况春燕
- 作品数:60 被引量:62H指数:5
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- 小鼠Slfn3重组腺病毒载体的构建及其在EPCs中转染效率的测定
- 2024年
- 目的构建携带小鼠Schlafen3(Slfn3)基因的重组过表达质粒,并观察其在内皮祖细胞(EPCs)中的转染效率。方法从GenBank基因数据库获取小鼠Slfn3基因序列,利用VectorNTI软件对其进行引物设计,通过PCR扩增获得目的基因,将所得到的目的基因与穿梭载体pcADV-EF1-mNeonGreen-CMV-MCS-3xFLAG相连接,获得重组腺病毒载体pcADV-EF1-mNeonGreen-CMV-Slfn3-3xFLAG;筛选阳性克隆抽提质粒,通过限制性内切酶EcoRI和BamHI双酶切鉴定,并通过DNA测序验证;采用Admax系统将目的穿梭质粒和腺病毒骨架质粒一同转染HEK293细胞获得重组腺病毒(Ad-pcADV-EF1-mNeonGreen-CMV-Slfn3-3xFLAG),对其进行病毒滴度测定,Western blot验证Slfn3蛋白的表达;体外培养小鼠脾源EPCs 5~7 d,细胞密度达70%后,用Ad-pcADV-EF1-mNeonGreen-CMV-Slfn3-3xFLAG进行转染48 h后,采用荧光显微镜观察并统计绿色荧光细胞数量,计算Ad-pcADV-EF1-mNeonGreen-CMV-Slfn3-3xFLAG转染的效率。结果DNA测序验证Ad-pcADV-EF1-mNeonGreen-CMV-Slfn3-3xFLAG构建成功,病毒滴度为3.16×1010(ifu/mL);腺病毒包装之后的重组腺病毒能够转染HEK293细胞,并在细胞中表达Slfn3-EGFP-3xFLAG融合蛋白,且含有Flag标签的蛋白,大小为57 kDa;重组腺病毒在EPCs中的转染效率为(71.43±2.58)%。结论成功地构建了小鼠Slfn3的过表达重组腺病毒载体,且在EPCs转染效率较高。
- 辛晨况春燕刘兴德
- 关键词:内皮祖细胞重组腺病毒质粒基因过表达
- 基质细胞衍生因子-1/CXCR4对体外培养小鼠心肌干细胞迁移的影响
- 目的基质细胞衍生因子-1(SDF-1)能通过SDF-1/CXCR4诱导多种干祖细胞迁移,我们前期实验表明,心肌干细胞(CSCs)膜表面表达CXCR4受体。本课题旨在探讨SDF-1/CXCR4轴是否能诱导体外培养小鼠心肌干...
- 王逵赵晓辉钱德慧况春燕邓梦杨黄岚
- 文献传递
- RNA干扰沉默STIM1抑制内皮祖细胞的增殖和迁移
- 目的:研究STIM1(基质交感分子1)对内皮祖细胞增殖迁移的影响,为进一步促进血管损伤后内皮再生、血管良性修复提供新的思路和策略。方法:培养大鼠骨髓源内皮祖细胞,观察基因沉默和过表达STIM1对内皮祖细胞增殖迁移的影响,...
- 况春燕黄岚
- 文献传递
- SDF-1α/CXCR4对小鼠心肌干细胞迁移及归巢的影响
- 目的:基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)能通过SDF-1α/CXCR4/PI3K路径诱导多种干祖细胞迁移。本课题旨在探讨SDF-1α/CXCR4轴是否能诱导小鼠心肌干细胞迁移、归巢,及其对心肌修复的影响。结论:SDF...
- 王逵赵晓辉钱德慧况春燕邓梦杨黄岚
- 关键词:心肌修复
- 关节置换术后并发心肌梗死死亡三例报道并文献复习被引量:2
- 2015年
- 老年退行性骨关节病及骨关节损伤严重影响患肢功能,最有效的治疗方法为人工关节置换术。虽然其技术成熟,但仍有少见的严重术后并发症发生。本文报道1例双膝关节退行性骨关节病、1例股骨粗隆间粉碎性骨折、1例股骨转子间陈旧性骨折经相应关节置换术后发生急性心肌梗死死亡的患者,并对已有文献进行复习。
- 况春燕田晓滨
- 关键词:骨关节炎人工关节置换术心肌梗死
- 用于心血管疾病防治的杜仲提取物高效提取装置及方法
- 本发明公开了一种用于心血管疾病防治的杜仲提取物高效提取装置及方法,所述装置主要包括壳体旋转清洗榨汁装置、一次超声萃取装置、过滤装置、溶剂回收装置、二次固相萃取装置、PLC控制器和电源,所述旋转清洗榨汁装置、一次超声萃取装...
- 庞军杨永耀龙向淑刘承铭杨龙蒋智况春燕田野
- 文献传递
- 瞬时受体电位1与心血管疾病关系研究进展被引量:2
- 2011年
- 近年来,以高血压、冠心病等为主要疾病谱的心血管疾病,发病率、病死率呈逐年上升趋势。研究发现,经典瞬时受体电位(TRPC)在心血管疾病的发生、发展中扮演了重要的角色。TRPC通道是钙库操控性通道(SOCs)的成员之一,位于胞膜,并介导Ca2+跨膜转运,影响细胞的增殖、迁移等基本生物学行为。
- 况春燕黄岚
- 关键词:瞬时受体电位通道心血管疾病细胞增殖内皮细胞
- 基质交感分子1对内皮祖细胞周期的影响
- 目的:探讨RNA干扰技术沉默基质交感分子1基因后对内皮祖细胞周期的影响。方法:培养大鼠骨髓源性内皮祖细胞,用构建好的大鼠基质交感分子1干扰腺病毒载体和人重组基质交感分子1腺病毒载体进行转染,逆转录PCR检测细胞基质交感分...
- 喻杨况春燕黄岚钱德慧王逵
- 关键词:内皮祖细胞免疫共沉淀
- 小鼠心肌干细胞体外分离培养及鉴定
- 目的探讨心肌干细胞(CSCs)体外分离、培养和纯化方法,以建立重复性好、稳定性高的CSCs培养的方法;共培养体系检测CSCs向心肌细胞分化潜能。方法采用酶消化后组织块贴壁法体外培养KM乳鼠CSCs,以免疫磁珠细胞分离系统...
- 王逵黄岚赵晓辉钱德慧况春燕邓梦杨
- 文献传递
- STIM1/TRPC1复合体对EPCs修复损伤血管能力的影响
- 1. 背景与目的 血管内皮损伤和损伤后的不良修复是冠心病、高血压、经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)后再狭窄等血管损伤性疾病发病的共同病理生理基础。如何...
- 况春燕
- 关键词:内皮祖细胞内膜增生再内皮化RNA干扰
- 文献传递