孙丽
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
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- 胃癌微环境中IL-15的表达及在胃癌生长中的作用
- 目的 :研究胃癌微环境中IL-15表达水平与胃癌发生发展的关系及可能的免疫调节机制。方法 :收集37例健康人血清及96例胃癌病人术前、术后血清,比较血清中IL-15含量;随机选取40例胃癌病人并做免疫组化切片染色,检测I...
- 孙丽俞静韩奕文徐蓉曼朱伟
- 关键词：胃癌IL-15TREG细胞TH17细胞
- 文献传递
- AKT基因转染人脐带间质干细胞来源exosomes的分离及鉴定
- 2014年
- 该研究构建人AKT基因重组腺病毒载体(Ad-AKT),转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSC),分离hucMSC分泌的exosomes,检测exosomes中的成分变化,为exosomes的临床研究提供实验基础。该实验设计含有EcoR I、Xho I的限制性酶切位点的引物,PCR扩增AKT,将扩增产物克隆到带有绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)标记的穿梭质粒上。重组穿梭质粒经线性化处理后,与腺病毒骨架质粒在Stbl3中重组,筛选获得含有AKT的重组腺病毒质粒,PCR鉴定并测序。重组病毒质粒用Pac I酶切线性化,转染293A细胞,制备高效表达的Ad-AKT,并转染hucMSC。结果表明,AKT基因重组腺病毒能高效转染hucMSC,hucMSC中AKT蛋白表达增多,并且转染AKT基因的hucMSC来源的exosomes(AKT-MSC-exosomes)中AKT蛋白也增多,说明通过基因修饰可以获得过表达目的蛋白的exosomes,为exosomes的来源及应用研究提供可选择的方法。
- 马洁赵媛媛曹文明孙晓仙孙丽钱晖许文荣朱伟
- 关键词：AKT腺病毒EXOSOMES脐带间质干细胞
- EphA5蛋白在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义被引量：3
- 2015年
- 目的探讨酪氨酸蛋白激酶A5受体(Eph A5)在浆液性卵巢癌中的表达水平及其与临床病理参数的关系。方法免疫组化染色法检测浆液性卵巢癌患者组织标本中Eph A5蛋白的表达水平,进行生存分析及随访情况调查,并分析其与临床病理参数的关系。结果卵巢癌患者的Eph A5阳性表达率为90.8%(69/76),其中高表达者43例(56.6%),低表达+阴性者33例(43.4%)。Eph A5表达水平与卵巢癌患者WHO分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与患者年龄、临床分期和肿瘤直径等无关(P均>0.05)。生存分析显示,Eph A5高表达患者中位总生存期为88个月,低表达+阴性者为69个月,两者差异无统计学意义(χ2=3.342,P>0.05)。结论 Eph A5蛋白与浆液性卵巢癌患者WHO分级及淋巴结转移相关,但与生存率无关,可能成为预测肿瘤转移的标志物。
- 陆玉霞王建东孙丽赵媛媛钱晖许文荣朱伟
- 关键词：卵巢癌免疫组化染色
- 构建大鼠急性心肌梗死模型并初步探讨人脐带间充质干细胞的修复作用被引量：3
- 2013年
- 目的构建大鼠急性心肌梗死(AMI)模型并初步探讨人脐带间充质干细胞(hucMSCs)对大鼠AMI损伤的修复效果。方法用小动物呼吸机维持呼吸,开胸后快速挤出大鼠心脏,结扎左冠状动脉前降支,并结合双层荷包缝合法构建模型。经心电图,超声心动图和TTC染色多方面验证。尾静脉注射hucMSCs,观察大鼠AMI损伤修复效果。结果成功构建了大鼠AMI模型,建模后成活率高(79.2%)。与模型+PBS组左心室收缩期容积[LV Vol;s(μL):164.73±15.54]和左心室收缩期内径[LVID;s(mm):5.77±0.23]相比,模型+MSCs组[LV Vol;s(μL):116.08±9.06]和[LVID;s(mm):4.96±0.17]明显降低,F分别为75.10和107.96,P均<0.01。与模型+PBS组左心室射血分数[LVEF(%):45.55±3.71]和左心室收缩分数[LVFS(%):23.56±2.38]相比,模型+MSCs组[LVEF(%):53.99±2.32]和[LVFS(%):28.76±1.52]明显增高,F分别为65.80和62.94,P均<0.05。HE染色结果表明,模型+MSCs组细胞损伤程度明显轻于模型+PBS组。结论成功构建大鼠AMI模型并初步证明hucMSCs可以促进大鼠AMI损伤修复,为进一步研究其机制奠定了基础。
- 赵媛媛曹文明马洁孙晓仙孙丽钱晖许文荣朱伟
- 关键词：急性心肌梗死动物模型人脐带间充质干细胞
- 应用CRISPR/Cas9技术构建IL-15敲除的MGC-803胃癌细胞株被引量：2
- 2016年
- 目的 :运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立IL-15基因敲除的MGC-803胃癌细胞株。方法 :针对IL-15基因作用的功能域,设计了靶向IL-15基因Exon2的gRNA。构建PX458-gRNA重组质粒并转化感受态细胞Stbl3,筛选出重组子后进行测序,通过测序确认了所设计的gRNA的有效性。并进一步通过流式细胞分选以及ELISA法检测筛选出的MGC-803胃癌细胞株IL-15基因的表达水平。结果 :测序结果显示敲除质粒构建成功,与阴性对照组相比,转染PX458-IL-15-g RNA质粒组IL-15的表达水平明显低于阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:利用CRISPR-Cas9系统成功构建了IL-15基因敲除的MGC-803细胞,为后续研究IL-15在肿瘤中的作用机制和功能奠定了基础。
- 俞静孙丽孙晓仙陈志红钱晖许文荣朱伟
- 关键词：IL-15基因敲除
- 脐带MSC来源外体上调Smad7表达修复大鼠急性心肌损伤被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人脐带间充质干细胞来源的外体(huc-exosomes)对SD大鼠急性心肌梗死(AMI)的修复作用及其可能的分子机制。方法体内构建SD大鼠AMI模型,分为假手术组、AMI+PBS组和AMI+exosomes组,小动物高频彩色超声仪检查心功能;72 h后处死取心肌组织,western blot检测组织内Smad7蛋白变化;体外培养心肌细胞系H9C2及原代培养心肌组织细胞,免疫荧光法鉴定原代培养心肌组织细胞,分为正常氧+PBS、正常氧+exosomes、缺氧+PBS、缺氧+exosomes 4组,分别提取各组的蛋白质或RNA,用定量PCR、western blot分别检测Smad7 mRNA和蛋白质变化。结果成功构建了SD大鼠AMI模型,超声心动图结果显示,尾静脉注射huc-exosomes可改善AMI大鼠的心功能。定量PCR及western blot结果显示,exosomes处理使心肌细胞中Smad7 mRNA和蛋白质的表达水平均上调。结论 huc-exosomes对AMI有修复作用,exosomes可能通过调节Smad7的表达促进细胞修复,Smad7可作为huc-exosomes介导损伤修复的判断指标。
- 曹文明孙丽赵媛媛马洁孙晓仙展洁钱晖许文荣朱伟
- 关键词：SMAD7脐带
- 血小板增强骨髓间充质干细胞促肿瘤转移作用被引量：1
- 2018年
- 目的观察血小板作用于人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)后对肿瘤细胞转移的作用。方法体外分离培养人骨髓MSCs及健康人外周血中的血小板;实验分为MSCs组、血小板+MSCs组及肿瘤细胞上清处理血小板+MSCs组(T-血小板+MSCs),分别收集3组培养24 h后的MSCs及培养上清(SGC-7901-CM及MSCs-CM);western blot检测其肿瘤相关成纤维母细胞(CAF)标志蛋白α-SMA及Vimentin的表达;Transwell实验检测骨髓MSCs的迁移能力;流式细胞术检测SGC-7901-CM及MSCs-CM共培养后血小板P选择素的表达水平;建立BALB/c裸鼠尾静脉注射SGC-7901胃癌细胞系转移模型,观察体内肿瘤转移情况。结果 SGC-7901-CM及MSCs-CM处理的血小板P选择素的表达水平[分别为(31.4±1.71)%、(21.37±1.00)%]明显高于对照组[(3.17±0.40)%],差异有统计学意义(t分别为27.85和29.18,P均<0.01);血小板+MSCs组及T-血小板+MSCs组α-SMA蛋白[分别为(0.79±0.08)、(0.90±0.06)]及Vimentin蛋白[分别为(0.88±0.01)、(0.96±0.04)]的表达水平均明显高于MSCs组[分别为(0.64±0.02)、(0.75±0.05)],差异有统计学意义(t分别为2.96和6.45,4.73和5.73,P均<0.01);血小板+MSCs组及T-血小板+MSCs组迁移细胞数[分别为(340.3±27.7)个、(424.3±17.6)个]明显高于MSCs组[(220.7±19.4)个],差异有统计学意义(t分别为6.14和13.48,P均<0.01);体内实验结果表明,血小板+MSCs组转移灶及T-血小板+MSCs组转移灶[分别为(4±2)个、(21±4)个]明显高于MSCs组[(0.33±0.06)个],差异有统计学意义(t分别为3.051和8.857,P均<0.01)。结论血小板能促进骨髓MSCs迁移,并能增强骨髓MSCs体内促进肿瘤细胞转移能力。
- 李竹倩王倩倩徐长根纪宏革陆益龙赵向东仇荣孙丽陈斌王梅许文荣朱伟
- 关键词：间充质干细胞血小板肿瘤转移
- 甲状腺乳头状癌是否合并桥本甲状腺炎的临床病理学特征差异性分析被引量：7
- 2016年
- 目的研究甲状腺乳头状癌患者是否合并桥本甲状腺炎的临床病理学特征的差异。方法回顾性分析2010年5月至2015年6月于江苏大学附属昆山第一人民医院甲乳外科手术的276例初治甲状腺乳头状癌患者的医疗记录,对合并与未合并桥本甲状腺炎的甲状腺乳头状癌患者的年龄、性别、肿瘤最大径、多灶性、淋巴结转移、TNM分期等临床病理学特征进行比较。结果在276例甲状腺乳头状癌患者中,48例(17.4%)合并桥本甲状腺炎。与未合并桥本甲状腺炎的乳头状癌患者相比,合并桥本甲状腺炎者女性比例更高、肿瘤最大径更小、淋巴结转移以及TNM分期为Ⅲ/Ⅳ期的比例更低(P<0.05)、患病年龄更小(P=0.074)。单因素回归分析显示,桥本甲状腺炎与女性(OR=6.133;95%CI=1.437~26.175)、肿瘤大小(OR=0.406;95%CI=0.204~0.807)、淋巴结转移(OR=2.304;95%CI=1.174~4.522)、TNM分期(OR=0.187;95%CI=0.044~0.801)显著相关,与年龄临界相关(OR=1.023;95%CI=0.998~1.048;P=0.075)。多因素回归分析显示,与未合并桥本甲状腺炎的乳头状癌患者相比,女性(OR=5.930;95%CI=1.363~25.798)以及患病年龄更轻(OR=1.034;95%CI=1.003~1.065)是甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎的独立临床因子。结论桥本甲状腺炎与甲状腺乳头状癌密切相关。与未合并桥本甲状腺炎的患者相比,合并桥本甲状腺炎的乳头状癌患者女性更多见,年龄更年轻,而女性和年轻正是影响甲状腺癌死亡率最重要的预后因子。
- 杨晓晨周沁孙丽张颂文
- 关键词：桥本病
- 胃癌微环境中IL-15的表达及在胃癌生长中的作用
- 目的：研究胃癌微环境中IL-15表达水平与胃癌发生发展的关系及可能的免疫调节机制。方法：收集37例健康人血清及96例胃癌病人术前、术后血清,比较血清中IL-15含量;随机选取40例胃癌病人并做免疫组化切片染色,检测IL-...
- 孙丽俞静韩奕文徐蓉曼朱伟
- 关键词：胃癌IL-15TREG细胞TH17细胞
