孙颜红
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺炎链球菌临床分离株喹诺酮耐药决定区突变与左氧氟沙星敏感性下降相关性研究被引量：2
- 2014年
- 目的分析杭州市肺炎链球菌临床菌株parC/parE和gyrA/gyrB喹诺酮耐药决定区（QRDR）突变,及与喹诺酮类药物敏感性下降的相关性。方法采用琼脂稀释法检测37株临床菌株对8种抗生素的最小抑菌浓度（MIC）,PCR法扩增目的基因并测序。结果对左氧氟沙星、莫西沙星和万古霉素全部敏感,其余抗生素耐药率都〉60%,对左氧氟沙星MIC≤1 mg/L和MIC=2 mg/L分别有21株和16株。所有菌株gyrA/gyrB的均无突变,其中3株parC/parE也未见突变;34株临床菌株parE有突变,其中10株同时存在parC基因突变,parE基因分别有33株和8株发生I460V和D435N突变,parC基因有8株发生S79F突变。MIC=2 mg/L的菌株中parC/parE基因同时突变、S79F和/或D435N突变明显高于MIC≤1 mg/L菌株（χ2=4.2～6.2,P〈0.05）。结论本地区未发现左氧氟沙星耐药肺炎链球菌株,parC/parE同时突变、S79F和/或D435N突变使左氧氟沙星MIC提高。监测临床菌株parC/parE和gyrA/gyrB突变情况,防止药物诱导耐药株的产生。
- 贺培园孙颜红张幼芳孙爱华
- 关键词：肺炎链球菌喹诺酮类耐药最小抑菌浓度
- 浙江省嘉兴地区健康和宫颈病变妇女人乳头瘤病毒感染情况分析被引量：9
- 2014年
- 目的 分析浙江省嘉兴地区宫颈病变及宫颈细胞学正常的妇女宫颈部位人乳头瘤病毒（HPV）感染率及基因型分布特点.方法 收集嘉兴地区4家医院经液基细胞学检查诊断为宫颈病患者426例,并选择液基细胞学检查宫颈细胞学正常的3134例同期健康体检妇女为对照,采用导流杂交法（HybriMax）对所有研究对象进行26种HPV基因型分型检测,比较有病变者与无病变者之间HPV感染率及其26种基因型的检出情况.结果 HPV DNA阳性检出率宫颈病变组（26.29％）明显高于健康体检组（11.35％）（P＜0.01）.HPV重叠感染率宫颈病变组（25.89％）明显高于宫颈细胞学正常的健康体检妇女（4.78％）（P＜0.01）.宫颈炎患者和CIN患者分别分离到的16种HPV高危型（HR-HPV） 63株（76.83％）和15种59株（83.10％） HR-HPV,CIN患者HR-HPV毒株感染率高于宫颈炎患者,但差异无统计学意义（P＞0.05）.宫颈炎患者HR-HPV构成比居前五位的分别是HPV16、33、58和18、52;CIN患者HR-HPV构成比居前五位的分别是HPV16、52和33、58、68.结论 本地区宫颈病变妇女宫颈部位HPV感染率及重叠感染情况明显高于宫颈细胞学正常的妇女,重叠感染与宫颈疾病发生相关,HPV-16、58、33和52是本地区宫颈病变妇女主要感染的高危型HPV.
- 俞春松江敏敏刘小香孙颜红孙爱华蒋锦琴张佳
- 关键词：乳头状瘤病毒宫颈疾病宫颈炎宫颈上皮内瘤样病变
- 肺炎链球菌 ciaH 基因与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性研究被引量：6
- 2015年
- 目的：构建肺炎链球菌ciaH基因敲除（ΔciaH）突变株，了解肺炎链球菌二元信号系统CiaH／CiaR中ciaH基因与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性。方法采用PCR 扩增肺炎链球菌ATCC6306株ciaH基因片段，T-A克隆后测序。构建用于敲除ciaH基因的自杀质粒pEVP3ciaH ，CaCl2法将其转化入肺炎链球菌ATCC6306株，通过同源重组、插入失活及氯霉素筛选获得肺炎链球菌ATCC6306株ciaH基因敲除突变株ΔciaH。采用PCR、测序及激光共聚焦显微镜法对ΔciaH突变株进行鉴定。采用二倍琼脂稀释法测定并比较青霉素G（ PCN）或头孢噻肟（ CTX）对ΔciaH突变株和野生株最低抑菌浓度（ MIC）及其差异。采用实时荧光定量RT-PCR（ qRT-PCR）检测1／4 MIC PCN或CTX作用前后ciaH-mRNA水平变化。结果 PCR和测序结果显示，所构建的ΔciaH突变株染色体DNA中ciaH基因被插入失活；免疫荧光法检测结果显示，ΔciaH突变株不表达CiaH蛋白。 PCN和CTX对ΔciaH突变株MIC分别为32μg／ml 和64μg／ml，明显高于野生株的0．06μg／ml 和1μg／ml （ P＜0．01）。1／4 MIC PCN或CTX作用后，肺炎链球菌ciaH-mRNA水平显著升高（P＜0．01）。结论肺炎链球菌CiaH／CiaR二元信号系统中CiaH与其对β-内酰胺类抗生素耐药性有关。
- 张少妮孙颜红楼永良严杰孙爱华
- 关键词：肺炎链球菌Β-内酰胺类抗生素耐药性
- 肺炎链球菌phpP基因重组表达及其产物PP2C型磷酸酶活性的研究
- 背景:肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）是人类细菌性肺炎主要病原体，也可引起中耳炎和致死性细菌性脑膜炎。肺炎链球菌不产生β-内酰胺酶，但近年来肺炎链球菌临床菌株对β-内酰胺类抗生素耐药率不断升...
- 孙颜红
- 关键词：肺炎链球菌酶活性
- 肺炎链球菌phpP基因重组表达及其产物PP2C型磷酸酶活性的研究被引量：2
- 2014年
- 目的：构建肺炎链球菌StkP／PhpP信号偶联中磷酸酶编码基因phpP原核表达系统，了解表达产物rPhpP磷酸酶活性及类型。方法采用PCR扩增肺炎链球菌ATCC6306株phpP基因并测序。采用常规基因工程技术构建phpP基因原核表达系统。采用SDS-PAGE及凝胶图像分析系统检查rPhpP表达情况及其可溶性，Ni-NTA亲和层析法提纯rPhpP。实时荧光定量RT-PCR检测亚致死量青霉素和头孢噻肟药物作用后phpP基因转录水平变化。采用专业生物信息学软件分析phpP基因序列中磷酸酶功能结构域及其类型。采用丝／苏氨酸磷酸酶检测试剂盒检测rPhpP水解PP2C型磷酸酶活性并测定其酶动力学参数。结果克隆的phpP基因序列与GenBank报道序列完全相同。所构建的phpP基因原核表达系统表达可溶性rPhpP。亚致死量青霉素和头孢噻肟药物作用后phpP-mRNA水平升高。 phpP基因序列中含有PP2Cc磷酸酶结构功能域。提纯的rPhpP能水解PP2C型磷酸酶底物磷酸肽[RRA（pT）VA]且活性随rPhpP浓度增加而升高，其Km 和Kcat值分别为277．35μmol／L和0．71 S－1。结论肺炎链球菌phpP基因表达产物为PP2C型磷酸酶，亚致死量青霉素和头孢噻肟可诱导phpP基因表达上调。
- 孙颜红张少妮楼永良严杰孙爱华
- 关键词：肺炎链球菌Β-内酰胺类抗生素
