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儿童心脏右房室瓣解剖类型调查: 2007年; 目的为临床儿童心脏右房室瓣病变的诊治提供解剖学资料。方法对135例出生1 d至15岁儿童心脏标本的右房室瓣主瓣和副瓣的形态进行观测。结果主瓣类型分为二尖型、三尖型、四尖型和五尖型。主瓣分为内瓣、前瓣、后瓣和外瓣、后内瓣、前外瓣和后外瓣。主瓣形状分为三角形、半椭圆形、半圆形、长方形和梯形。40例有副瓣,其中33例有两个副瓣,7例有1个副瓣。副瓣分为前内副瓣、后内副瓣、前外副瓣和后外副瓣。右房室环形状可分为椭圆形、圆形、三角形和肾形,其中椭圆形最多见。结论主瓣和副瓣都有明显位置,它们可以密闭心室与心房的交通,使血液不能逆流入心房。了解儿童右房室瓣的解剖类型可供手术时参考。; 孟镔赵集中孟迪生李大巍苑进凯蔡明志卢海黄林; 关键词：右房室瓣主瓣副瓣解剖学

Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因重编程人皮肤成纤维细胞的实验研究被引量：3: 2011年; 目的探讨利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因能否将人皮肤成纤维细胞(HSF)编程为诱导性多潜能干细胞(iPS)。方法①利用组织块贴壁法原代分离培养HSF细胞。②包装生产携带Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因的逆转录病毒上清液感染HSF细胞。③病毒感染后HSF细胞培养,镜下观察HSF细胞形态学变化。④应用细胞碱性磷酸酶(AP)染色检测细胞基因表达量和体内分化畸胎瘤实验对细胞生物学特性进行鉴定。结果原代HSF细胞编程后形态类似于胚胎干细胞,细胞AP染色阳性,内源多能基因Oct4、Sox2、Nanog、Rex1表达量增高,细胞体内可分化为畸胎瘤。结论利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因可将HSF细胞编程为iPS细胞。; 沙杭艾民张清华蒋知新高毅卢海; 关键词：诱导性多潜能干细胞

脐带间充质细胞来源诱导性多潜能干细胞的建立和鉴定被引量：1: 2012年; 目的建立和鉴定脐带间充质细胞（UMC）来源的诱导性多潜能干细胞（iPS）。方法以逆转录病毒作为Sox2、KIf4、Oct4、c—Myc基因转移载体，将UMC细胞编程为iPS细胞。应用RT-PCR检测细胞基因表达量，鉴定外源编程基因是否整合到iPS细胞核内，分析细胞核型，对细胞进行碱性磷酸酶染色和免疫荧光染色，体内分化畸胎瘤和体外分化拟胚体实验，对建立的iPS细胞进行鉴定。结果（1）iPS细胞形态学上类似于胚胎干细胞（ES）。（2）iPS与ES细胞内源多能基因（Nanog、Oct-4、Rexl、Sox-2）表达谱相类似，外源编程基因（Sox-2、KIf4、Oct-4、c—Myc）表达发生沉默。（3）外源编程基因已被插入到iPS细胞核内。（4）iPS细胞核型正常，碱性磷酸酶活性增高，表达Es细胞特异性膜蛋白（SSEA3、SSEA4），质蛋白（TRA-1-60、TRA-1—81），核蛋白（Nanog）。（5）iPS细胞在体内能分化为畸胎瘤，在体外能分化为拟胚体。结论iPS细胞类似于Es细胞具有多向分化潜能。; 艾民张清华蒋知新沙杭高毅卢海; 关键词：多能干细胞

逆转录病毒介导系统感染原代培养人皮肤成纤维细胞: 2012年; 目的利用包装生产逆转录病毒感染原代培养人皮肤成纤维细胞,为细胞重编程提供技术保证。方法利用组织块贴壁法体外原代培养人皮肤成纤维细胞。包装生产携带绿色荧光蛋白GFP基因的逆转录病毒上清液。收集逆转录病毒上清液感染原代培养人皮肤成纤维细胞,利用荧光显微镜观察逆转录病毒感染成纤维细胞。结果体外成功原代培养出人皮肤成纤维细胞。293T细胞包装生产携带GFP基因的逆转录病毒上清液。包装生产后逆转录病毒成功地感染原代培养人皮肤成纤维细胞。结论逆转录病毒介导系统是人皮肤成纤维细胞重编程的有效基因转移载体。; 张清华艾民蒋知新沙杭高毅卢海; 关键词：逆转录病毒人皮肤成纤维细胞细胞重编程

人皮肤成纤维细胞来源诱导性多潜能干细胞的建立和鉴定被引量：2: 2011年; 目的建立和鉴定人皮肤成纤维细胞（HSF）来源的诱导性多潜能干细胞（iPS）。方法利用逆转录病毒将Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因导入原代HSF细胞，将其编程为iPS细胞。检测细胞内源、外源基因表达量，鉴定外源基因是否插入iPS细胞，分析细胞核型，细胞碱性磷酸酶染色和免疫荧光染色，体内分化畸胎瘤，体外分化拟胚体实验，对建立的iPS细胞进行鉴定。结果（1）iPS细胞形态类似于胚胎干细胞（ES）。（2）iPS细胞内源多能基因（Nanog、Oct4、Rexl、Sox2）表达量增高，外源编程基因（Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc）表达量降低。（3）琼脂糖凝胶电泳实验证实外源基因插入iPS细胞核内。（4）iPS细胞核型正常，碱性磷酸酶活性增高，表达ES细胞特异性蛋白。（5）iPS细胞在体内能分化为畸胎瘤，在体外能分化为拟胚体。结论新建立的iPS细胞类似于ES细胞具有多向分化潜能。; 蒋知新张清华艾民沙杭高毅卢海; 关键词：多能干细胞细胞培养技术

肩关节脱位及锁骨远端骨折临床外科治疗分析被引量：4: 2008年; 锁骨骨折和肩锁关节脱位的主要原因是交通事故，其次是坠落伤。肩部为人体的最外侧部位，车祸后最先着地的部位以肩关节居多，因此发生锁骨骨折比例高，占全身骨折的10％左右，同时，发生肩锁关节脱位的比例也高。为提高肩关节脱位及锁骨远端骨折的疗效，本文对其治疗方法进行了临床外科分析，现报告如下。; 罗旭孟镔卢海马腾飞; 关键词：肩关节脱位锁骨远端骨折外科治疗

复方半枝莲胶囊治疗乳腺增生50例疗效观察被引量：1: 2018年; 目的:观察复方半枝莲胶囊治疗乳腺增生的疗效及安全性。方法:将我院收治的100例女性单纯性乳腺增生患者随机分为观察组与对照组各50例,对照组给予心理安慰治疗,观察组在心理安慰治疗的同时,给予复方半枝莲胶囊治疗,疗程为1月,观察治疗前后乳房肿块硬度、大小,检测治疗前后血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)水平,评价临床疗效、记录不良反应。结果:治疗后两组分别与治疗前进行组内比较,其肿块的硬度、大小评分均降低,差异均具有统计学意义(P<0.05),且观察组降低明显优于对照组(P<0.05);治疗后与组内治疗前比较,血清E2均降低而LH、P均升高(P<0.05),两组治疗后比较,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组总有效率为96.0%(48/50),显著高于对照组的68.0%(34/50)(P<0.05);观察组不良反应率为10%(5/50),显著低于对照组的36%(18/50)。结论:复方半枝莲胶囊治疗乳腺增生疗效显著,不良反应率低。; 卢海江金群; 关键词：乳腺增生

利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因将脐带基质间充质细胞编程为多潜能干细胞: 2011年; 目的:探讨利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因将脐带基质间充质细胞(UMC)编程为多潜能干细胞(iPS)的可能性。方法:原代分离培养UMC细胞,包装生产逆转录病毒感染UMC细胞,将感染后细胞接种到饲养层细胞培养,镜下观察细胞形态学变化。对编程后细胞进行碱性磷酸酶(AP)染色、检测细胞基因表达量和体内分化畸胎瘤实验。结果:获得原代UMC细胞,细胞被编程后形态类似于胚胎干细胞,细胞AP染色阳性,内源多能基因Oct4、Sox2、Nanog、Rex1表达量增高,外源编程基因Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc表达沉默,细胞体内分化为畸胎瘤。结论:利用Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因能将UMC细胞编程为iPS细胞。; 艾民张清华蒋知新沙杭高毅卢海; 关键词：多潜能干细胞胚胎干细胞

腔镜辅助下经锁骨下单切口行双侧甲状腺手术体会(附18例报告)被引量：1: 2014年; 目的探讨腔镜辅助下经锁骨下单切口行双侧甲状腺结节手术切除的可行性和治疗效果。方法 18例双侧甲状腺良性结节,取结节较大侧锁骨下切口入路,切口长约3~4cm,行腔镜辅助下甲状腺部分或全部切除。结果所有患者均手术顺利,手术时间在60~90min之间,出血量20~50mL,无手术并发症,术后3~4d出院,切口一期愈合。随访1~24个月,无肿瘤复发,无颈部麻木、疼痛、吞咽不适。结论严格掌握指征,腔镜辅助下经锁骨下单切口行双侧甲状腺结节手术切除是安全可行的,术后并发症少,颈部外形美观。; 雷睿文黄湛欧林扬杨传胜卢海张凯陈卓荣; 关键词：甲状腺结节手术

PRIM1干扰慢病毒载体构建: 2018年; 目的构建PRIM1基因的干扰慢病毒载体,供后续深入研究PRIM1基因在肿瘤形成中的机制。方法以PRIM1基因为模板,按照RNA序列设计原则,完成RNA干扰靶点设计后,构建RPIM1基因RNA干扰慢病毒成含干扰序列的单链DNA oligo,退火配对产生双链DNA;随后通过其两端酶切位点直接连入酶切后的慢病毒载体;将连接产物转入制备好的大肠杆菌感受态细胞,PCR鉴定阳性重组子,送测序验证,对测序结果比对正确的克隆进行质粒抽提。结果对RNA序列设计软件评估后选取的干扰靶点序列,经过退火配对得到具有带黏性末端的双链的DNA; Age I和EcoRI双酶切使GV115载体线性化;双链DNA oligo与线性化的载体连接的产物经PCR扩增后的序列与目标序列完全一致,获得测序结果正确的阳性克隆质粒。结论以PRIM1基因为模板,按照载体设计构建常规方法成功构建PRIM1干扰慢病毒载体。; 卢海江金群孟镔; 关键词：慢病毒肿瘤

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卢海

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