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双基因敲除减毒单增李斯特菌(ΔactA/ΔinlB)的构建及其生物学初步鉴定被引量：3: 2016年; 减毒单增李斯特菌具有成为疫苗活载体的潜力,可同时引起MHCⅠ和MHCⅡ类抗原递呈系统,具有强烈激发CD8+和CD4+细胞免疫的能力。构建毒力基因缺失菌株进而评估其生物活性对于其作为疫苗活载体的开发尤为重要。本文采用同源重组技术构建单缺失菌株Lm-△act A和双缺失菌株Lm-△act A△/inl B,从生长状态、毒力基因表达和对Hep G2细胞侵袭能力方面探讨减毒菌株生物学特性。生长活性测定显示两种减毒菌株和野生型Lm(EGD-e)三者生长状况无差异;实时定量PCR结果显示act A基因缺失后,inl A基因表达水平上升两倍;act A和inl B基因双缺失后,plc B和hly基因的表达水平都有较大幅度的上升;侵袭Hep G2细胞结果显示act A基因缺失后侵袭能力增强、act A和inl B基因共同缺失后侵袭能力减弱。因此,减毒菌株的构建及其生物特性研究不仅对食源性致病菌Lm致病机理具有重要意义,也为构建预防人类和动物疫病的疫苗载体奠定了基础。; 丁承超曾海娟钟菲菲陈国薇董庆利谢曼曼吴嫚刘武康刘箐; 关键词：疫苗载体 ACTA 生物特性细胞侵袭

金黄色葡萄球菌酶联免疫检测试剂盒: 本发明公开了一种用于检测金黄色葡萄球菌的酶联免疫试剂盒。所述的试剂盒含有两株能特异性地结合于金黄色葡萄球菌的单克隆抗体，一株为专门作为捕捉抗体的单克隆抗体5D6D9G3B4，另一株是作为检测抗体的单克隆抗体5D2G2D9...; 刘箐郭慧琴; 文献传递

一种出血性大肠杆菌O157:H7酶联免疫检测试剂盒: 本实用新型涉及一种出血性大肠杆菌O157:H7酶联免疫检测试剂盒，它包括盒体，所述盒体内设有自封袋和衬垫，所述自封袋内设有包被了抗出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体的酶标反应板，所述衬垫上设有数个容器孔，所述容器孔内...; 刘箐郭慧琴邱实; 文献传递

检测出血性大肠杆菌O157:H7的方法及其单抗: 本发明属于微生物检测领域。具体而言，本发明涉及一种检测出血性大肠杆菌O157:H7的方法、用于该方法的两株由同一次单克隆抗体制备过程产生的抗出血性大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体，该单克隆抗体可特异性地与出血性大肠杆菌...; 刘箐李浩林; 文献传递

小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展被引量：4: 2021年; 小鼠杂交瘤单克隆抗体来源稳定、后期易制备、产量高,是免疫学中使用最为普遍的抗体。传统的耗时费力的杂交瘤制备技术无法满足日益增长的市场需求。文中从抗原设计筛选、B细胞富集与筛选、骨髓瘤细胞的改造、融合技术的改进、阳性杂交瘤细胞筛选及单克隆抗体性能快速测定中所涉及的快速制备技术方面进行阐述,以期为系统化的小鼠杂交瘤单克隆抗体的快速制备方法提供参考。; 方水琴刘程马俊飞闫帅帅许东坡刘箐; 关键词：单克隆抗体抗原特异性

基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测被引量：2: 2014年; 目的:探索建立一种新的出血性大肠杆菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)的快速定量检测技术。方法:以硝酸纤维素膜为基片,用生物芯片点样仪制作抗体宏阵列,采用'双抗夹心'原理,对出血性大肠杆菌O157∶H7进行定量检测研究。结果:本方法对出血性大肠杆菌O157∶H7的检出限为3.4×105 CFU/mL,在105~107CFU/mL细菌浓度范围内,宏阵列的灰度值与细菌浓度之间有较好的线性关系。该方法可在2.5 h内同步检测多个样品中出血性大肠杆菌O157∶H7的浓度。结论:通过用标准菌株、模拟带菌等研究显示,用宏阵列技术快速定量检测出血性大肠杆菌O157∶H7,结果肉眼可见,稳定准确,同时操作简便、成本低廉、无需大型设备,制作好的抗体宏阵列可用于快速评估食品中出血性大肠杆菌O157∶H7的污染状况,尤其适合于基层实验室进行快速高通量样品筛查。; 李浩林刘箐刘芳董庆利邱实杨玉萍郭慧琴韩舜愈; 关键词：可视化

单增李斯特菌nox基因的克隆、表达以及功能被引量：2: 2017年; 以Gen Bank中报道的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)野生型菌株EGDe的nox基因(Gen Bank ID:986631)为研究对象,探讨在高等动植物中普遍存在的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶在Lm中是否也可以介导产生活性氧(reactive oxygen species,ROS)。首先通过诱导nox基因在BL21中表达产生Nox蛋白,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot鉴定该蛋白质分子质量;然后构建过表达菌株EGDe-nox,测定ROS产生情况,并使用实时荧光定量-聚合酶链式反应检测nox基因的过表达对Lm毒力基因表达的影响。结果表明,经鉴定Nox蛋白分子质量约为33 k D,过表达菌株EGDe-nox与对照组EGDe的ROS产生量相比并无多大变化,nox基因的过表达会导致与侵袭相关的基因act A、inlA和inlB以及毒力基因prfA的表达上调。由此推测,该Nox蛋白不能独立主导ROS的产量,但其过表达却可以增强毒力基因表达上调。本研究为继续探讨细菌中Nox的作用提供一定的参考依据。; 吴嫚李森陈国薇罗勤刘武康丁承超董庆利刘箐; 关键词：单增李斯特菌活性氧

单核细胞增生性李斯特菌酶联免疫检测试剂盒: 本发明公开了一种用于检测单核细胞增生性李斯特菌的酶联免疫试剂盒。所述的试剂盒含有两株能特异性地结合于单核细胞增生性李斯特菌的单克隆抗体，一株为专门作为捕捉抗体的单克隆抗体1B4E7A6C9，另一株是作为检测抗体的单克隆抗...; 刘箐郭慧琴吴淑燕; 文献传递

果斑病菌免疫胶体金检测试纸条及其单抗和杂交瘤细胞株: 本发明涉及一种瓜类细菌性果斑病菌免疫胶体金快速检测试纸条，包括样品垫、紧密连接于所述样品垫的金标垫、金标垫上与金标垫紧密连接的纤维素膜和紧密连接于纤维素膜另一端的吸水垫，纤维素膜上远离金标垫的一端设置质控线，在质控线和金...; 曾海娟刘箐; 文献传递

不同材质砧板对卤猪舌中单增李斯特菌到黄瓜转移率的影响被引量：3: 2016年; 为探究不同材质砧板对卤猪舌中单增李斯特菌到黄瓜转移率的影响,选定木质、塑料和不锈钢为材质研究对象,根据消费者生活习惯设定砧板放置时间0、6和18 h,按照文献调研结果设定4种常见的场景,模拟家庭厨房食品制备过程,测定单增李斯特菌在卤猪舌、砧板和黄瓜之间的污染水平。同时,6和18 h后切黄瓜的试验中,通过结晶紫染色与显微镜观测,分析不同材质砧板上单增李斯特菌的生物菌膜形成情况。结果表明:4种场景下,砧板到黄瓜的转移率变化趋势相似,即同种材质砧板场景1、2、3和4呈现依次递减的趋势;不同材质砧板同种场景下,木质砧板到黄瓜的转移率较高,塑料和不锈钢砧板的转移率近似。此外,6和18 h单增李斯特菌膜并未形成,即短时间内散状的菌落个体无法繁殖成环状的菌膜结构。; 宋筱瑜陆冉冉汪雯董庆利刘箐; 关键词：单增李斯特菌砧板交叉污染转移率

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刘箐