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卢洋: 作品数：12 被引量：11H指数：2; 供职机构：第二军医大学国际合作肿瘤研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市现代生物与新药产业发展基金国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

lacⅠ 靶基因突变子的一种正向选择系统的建立被引量：1: 1999年; 目的：建立一种能正向选择ｌａｃⅠ靶基因突变子的选择系统。方法：比较了分别携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒和ｌａｃⅠ＋／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌在ＬＢ完全培养基、以葡萄糖为碳源的Ｍ９基本培养基和以乳糖为碳源的Ｍ９／Ｌ基本培养基内的生长情况。结果：组成型ＤＨ１０Ｂ菌在Ｍ９／Ｌ固体培养基中只需培养２３ｈ便可观察到生长，而诱导型ＤＨ１０Ｂ菌则需培养８８ｈ才可观察到生长，但在ＬＢ和Ｍ９培养基内两者的生长速度却相同；当将少量的组成型ＤＨ１０Ｂ菌与大量的诱导型ＤＨ１０Ｂ菌混合接种于Ｍ９／Ｌ固体培养基上培养时，Ｍ９／Ｌ固体培养基能从约２．７×１０６的ｌａｃⅠ＋型ＤＨ１０Ｂ菌中将少量的ｌａｃⅠ－型ＤＨ１０Ｂ菌筛选出来。结论：本研究建立了一种在特定时间内只选择生长携带有ｌａｃⅠ－／ｌａｃＺα型质粒的ＤＨ１０Ｂ菌落。; 黎怀星卢洋姚真真傅继梁

含稳定整合pMCLacI/Neo质粒的NIH3T3细胞体外突变研究模型的建立: 2000年; 目的　建立一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的突变机理的实验模型。方法　以脂质体转染法将线性化的 p MCL ac I/Neo质粒导入 NIH3T3细胞 ,用 G418筛选 ,选择一个药物抗性细胞克隆进行扩增 ,用基因组 Southern杂交 ,RT- PCR及 RT- PCR Southern杂交进行分子鉴定。结果　 (1)在此细胞克隆的基因组中整合有 p MCL ac I/Neo质粒 ;(2 )该质粒上的两个 lac I靶基因中 ,有一个在 NIH3T3细胞内处于转录表达状态 ;(3)可以通过酶切环化的方法从阳性细胞克隆的基因组 DNA中回收出结构完整、功能正常的 p MCL ac I/Neo质粒。结论　建立了在基因组中整合有 p MCL ac I/Neo质粒的NIH3T3细胞系 ;两个 lac I靶基因可分别模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态 ;可以将该细胞系用作研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机理的实验模型。; 卢洋黎怀星傅继梁; 关键词：基因突变 NIH3T3细胞质粒

含稳定整合pMCLacI/Neo质粒的NIH3T3细胞的构建和基因突变研究的新策略: 1999年; 卢洋黎怀星傅继梁; 关键词：NIH3T3细胞哺乳动物细胞沉默基因表达基因医学遗传学突变研究

基于pMTR1质粒的转基因小鼠突变研究模型的建立被引量：4: 2000年; 目的 :建立在基因组中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ,为体内基因突变研究提供有效的动物模型。方法 :利用分子克隆技术构建 p MTR1质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 5 72只 C5 7BL / 6小鼠受精卵 ,再将它们分别移入 45只受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 44只 ,存活 35只 ,采用 PCR,PCR- Southern和基因组 Southern杂交三级筛选法鉴定子代小鼠。以 4只经基因组 Southern杂交证实在基因组 DNA中整合有多拷贝结构完整的 p MTR1质粒的小鼠作Founder小鼠 ,进行转基因小鼠的建系工作。对每个 Founder小鼠已有的 F1代及 F2代转基因小鼠的基因组 DNA进行p MTR1质粒回收实验。结果 :从转基因小鼠基因组中可以回收出结构、功能完整的 p MTR1质粒。结论 :(1)建立了在基因组 DNA中整合有 p MTR1质粒的 C5 7BL / 6转基因小鼠家系 ;(2 ); 卢洋黎怀星李建秀傅继梁; 关键词：转基因小鼠基因突变

人CTLA4单克隆抗体的制备和鉴定被引量：2: 2002年; 目的 :制备人的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 4 (CTLA4 )的单克隆抗体。　方法 :利用蛋白纯化技术获得人CTLA4Ig蛋白免疫Balb/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞NS1融合 ,用ELISA法筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并用Western印迹和流式细胞检测仪鉴定所制备的单克隆抗体。　结果 :获得一个稳定的分泌抗人CTLA4的杂交瘤细胞株。该细胞克隆培养上清中所含的单抗能和经过PHA刺激后的人T细胞结合 ,但不能和经过PHA刺激后的小鼠T细胞结合。　结论 :利用重组人CTLA4Ig制备获得高特异性的抗人CTLA4单克隆抗体。; 卢洋钱卫珠王皓吴孟超郭亚军; 关键词：CTLA4 单克隆抗体 T细胞免疫

慢性吗啡处理对大鼠不同脑区前强啡肽原mRNA表达水平的下调作用被引量：1: 2002年; 目的·· :观察慢性腹腔注射(ip)吗啡对大鼠下丘脑、海马、纹状体中前强啡肽原mRNA(PPDmRNA)表达的影响。方法·· :20只SD大鼠随机分为吗啡依赖组和对照组;依赖组大鼠ip 吗啡12d,建立吗啡依赖模型 ,对照组注射生理盐水。于d13断头处死大鼠 ,取出下丘脑、海马、纹状体组织,以NorthernBlot印迹杂交检测其中PPDmRNA的表达水平。结果·· :依赖组大鼠下丘脑、海马、纹状体中PPDmRNA的表达水平分别下降至51.5 %±s4.7 %、81.3 %±s4.5 %、62.3%±s4.5 % ,明显低于生理盐水对照组 (P<0.05)。结论·· :吗啡依赖大鼠下丘脑、海马、纹状体中PPDmRNA的表达水平较生理盐水对照组有显著下降。; 傅强王新华卢洋石学银袁红兵; 关键词：吗啡阿片依赖

pM CLacⅠ/Neo质粒的构建和基因突变研究的新策略被引量：2: 1999年; 目的：构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体。方法和结果：设计并构建一种具两个ｌａｃⅠ突变靶基因的突变研究载体：ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒。在该质粒中，一个ｌａｃⅠ靶基因受ＣＭＶ启动子的驱动而使其在人和哺乳动物细胞内能表达，而另一个ｌａｃⅠ靶基因则不能表达。将所获得的ｐＭＣＬａｃⅠ／Ｎｅｏ质粒经酶切鉴定后，再进行如下功能鉴定：一是分析两个ｌａｃⅠ靶基因在大肠杆菌细胞内的功能状态，结果显示这两个ｌａｃⅠ基因在ＤＨ５α宿主菌内功能正常；二是将其导入ＮＩＨ３Ｔ３细胞内，分析两个靶基因是否能模拟哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。结果表明其中一个ｌａｃⅠ靶基因在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中处于转录表达状态。结论：本研究构建了一种新型的突变研究载体，位于该载体上的两个ｌａｃⅠ靶基因能模拟人和哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的功能状态。; 卢洋黎怀星傅继梁; 关键词：质粒沉默基因