刘犇
- 作品数：10 被引量：41H指数：4
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牦牛胎盘滋养层细胞的分离培养被引量：3
- 2011年
- 采用联合消化液对妊娠8～10周龄的胎儿胎盘组织进行了消化,获得单细胞悬液,然后将滋养层细胞分离纯化,探索其培养的最适FBS浓度及最适pH,并观察其大体形态、胞核的特点、细胞角蛋白7(Cytokeratin,CK7)和波形蛋白(Vimentin,Vim)表达等。结果显示,牦牛滋养层细胞在pH6.8～7.0、20%FBS的DMEM/F12培养基条件下适宜传代培养;该细胞为上皮样细胞形态,呈片状铺展生长;细胞角蛋白染色阳性,波形蛋白染色阴性;阳性细胞率达90%,台盼蓝排斥试验显示活细胞率超过95%。
- 赵志文樊江峰刘犇余四九
- 关键词：牦牛滋养层细胞体外培养
- 牦牛体外胚胎生产条件优化与凋亡分析
- 牦牛体外胚胎生产技术平台的建立，对牦牛配子和胚胎基础研究以及辅助繁殖技术在牦牛上的商业应用都非常关键。为了提高牦牛体外胚胎生产效率，阐明FSH和FBS对牦牛卵丘细胞凋亡及卵母细胞体外发育的影响，并探讨牦牛胚胎体外发育过程...
- 刘犇
- 关键词：牦牛体外受精卵丘细胞
- 牦牛FSHR基因部分序列多态性及其与繁殖性状的关联分析被引量：8
- 2012年
- 本研究旨在分析牦牛FSHR基因5’端及第一外显子的多态性,并分析其与繁殖性状的关联性,为从遗传角度上解决牦牛产犊间隔过长的问题提供参考。以4个种群的667头牦牛为研究对象,应用PCR-SSCP方法检测FSHR基因的多态性,并用最小二乘法分析雌性个体该基因多态性与产犊间隔的关系。结果表明,三个扩增片段共获得牦牛FSHR基因940 bp的序列,由5’端和第一外显子组成,与其它哺乳动物的对应序列有较高的同源性。共发现9处突变位点,其中一处位于开放阅读框内,但属于同义突变。不同种群间的产犊间隔差异显著(P<0.05);FSHR基因不同基因型对产犊间隔影响差异不显著(P>0.05),但AB、LL、LM、LN及RT基因型均有缩短牦牛产犊间隔的趋势。
- 王明亮高旭东陈鹏郝明超刘犇余四九
- 关键词：牦牛FSHR基因多态性繁殖性状
- 妊娠期牦牛子宫肉阜上皮细胞的培养被引量：3
- 2011年
- 为建立一种稳定、简便地获得较高纯度的牦牛子宫肉阜上皮细胞的方法,分别采用组织块种植法和联合消化法对妊娠8～10周龄牦牛的子宫肉阜上皮细胞进行原代培养及分离纯化,测试其培养的最适FBS浓度及pH值,并观察其大体形态等。结果显示,胎盘组织样品在37℃下,采用胰蛋白酶和胶原酶1∶1联合消化排除法分离子宫肉阜上皮细胞的效果好。pH6.8～7.0、含150mL/L FBS的DMEM/F12培养基适宜牦牛子宫肉阜上皮细胞的原代培养,pH6.8～7.0、含100mL/L FBS的DMEM/F12培养基较适宜传代培养。传代5次后经透视显微镜观察发现,细胞为上皮样形态,呈片状铺石路样生长。表明,用联合消化排除法可简单、有效地获得较高纯度的牦牛子宫肉阜上皮细胞。
- 郑凯刘犇张涛杰樊江峰余四九
- 关键词：牦牛体外培养
- 四个牦牛品种MC1R基因部分序列的多态性研究被引量：1
- 2012年
- 为探索4个牦牛品种MC1R基因多态性的相关信息,选取甘南牦牛、天祝白牦牛、青海高原牦牛、大通牦牛4个品种共408头个体为研究对象,采用PCR-SSCP方法分析牦牛MC1R基因部分序列的基因多态性。结果表明,与GenBank中牛MCIR基因序列(登录号:AF445641.1)比对发现,该扩增片段在3 891 bp处发生C→G的突变,在3 912 bp处发生T→C的突变,共发现CC、DD、EE、CD、CE和DE 6种基因型。4个牦牛品种中CD、CE和DE 3种基因型在青海高原牦牛和大通牦牛中占主要优势,这3种基因型频率总和在青海高原牦牛和大通牦牛群体中分别是0.778和0.781。DD和CD两基因型是甘南牦牛群里中的优势基因型,其基因型频率分别是0.351和0.328。天祝白牦牛中优势基因型是DD,其基因型频率是0.500。D等位基因是4个地方品种牦牛中的优势等位基因。4个地方品种在该基因座上都处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。青海高原牦牛和大通牦牛两个群体处于高度多态(PIC>0.5),甘南牦牛和天祝白牦牛处于中度多态(0.25
- 高旭东余四九王明亮陈鹏郝明超刘犇王继卿
- 关键词：牦牛MC1R基因PCR-SSCP基因多态性
- 妊娠期牦牛胎盘的形态学研究
- 为了阐明牦牛胎盘的形态学特征及其相关功能,妊娠期牦牛胎盘突及其相关组织细胞的形态学变化规律以及妊娠期牦牛肉阜间区子宫腺的形态学变化规律,本研究进行了以下实验并取得了相应的结果: (1)采集妊娠151～180天的牦牛胎盘组...
- 刘犇
- 关键词：牦牛妊娠期胎盘子宫腺显微结构形态计量学
- 文献传递
- 牦牛乳腺上皮细胞系的建立与生物学特性被引量：4
- 2013年
- 本研究旨在建立牦牛乳腺上皮细胞体外培养体系。采用胶原酶消化法成功地建立了牦牛乳腺上皮细胞系(YMEC),通过免疫细胞化学、超微结构观察和RT-PCR法对YMEC细胞进行了鉴定,并研究了其形态、活力、生长曲线以及核型等生物学特性。结果表明,YMEC细胞染色体2n=60,群体倍增时间为45～48h,持续培养25代后出现细胞分化;细胞呈典型的"铺路石样"形态,其表面有丰富的微绒毛,细胞质内含丰富的线粒体和粗面内质网。污染检测结果为阴性。在激素诱导培养时,检测到了β-酪蛋白mRNA的表达。表明本研究成功建立了保留泌乳功能的牦牛乳腺上皮细胞系,为研究牦牛乳腺上皮细胞的功能提供了理想的工具。
- 郝明超刘犇樊江峰陈鹏张华王明亮高旭东余四九
- 关键词：牦牛乳腺上皮细胞细胞系生物学特性
- 黄牛FSHR基因的生物信息学分析被引量：18
- 2012年
- 利用生物基因组学数据库,对黄牛FSHR基因进行生物信息学分析,以预测FSHR基因编码产物的理化性质、结构与功能,同时构建FSHR同源系统进化树.结果表明:FSHR基因编码产物为疏水性跨膜蛋白,具有明显的信号肽,其切割位点位于17～18位的氨基酸之间,二级结构主要以α-螺旋与无规则卷曲为主,并主要在质膜中发挥生物学作用,跨膜区域分为跨膜域、胞外域和胞内域3个部分.序列分析表明,FSHR编码产物可能具有离子通道、运载体、受体、信号转导和阳离子通道等功能,在离子跨膜与信号传递过程中发挥重要作用,并对黄牛的激素调节有影响.FSHR基因编码产物系统进化树表明,黄牛FSHR与水牛、成都麻羊、绵羊等物种FSHR遗传距离较近,具有高度同源性.
- 王明亮陈鹏郝明超高旭东刘犇余四九
- 关键词：FSHR基因黄牛生物信息学繁殖性状
- 乳腺上皮细胞体外培养的研究进展被引量：6
- 2011年
- 乳腺上皮细胞体外培养的成功对研究乳腺的生长发育、泌乳机制、乳腺肿瘤和癌变的发生及乳腺生物反应器的应用等方面的研究都有重要的意义。具体来说,体外培养建立的乳腺上皮细胞系可为克隆和转基因动物生产提供良好的核供体;分泌功能的乳腺上皮细胞系的建立为乳腺发育学、乳腺病理学、泌乳生物学研究提供细胞模型。本文综述了国内外在此领域的研究进展,对乳腺上皮细胞的体外培养技术进行了总结为相关领域的研究提供参考。
- 郝明超刘犇樊江峰王明亮陈鹏高旭东余四九
- 关键词：乳腺上皮细胞细胞培养细胞系
- 妊娠期牦牛肉阜间区子宫腺的形态计量学分析
- 2010年
- 运用形态计量学方法对31头牦牛肉阜间区子宫腺的相关组织学数据进行了测定,并进行统计分析。研究发现,除了妊娠151~180 d,牦牛肉阜间区子宫腺上皮高度随着妊娠时间的增长极显著降低（P〈0.01）;妊娠期子宫腺管周长和面积非常明显增大（P〈0.01）;不同妊娠阶段之间体积密度差异极显著（P〈0.01）,先增加后下降,而表面密度无显著差异（P〉0.05）;除了妊娠151~180 d,扭曲腺管和管状腺管的比例随着妊娠时间的增长分别非常显著地增大或减小（P〈0.01）;分泌腺管的比例在妊娠期间有明显变化（P〈0.05）,牦牛肉阜间区还存在嵌套腺管。结果显示,妊娠期牦牛肉阜间区子宫腺形态结构有明显的变化,子宫腺变的更大、更长,形状更加扭曲。
- 刘犇崔燕胡俊伟余四九
- 关键词：牦牛妊娠期子宫腺形态计量学体视学
