冯净净
- 作品数：13 被引量：51H指数：4
- 供职机构：复旦大学附属上海市第五人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市闵行区自然科学基金上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白细胞介素-33抗体治疗呼吸道合胞病毒诱导小鼠哮喘的效果观察被引量：2
- 2021年
- 为探讨白细胞介素(interleukin,IL)-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染导致哮喘急性加重过程中的作用,选取3周龄雌性BALB/c小鼠28只,随机分为5组,分别为正常对照组、单纯RSV感染组、哮喘组、RSV感染哮喘并对照抗体组、RSV感染哮喘并IL-33抗体治疗组。建立RSV感染的小鼠模型,给予IL-33抗体治疗,并分别取各组小鼠的肺组织行苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色;实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcriptional polymerase chain reaction,real-time RT PCR)检测肺组织中il-13,il-4,视黄酸受体相关孤儿受体(retinoic acid receptor-related orphan receptor,ror)-γt,叉头状转录因子3(forkhead box P3,foxp3),干扰素(interferon,ifn)γ以及il-33 mRNA表达量;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肺泡灌洗液中IL-13、IL-4、IL-33、IFNγ和IL-17的表达。结果显示RSV感染导致的哮喘急性加重组小鼠气道周围炎性细胞浸润最为明显,且IL-33和T辅助细胞2型(T helper 2,Th2)的主要效应因子IL-4的基因转录和蛋白表达水平明显升高。阻断IL-33后肺组织内炎性细胞浸润减轻,伴随着il-13,il-4,rorγt和foxp 3的基因转录水平的降低及肺泡灌洗液中IL-4、IL-13、IL-17蛋白表达的减少,但阻断IL-33对IFN-γ的表达无明显影响。结果提示IL-33在RSV感染诱导的哮喘急性发作过程中起致病作用,阻断IL-33可减轻肺部病理变化及炎性因子分泌,可为支气管哮喘急性加重的治疗提供新的靶点。
- 冯净净陈家君施天昀何燕超揭志军
- 关键词：呼吸道合胞病毒支气管哮喘辅助性T细胞
- 2014年至2019年上海市闵行区居民流行性感冒疫苗接种状况分析被引量：3
- 2021年
- 目的分析2014年至2019年上海市闵行区居民流行性感冒(以下简称流感)疫苗接种状况。方法收集2014年8月1日至2019年7月31日上海市闵行区疾病预防控制中心登记的居民的流感疫苗接种信息,比较不同年度、月份、年龄段,以及沪籍和非沪籍居民流感疫苗的接种情况。组间比较采用χ^(2)检验。结果上海市闵行区2014年至2019年各年度全区居民流感疫苗接种率分别为2.75%(62158/2261615)、2.66%(60545/2275813)、2.38%(52572/2207101)、2.48%(55535/2235800)、1.87%(42927/2298327),2018/2019年度较上一年度下降0.61%,较2014/2015年度下降0.88%。非沪籍居民各年度流感疫苗接种率分别为3.54%(43124/1216493)、3.41%(41222/1210555)、3.00%(33531/1116373)、2.94%(33061/1124384)、1.68%(19464/1161183),沪籍居民分别为1.82%(19034/1045122)、1.81%(19323/1065258)、1.75%(19041/1090728)、2.02%(22474/1111416)、2.06%(23463/1137144),2014年至2018年各年度非沪籍居民流感疫苗接种率均高于沪籍居民(χ^(2)=6249.093、5540.756、3754.047、1945.718,均P<0.05),2018/2019年度沪籍居民高于非沪籍居民(χ^(2)=469.713,P<0.05)。各年度6个月至17岁居民的流感疫苗接种比例最高,分别为95.2%(59167/62158)、95.1%(57582/60545)、93.7%(49277/52572)、91.1%(50602/55535)和80.3%(34476/42927),其中以6个月至5岁儿童为主,各年度分别为85.0%(52806/62158)、87.0%(52648/60545)、86.1%(45247/52572)、84.8%(47081/55535)和70.2%(30140/42927)。年龄为18~59岁和≥60岁居民流感疫苗接种比例均较低,但是在2018/2019年度均有明显增长。接种月份主要分布在每年10月份至次年2月份,其他月份接种人群较少,5、6、7月份没有接种。结论近5年上海市闵行区居民流感疫苗接种率较低,且2018/2019年度较上一年度有所下降。年龄分布以6个月至5岁儿童为主,其他年龄段居民接种人数较少,但是在2018/2019年度年龄≥60岁老年人的接种人数较以前有所升高。
- 张小华张莉萍陆佳胡小英冯净净施天昀揭志军
- 关键词：流感疫苗接种率
- IL-33在呼吸道合胞病毒(RSV)感染致哮喘急性发作中的作用被引量：15
- 2020年
- 目的研究IL-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染致哮喘急性发作中的作用。方法将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并致敏小鼠,再感染RSV致哮喘急性发作。麻醉后处死小鼠。ELISA法测小鼠血清总IgE水平、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺组织IL-33蛋白水平;瑞氏/吉姆萨染色后测BALF细胞总数及各细胞分类计数;取肺组织病理切片HE染色;real-time PCR测T辅助细胞2型(T helper 2,Th2)细胞因子、IL-33等mRNA表达。结果 OVA组与PBS组相比,血清IgE水平明显升高(P<0.05)。OVA/RSV组中BALF细胞总数较OVA组显著增加,主要表现为巨噬细胞和中性粒细胞的增加。病理切片HE染色可见OVA/RSV组小气道周围炎性细胞浸润更加明显。以上表明RSV感染OVA诱导哮喘急性发作的小鼠模型成功建立。real-time PCR显示:与OVA组相比,OVA/RSV组IL-13以及IL-33 mRNA表达显著增加(P<0.05),IL-5和ST2表达有所增加,但差异无统计学意义。ELISA结果显示:与OVA组相比,OVA/RSV组肺组织中IL-33浓度增高更加显著(P<0.05),BALF中IL-33浓度也有所增加,但差异无统计学意义。结论 IL-33可能通过启动Th2型免疫反应在RSV感染诱导哮喘急性发作小鼠模型中起重要作用。
- 陈家君冯净净施天昀陈鸿军揭志军
- 关键词：哮喘急性发作ST2
- Th17细胞在病毒感染性疾病中作用的研究进展被引量：3
- 2011年
- Th17细胞系是近年来发现的新的Th细胞系，通过分泌一些特征性的细胞因子，如白介素17发挥效应。最近的研究表明它参与多种人类免疫炎症反应性疾病，且发挥重要作用，而Th17细胞在病毒感染性疾病中的作用尚不清楚。现就Th17细胞在一些病毒感染性疾病中作用的研究进展进行总结。
- 冯净净揭志军郭雪君
- 关键词：TH17细胞白介素17病毒感染性疾病
- 早幼粒细胞白血病锌指在哮喘患者外周血中的表达及意义
- 2022年
- 目的检测早幼粒细胞白血病锌指结构(promyelocytic leukemia zinc fi nger,PLZF)在哮喘(asthma)患者外周血中的表达水平及临床意义。方法选取上海市第五人民医院2021年5月至2021年10月诊治的稳定期Asthma患者外周血标本为研究对象(n=40),以及健康体检者为对照组(Control组,n=40),采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子的含量,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测血浆中PLZF的mRNA表达。分离外周血的单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),并使用流式细胞术检测PBMC中PLZF+细胞的水平和分布。采用SPSS 26.0及Graphpad Prism 7.0软件进行独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ2检验、ROC曲线及Logistic回归等统计学分析。以P<0.05为差异有统计学意义。结果与Control组相比,在Asthma组中细胞因子干扰素-γ(interferonγ,IFN-γ)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-17表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.05),而IL-10两组相比差异无统计学意义。Asthma组PBMC中PLZF的mRNA表达明显增高(P<0.05),PLZF+细胞明显增加(3.40±2.52%,Control组:1.23±0.78%,P<0.05),其中以CD8+PLZF+及Vβ11+PLZF+T细胞为主,提示PLZF主要在CD8+、恒定自然杀伤T细胞(invariant natural killer T cell,iNKT)细胞亚群中表达增加。Logistic回归分析及ROC曲线结果显示,PBMC中PLZF+细胞增高显著增加了哮喘发生的风险(OR=5.76>1,AUC=0.87,P<0.05)。结论哮喘患者外周血中PLZF增加,可能在哮喘疾病发展中起到重要作用,结果尚需更大样本实验数据进一步证实。
- 任晓婷施天昀李娜何燕超钱凌冯净净梅周芳揭志军
- 关键词：哮喘PBMC外周血
- 抑制p38丝裂素活化蛋白激酶途径调控Th17和Treg失衡减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤被引量：5
- 2023年
- 目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)抑制剂是否通过调节Th17/Treg平衡减轻脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)。方法 将Balb/c小鼠随机分组为对照组、ALI组和干预组。对照组腹腔注射磷酸盐缓冲液,ALI组腹腔注射40 mg/kg体重的LPS,干预组腹腔注射不同药物浓度(0.5、1、2、5 mg/kg)的p38MAPK抑制剂SB203580药物。1 h后通过腹腔注射LPS造模,12 h后处死小鼠并取材。肺组织送苏木精–伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织病理变化,检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞分类计数和总蛋白水平。采用实时聚合酶链反应检测叉头框蛋白P3(forkhead box p3,Foxp3)和视黄酸受体相关孤儿受体γt(retinoic acid receptor-related orphan receptor-γt,RORγt)mRNA的表达量。采用酶联免疫吸附法检测肺组织匀浆中白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、IL-17、IL-23和转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)及血清中IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的蛋白含量。流式细胞计数法检测脾脏组织匀浆中Th17细胞和调节性T细胞(regulatory cells,Treg)亚群。结果 在LPS诱导建立的ALI小鼠模型中,LPS可引起肺组织内炎性细胞浸润,BALF中细胞总数及蛋白水平升高(P<0.05),中性粒细胞和单核细胞比例升高。SB203580干预后肺组织病理损伤程度减轻,相应的BALF中炎性细胞浸润减少。ALI组血清中IL-6和TNF-α蛋白浓度较对照组明显升高,SB203580干预后炎性细胞因子下降。与ALI组比较,干预组Th17细胞及Th17分化相关细胞因子IL-17和IL-23表达下降,转录因子RORγt分泌受抑制,而Treg及IL-10和Foxp3相关分化因子表达有所升高,且与SB203580呈浓度依赖性。SB203580干预后Th17/Treg比值较LPS组明显降低(P<0.05)。结论 p38MAPK抑制剂可通过调节Treg细胞和Th17细胞失衡状态减轻LPS导致的AL
- 冯净净邵川邵川施天昀都勇都勇施劲东
- 关键词：P38MAPK信号通路急性肺损伤TREG细胞
- 呼吸道合胞病毒对干扰素信号通路STAT蛋白核转移的影响
- 目的研究呼吸合胞病毒(RSV)感染小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)后,对Ⅰ型干扰素(IFN)和Ⅱ型IFN等诱导的JAK/STAT通路蛋白活化后核转移的影响。方法从BALB/c小鼠的长骨中分离骨髓细胞,经过培养和刺激后得到...
- 揭志军冯净净宋志刚张悦郭雪君
- 文献传递
- IL-33／ST2轴在呼吸道病毒感染免疫中的作用被引量：1
- 2016年
- IL-33是IL-1家族的新成员，它能通过结合IL-1受体家族中的孤儿受体ST2发挥其生物学效应。很多研究证实呼吸道病毒感染可刺激机体多种细胞显著表达及分泌IL-33，IL-33作用于靶细胞表面ST2受体，从而启动T辅助细胞（Thelper，Th）2型免疫反应，介导呼吸道病毒感染相关疾病。抗IL-33抗体或抗ST2抗体阻断IL-33／ST2轴及上述免疫反应，从而有可能为治疗呼吸道病毒感染相关疾病提供新靶点。
- 陈家君冯净净揭志军
- 关键词：呼吸道病毒感染
- 呼吸道合胞病毒感染小鼠Th17细胞亚群的变化被引量：9
- 2013年
- 目的观察辅助性T淋巴细胞17(Th17)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠肺部炎症中的变化,探讨其在RSV感染后宿主免疫机制中的作用。方法 30只3～5周龄雌性BALB/c小鼠随机分为实验组(18只)和对照组(12只)。实验组每只小鼠鼻腔滴入0.1 mL滴度为107.5TCID 50/mL的病毒液,对照组鼻腔滴入0.1 mL的2.5%灭活鸡血清的DMEM维持液。在处理后的第1、4、8 d分别处死小鼠,并留取肺脏和肺门淋巴结。用HE染色观察RSV感染后肺组织病理变化;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中RSV-F、IL-17A、IL-17F和IL-23p19 mRNA表达水平;流式细胞术检测小鼠肺门淋巴结中Th17细胞水平。结果在RSV感染后第4 d小鼠肺组织出现典型间质性肺炎表现,第8 d炎性细胞明显减少;肺组织中RSV病毒的相对表达量在第4 d为9.208±0.548,较第1 d显著增多(P<0.01),到第8 d则较第4 d显著减少(P<0.01);肺组织中IL-23p19和IL-17A等细胞因子的表达在RSV感染后也呈现增高的趋势,并在第4 d达到高峰,但IL-17F mRNA表达在RSV感染后不同时间点与对照组比较无显著变化(P>0.05);RSV感染后第4 d和第8 d小鼠肺门淋巴结Th17亚群比例分别为(0.370±0.043)%和(0.853±0.048)%,均明显高于相应的对照组(P<0.05),而且第8 d的Th17比例也显著高于第4 d(P<0.01)。结论在RSV感染小鼠导致的肺部炎症反应过程中,出现肺组织中IL-17A的表达增加和肺门淋巴结Th17细胞水平增高,说明Th17细胞可能参与宿主的抗病毒免疫过程。
- 冯净净胡芸文宋志刚揭志军郭雪君
- 关键词：TH17细胞呼吸道合胞病毒肺部炎症小鼠
- 呼吸道合胞病毒(RSV)对干扰素(IFN)信号通路STAT蛋白核转移的影响被引量：12
- 2012年
- 目的研究呼吸合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠骨髓树突状细胞(bone marrowderived dendritic cells,BMDCs)后,对Ⅰ型和Ⅱ型干扰素(interferon,IFN)诱导的JAK/STAT通路蛋白活化后核转移的影响。方法从BALB/c小鼠的长骨中分离骨髓细胞,经过培养和刺激后得到BMDCs。将BMDCs接种于带小室的玻片上,以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1的RSV感染细胞,并设紫外线灭活的RSV(UV-RSV)和培养液(media)刺激为对照。在培养24h后,分别用100IU/mL的IFN-β刺激30min或0.64pmol/L的IFN-γ刺激45min,然后进行免疫荧光染色。在荧光显微镜下计数STAT蛋白核转移阳性细胞的百分比,比较各组间的差异。结果在未感染的BMDCs中,STAT1和STAT2蛋白主要存在于细胞质中,当用IFN-β刺激BMDCs后可见到明显的STAT1和STAT2蛋白向细胞核转移,核转移阳性细胞百分比分别为89.0%±4.6%和83.7%±5.1%,与未处理组(NT组)相比有明显差异(P<0.01)。而RSV感染后,发现STAT1和STAT2蛋白核转移阳性细胞数较IFN-β刺激组明显减少(P<0.01),说明RSV感染可以抑制IFN-β诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移。而应用UV-RSV感染后与IFN-β刺激组相比,STAT1和STAT2蛋白核转移阳性细胞数却未见明显减少(P>0.05)。用IFN-γ刺激BMDCs后也可见到明显的STAT1蛋白向细胞核转移(阳性细胞为85.3%±6.4%);而RSV感染后与IFN-γ刺激组相比,STAT1核转移阳性细胞数(79.3%±4.9%)却未见明显减少(P>0.05)。结论 RSV感染BMDCs后,能特异性地抑制Ⅰ型IFN诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移,而对II型IFN诱导的STAT1蛋白的核转移却没有影响。
- 揭志军冯净净宋志刚张悦郭雪君
- 关键词：呼吸道合胞病毒骨髓树突状细胞干扰素信号通路
