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同源序列法克隆植物抗病基因研究进展及其在野生稻中的应用被引量：6: 2010年; 随着各种测序计划的完成及生物信息学的发展,植物抗病基因的克隆取得了很大进展,至今有几十个基因已被克隆。研究发现,大多抗病基因都存在特异的保守序列,如富亮氨酸重复序列、核苷酸结合位点、丝氨酸-苏氨酸激酶等。抗病基因的结构特征不仅预示了植物抗病反应中可能的作用机制,而且为分离克隆植物抗病基因提供了一条可行的新途径,如基于同源序列的候选基因法,又称为同源序列法。我们简要综述了已克隆抗病基因的结构、同源序列法克隆抗病基因的研究进展,并对其在野生稻中的应用做了展望。; 李美玲严成其王栩鸣杨勇余初浪周洁程晔陈剑平; 关键词：抗病基因克隆野生稻

基于Gateway技术的低成本植物双分子荧光互补分析系统被引量：6: 2013年; 创制基于Gateway重组技术的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)载体,同时创制低成本低克隆背景的Gateway入门载体。利用入门载体,采用Gateway技术快速将目标基因重组到BiFC目标载体,并采用农杆菌注射侵染烟草的方法观察荧光互作结果。构建的Gateway入门载体,由于带有ccdB基因,非线性化的载体无法在ccdB敏感菌株中生长,因此消除了载体本身的背景。同时由XcmⅠ酶切后产生的T突出,可以很好地与PCR产物结合,连接效率和普通商业化T载体一致。此外,由于载体可由实验室自行制备且采用了TA克隆,创制入门克隆的成本大大降低。借助该研究改造的BiFC目标载体,目的基因能快速地重组到目的载体用于基因互作鉴定。利用本研究构建的Gateway系统,能够以较低成本快速的进行基因克隆和互作研究。; 周洁王栩鸣陈斌陈娟杨勇余初浪严成其陈剑平; 关键词：BIFC 基因互作 GATEWAY

多重蓝莓病毒的早期防治技术: 本发明提供了蓝莓培育的方法，用于在蓝莓培育的过程中防治或降低病毒污染，其包括对蓝莓进行预处理，获得消毒的根尖；在培养基上将根尖培养成再生植株幼芽；在培养基上将幼芽培养成小苗；在培养基上使得小苗长成试管苗；并任选分组取样并...; 严成其陈剑平钱长根钱尖锐朱宏芬毛东海王芳沈岚刘健张国芳黄坚杨勇王栩鸣余初浪周洁张维林羊健程晔; 文献传递

一氧化氮参与疣粒野生稻对水稻白叶枯病的抗性被引量：2: 2014年; 疣粒野生稻高抗水稻白叶枯病,但是其具体的抗性机制目前仍不清楚。一氧化氮(nitric oxide,NO)是一种重要的信号分子,在植物的抗病反应中起到了重要的作用,然而对于NO是否参与疣粒野生稻对水稻白叶枯病的抗性目前仍缺乏研究。以抗病的疣粒野生稻和感病的水稻品种日本晴为材料,研究了接种白叶枯病菌对叶片病斑、NO含量、NO亚细胞定位和木质部超微结构的影响。结果表明,病菌侵染导致了日本晴叶片呈现枯黄色的干枯斑,疣粒野生稻叶片呈现褐色的凋亡斑,而且野生稻的病斑长度要明显短于日本晴的病斑长度。接种白叶枯病菌后日本晴叶片内NO含量未见明显的变化,而野生稻叶片内NO含量则显著升高,并且大部分的NO定位于导管细胞壁内。进一步通过电镜观察,发现病菌侵染诱导了野生稻叶片导管细胞壁厚度的明显增加。基于这些结果,推测NO参与了疣粒野生稻对白叶枯病的抗性,其功能可能包括诱导导管细胞壁增厚,从而抑制病菌的进一步侵染。; 成晓越王栩鸣杨勇周洁余初浪韩雪颖程晔严成其陈剑平; 关键词：疣粒野生稻水稻白叶枯病一氧化氮亚细胞定位

水稻抗白叶枯病相关基因的亚细胞定位被引量：1: 2014年; 利用亚细胞定位技术对水稻抗白叶枯病相关基因的表达产物进行了分析,为基因功能分析提供了重要信息。通过前期基因芯片筛选、半定量/定量PCR的验证及基因功能注释,从高抗白叶枯病水稻品种Y73中筛选了18个潜在的与抗白叶枯病相关的基因,并在烟草叶片细胞中进行亚细胞定位分析。通过观察融合有绿色荧光标记(sGFP)的表达产物,初步了解这些基因在烟草细胞中的表达位置。经过激光共聚焦显微镜观察后发现:其中4个基因的sGFP融合蛋白定位于细胞核上,可能发挥了转录因子的功能;4个基因的sGFP融合蛋白定位于细胞质膜上,推测可能与细胞质膜的稳定或控制蛋白转运相关;4个基因的sGFP融合蛋白同时定位于细胞核和细胞质膜上;另有6个基因的sGFP融合表达后没有观察到明显的定位信号。; 陈斌李冬月王栩鸣周洁严成其陈剑平; 关键词：水稻白叶枯病抗病相关基因亚细胞定位

水稻转基因植株的高效筛选鉴定技术: 2013年; 水稻转基因植株的鉴定和筛选是目前研究中的难点,本研究的方法是构建HPT-mCherry融合表达载体,采用农杆菌介导的转基因技术获得转基因植株;并利用荧光显微镜观察转基因愈伤和植株。HPT与mCherry融合后互不影响,一方面可以利用潮霉素抗性筛选愈伤,另一方面能够通过观察mCherry红色荧光蛋白进行鉴定研究表明HPTmCherry融合标签,可以用于转基因愈伤的筛选和转基因植株的高效鉴定。; 陈娟周洁王栩鸣杨勇严成其

新的融合标签进行水稻转基因快速筛选的方法: 本发明公开了新的带有融合标签的植物转基因转化载体，其能够快速有效的筛选和鉴定转基因阳性植株；另外，本发明还提供了新的植物转基因的筛选方法和植物转基因的方法等。; 周洁严成其杨勇王栩鸣余初浪程晔陈剑平

浙西北单季稻白叶枯病药剂防控与保产效果被引量：3: 2016年; 通过5种杀菌剂防治单季稻白叶枯病的田间试验表明,初病期施药1次,以667 m2施用20%噻唑锌悬浮剂100 m L、20%叶枯唑可湿性粉剂100 g、20%噻森铜悬浮剂100 m L的防效较好,病指防效分别为31.4%-39.2%,15.8%-21.7%和12.5%-36.5%;药后14 d,以667 m2施用20%噻菌铜悬浮剂100 m L、20%叶枯唑可湿性粉剂100 g、20%噻唑锌悬浮剂100 m L的防效较好,病指防效分别为18.3%,13.8%-26.7%和10.5%-14.0%。在伤口期、初病期和激增期每667 m2各喷施1次20%噻菌铜悬浮剂100 m L,则以伤口期病菌接触前施药1次效果最佳,药后7 d病指防效达90.4%;药后21 d,2次较单次用药的病指防效提高19.9%。初病期防治白叶枯病,每667 m2喷施20%噻唑锌悬浮剂100 m L、20%噻菌铜悬浮剂100 m L、20%叶枯唑可湿性粉剂100 g、20%噻森铜悬浮剂100 m L各1次,对单季稻均有较好的保产效果,分别为23.9%-29.9%,21.0%,20.1%-22.3%,15.9%-18.0%。667 m2施用20%噻菌铜100 m L,以在伤口期病菌接触前施药1次的保产效果最佳,达28.8%;其次在初病期施药1次,保产效果为21.0%;而在伤口期病菌接触前＋激增期、初病期＋激增期用药2次的保产效果均比单用1次增效明显。; 赵敏陈建明严成其李荣黄元杰梁伟芳周洁余初浪黄坚张国忠陈剑平; 关键词：单季稻白叶枯病保产效果

草莓的根尖脱毒与快繁技术: 本发明提供了草莓脱毒与组培的方法，其包括对草莓进行预处理，获得消毒的根尖；在根尖诱导培养基上将根尖诱导培养成再生植株幼芽；在增殖培养基上将幼芽增殖培养成小苗；在继代生长培养基上使得小苗长成继代小苗；在生根培养基上使得继代...; 严成其陈剑平钱长根钱尖锐杨勇王栩鸣周洁张维林余初浪程晔王芳沈岚朱宏芬刘健张国芳黄坚; 文献传递

水稻人工miRNA基因干涉载体快速构建方法: 本发明涉及水稻人工miRNA基因干涉载体快速构建方法，尤其涉及水稻快速沉默载体改造用DNA序列和该DNA序列的合成方法以及采用该DNA序列用于建立高效的水稻人工miRNA基因干涉载体。本发明将沉默相关片段两端的不变区域事...; 王栩鸣杨勇余初浪周洁严成其程晔陈剑平

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周洁

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