水平也显著增加；时间效应实验中，敏感的FRO细胞BAG2 mRNA水平增加快，没有延迟期；并且增加的最高水平显著高于非敏感的ARO细胞（P〈0.01）。结论：BAG2是由蛋白酶体抑制作用诱导产生的新型分子，在蛋白酶体抑制剂诱导的甲状腺癌细胞的死亡中起着促凋亡作用。
- 王玉林王彪孟欣巴颖
- 关键词：蛋白酶体抑制剂凋亡甲状腺肿瘤
- 活性氧对硼替佐米诱导甲状腺癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨活性氧在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法选取4种人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC2、8305C,分别设空白对照组、还原型谷胱甘肽(GSH)组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组、硼替佐米组、硼替佐米+GSH组、硼替佐米+NAC组、R-丁胱亚磺酰亚胺(BSO)组、硼替佐米+BSO组、硼替佐米+BSO+GSH组。流式细胞仪检测细胞凋亡情况;测定还原型谷胱甘肽含量。DCFH-DA法检测细胞内活性氧簇水平。结果与空白对照组相比,4种细胞GSH组及NAC组中GSH水平显著增加(P<0.01),BSO组中GSH水平减低(P<0.05),但细胞凋亡率差异没有统计学意义(P>0.05);FRO、KTC2细胞中硼替佐米组GSH水平减低(P<0.01);ROS水平显著增加(P<0.01);与硼替佐米组相比,GSH+硼替佐米组及NAC+硼替佐米组中GSH显著增加(P<0.01),活性氧簇水平显著降低(P<0.01);细胞凋亡率显著降低(P<0.01);BSO+硼替佐米组中GSH显著减少(P<0.05);细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论活性氧簇的生成可能参与甲状腺癌细胞对蛋白酶体抑制剂硼替佐米细胞毒素的应答;耐药肿瘤细胞诱导GSH水平,进而清除活性氧簇;减少细胞内GSH可增敏甲状腺癌细胞对硼替佐米的应答。
- 冯莹张海燕孟欣都镇先王华芹邓娓娓
- 关键词：甲状腺肿瘤蛋白酶体抑制剂活性氧还原型谷胱甘肽
- 氧化应激对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响的研究被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨氧化应激在启动蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:选取4种人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC2和8305C,分别设空白对照组、万珂处理组和万珂+钛剂联合组;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡情况;Caspase-3活性测试法检测各组细胞Caspase-3活性;用荧光分光光度计法检测各组细胞蛋白酶体活性和细胞内ROS水平。结果:与空白对照组相比,蛋白酶体抑制剂万珂对人甲状腺癌细胞系FRO和KTC2具有很强的细胞凋亡诱导作用;使FRO和KTC2细胞中Caspase-3的活性显著增高,P<0.01;可持续快速抑制蛋白酶体活性,但在4组细胞中差异无统计学意义,P>0.05;万珂可显著提高活性氧簇在FRO和KTC2甲状腺癌细胞中的表达。万珂组与万珂+钛剂组活性氧簇水平在4种甲状腺癌细胞中差异均有统计学意义,P<0.05;在FRO和KTC2甲状腺癌细胞中,万珂组与万珂+钛剂组中的细胞凋亡率差异有统计学意义,P<0.01。结论:蛋白酶体抑制剂可以提高活性氧簇在甲状腺未分化癌细胞中的表达,促进肿瘤细胞的凋亡,并且这种效应可以被抗氧化剂所抑制。
- 张海燕孟欣都镇先邓娓娓刘国良王华芹
- 关键词：细胞凋亡蛋白酶体抑制剂氧化应激肿瘤
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肿瘤细胞PRDXs表达影响的观察
- 2013年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对肿瘤细胞中过氧化氧化还原蛋白(PRDXs)表达的影响及其机制。方法:选取肿瘤细胞,设立对照组和TRAIL处理组;用实时定量PCR法和蛋白质印迹法检测PRDXs在各种肿瘤细胞中的表达;用PCR法克隆PRDX4启动子,用萤光素酶含量测定其含量。结果:与对照组相比,TRAIL处理组中PRDX1、PRDX2、PRDX3、PRDX5和PRDX6mRNA及蛋白表达差异无统计学意义,P>0.05;PRDX4mRNA和蛋白的表达显著降低,P<0.01;放线菌素D处理8h时,TRAIL处理组与对照组中PRDX4mRNA降解近50%,差异无统计学意义,P>0.05;TRAIL显著降低pPRDX4/-979的活性呈剂量依赖方式。结论:TRAIL在转录水平上下调肿瘤细胞中PRDX4基因的表达,对PRDX4mRNA的稳定性没有影响。
- 张海燕孟欣都镇先邓娓娓王华芹
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体肿瘤凋亡
- 雷公藤红素上调lncRNA MEG3表达抑制肝癌细胞增殖及促进细胞凋亡被引量：12
- 2019年
- 目的:探讨MEG3在雷公藤红素诱导的肝癌HepG2细胞凋亡和细胞增殖抑制过程中的作用。方法:采用CCK-8法检测HepG2细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达,real-time PCR检测MEG3的表达。结果:雷公藤红素抑制HepG2细胞增殖、促进细胞凋亡并上调MEG3的表达;敲低MEG3的表达后显著逆转了雷公藤红素诱导的HepG2细胞增殖抑制和细胞凋亡。结论:雷公藤红素通过上调MEG3的表达抑制HepG2细胞增殖、促进细胞凋亡。
- 陈晓雷杨秀丽周天竹周梦阳李新新张海燕孟欣
- 关键词：雷公藤红素长链非编码RNA增殖凋亡肝癌
- 还原型谷胱甘肽对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响的研究被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨还原型谷胱甘肽在启动蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:选取4种人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC2和8305C,分别设空白对照组、万珂处理组;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷氨酸半胱氨酸合成酶(GCL)和谷胱甘肽合成酶(GS)的活性;实时定量PCR法检测GCL和GS mRNA的水平。结果:与对照组相比,蛋白酶体抑制剂万珂对人甲状腺癌细胞系FRO和KTC2具有很强的细胞凋亡诱导作用;万珂处理24h时,FRO、KTC2细胞中GSH水平下降,差异有统计学意义,P<0.01;ARO和8305C细胞中GSH水平显著增加,差异有统计学意义,P<0.01。万珂处理组FRO和KTC2甲状腺癌细胞中,GCL的活性没有变化而GCL mRNA也仅有轻度增加,P>0.05;但在ARO和8305C细胞中,万珂作用8h后,GCL的活性及mRNA的表达显著增加,差异有统计学意义,P<0.01;而GS活性及mRNA水平在各组细胞中的变化差异均无统计学意义,P>0.05。结论:蛋白酶体抑制剂可诱导耐药的甲状腺癌细胞中GCL转录和活性增高,提高GSH在细胞中的表达,导致蛋白酶体抑制剂诱导的肿瘤细胞凋亡受抑。
- 张海燕孟欣都镇先邓娓娓刘国良王华芹
- 关键词：蛋白酶体抑制剂还原型谷胱甘肽细胞凋亡
- PRDX1抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡机制探讨被引量：1
- 2014年
- 目的:初步探讨过氧化还原蛋白1(peroxirodoxin 1,PRDX1)抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡的机制。方法:选取人甲状腺癌细胞,设立随机序列核酸siRNA、siASK1、siPRDX1和siASK1+siPRDX1组,分别用培养液、lactacystin和MG132培养细胞;用蛋白印迹法检测PRDX1、ASK1、p38、JNK1/2、p-ASK1、p-P38和p-JNK1/2在各组甲状腺癌细胞中的表达;用微小RNA干扰技术转染细胞;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:MG132处理组中,p-ASK1是对照组的1.5倍(F=214.14,P<0.001),其下游效应子p-p38和p-JNK1/2分别为对照组的1.34(F=216.75,P<0.001)和1.94倍(F=1 601.68,P<0.001);siASK1下调MG132介导的p-ASK1为随机序列组的0.58倍(F=1 136.82,P<0.001),p-p38为随机序列组的0.73倍(F=507.00,P<0.001),p-JNK1/2为随机序列组的0.51倍(F=6 087.48,P<0.001)。甲状腺癌细胞凋亡率降低为34.25%,显著低于于随机序列组的51.98%,F=18.39,P=0.013。MG132处理组中,siPRDX1组甲状腺癌细胞凋亡率为68.99%显著高于随机序列组的49.58%和siPRDX1+siASK1联合组的41.28%,而siASK1组的甲状腺癌细胞凋亡率为31.85%,显著低于上述两组,组间差异有统计学意义,F=30.13,P<0.001。结论:PRDX1通过负向调节ASK1活性及ASK1-p38和ASK1-JNK通路,抑制ASK1介导的细胞凋亡进而消减MG132对甲状腺癌细胞毒性效应。
- 孟欣邓娓娓张海燕都镇先王华芹
- 关键词：蛋白酶体抑制剂甲状腺肿瘤
- Nrf2对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响的观察被引量：5
- 2012年
- 目的:红系衍生的核因子2相关因子2(Nrf2)在蛋白酶体抑制剂硼替佐米诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法:选取一系列人甲状腺未分化癌细胞系FRO、KTC1、KTC2、KTC3、8305C和8505C,分别设空白对照组和万珂处理组;蛋白质印迹法检测甲状腺癌细胞中Nrf2蛋白表达情况;共聚焦显微镜检测Nrf2甲状腺癌细胞核定位;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡情况。结果:与FRO和KTC2细胞相比,Nrf2在人甲状腺癌细胞系8505C和8305C细胞中基础水平呈现高表达,万珂诱导后的表达增加更高,但对万珂诱导的细胞凋亡表现出不敏感,4种细胞的细胞凋亡率分别为(51.98±3.01)%、(46.92±2.72)%、(17.33±4.18)%和(7.97±1.01)%;万珂可诱导8505C和8305C细胞中的Nrf2细胞核易位。结论:Nrf2抑制蛋白酶体抑制剂诱导的甲状腺癌细胞凋亡,其抗凋亡作用可能源于蛋白酶体抑制剂诱导其细胞核转位。
- 张海燕孟欣都镇先邓娓娓刘国良王华芹
- 关键词：细胞凋亡蛋白酶体抑制剂NRF2
- 蛋白酶体抑制剂对甲状腺未分化癌细胞ATF-4表达影响的研究
- 2012年
- 目的:探讨蛋白酶体抑制剂对甲状腺未分化癌FRO细胞中活化转录因子4(ATF-4)表达的影响,以及ATF-4在蛋白酶体抑制剂诱导FRO细胞凋亡中的作用。方法:选取人甲状腺未分化癌细胞系FRO,分别设空白对照组和蛋白酶体抑制剂MG132处理组;利用微小RNA干扰技术,减少ATF-4的表达,实时定量PCR法、蛋白质印迹法分别检测各组细胞中ATF-4、氧调节蛋白150(ORP150)mRNA和蛋白表达;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡。结果:与空白对照组相比,蛋白酶体抑制剂MG132显著增加FRO细胞系中ATF-4基因表达水平,P<0.01;与空白对照组和随机序列核酸siRNA组相比,siATF-4处理组中ATF-4、ORP150mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其凋亡率显著增加,P<0.01。结论:蛋白酶体抑制剂能够上调甲状腺未分化癌FRO细胞系中ATF-4基因的表达水平,siATF-4具有降低ATF-4及OPR150基因表达的作用,同时增加蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺未分化癌FRO细胞的凋亡作用。
- 张海燕吕岩孟欣都镇先邓娓娓王华芹
- 关键词：细胞凋亡蛋白酶体抑制剂
- siNrf2对万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响及其机制的探讨被引量：1
- 2012年
- 目的:明确Nrf2对蛋白酶体抑制剂万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡的影响及其作用途径。方法:选取Nrf2高表达的8305C细胞,用微小RNA干扰技术转染细胞,采用实时定量PCR法和蛋白质印迹法分析封闭效果,而细胞内GCLCmRNA的表达、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量和细胞凋亡率,分别由实时定量PCR法、比色法和流式细胞仪法测得。并测定siNrf2对万珂诱导其他甲状腺癌细胞凋亡的影响。结果:与对照组相比,siNrf2组在培养液和万珂处理中Nrf2mRNA和蛋白都显著减少,P<0.01;随机序列核酸siRNA和错位型siNrf2差异无统计学意义,P>0.05。与对照组相比,siNrf2能够增加万珂诱导8305C、8505C、KTC1和KTC3的细胞凋亡率,差异均有统计学意义,P<0.01;FRO和KTC2的细胞凋亡率差异无统计学意义,P>0.05。与随机序列核酸siRNA组相比,空白对照组中siNrf2转染组GCLCmRNA及GSH减少,P<0.05;万珂处理组中siNrf2转染组两者减少更显著,P<0.01。GSH和NAC(GSH的前体并能提高GSH的含量)抑制了siNrf2促万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用。结论:Nrf2抵消万珂诱导甲状腺癌细胞凋亡作用,至少部分是通过GCLC转录激活和随后GSH的生成实现的。
- 张海燕孟欣都镇先邓娓娓刘国良王华芹
- 关键词：蛋白酶体抑制剂氧化应激NRF2
