余腾斐
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种新型链霉菌分泌表达质粒及应用
- 本发明涉及一种新的链霉菌分泌表达质粒及其应用。具体地，本发明提供的质粒以球孢链霉菌C-1027中天然存在的pSGL1质粒最小复制子为骨架，克隆有大肠杆菌复制起始区ori、链霉菌接合转移的必需区oriT、氨苄青霉素抗性基因...
- 洪斌朱元军王丽非杜郁余腾斐王松梅
- 文献传递
- 组氨酸标签人β干扰素在E.coli BL21(DE3)中的表达、纯化和活性测定被引量：3
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中高效表达组氨酸标签与人β干扰素融合蛋白,并进行蛋白纯化和生物活性测定。方法提取人Bel-7402细胞总DNA为模板,经PCR获得人β干扰素编码基因片段。将此基因插入表达载体pET-16b,重组克隆,经酶切与测序确认后转化至大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达和条件优化。表达产物经Western blotting分析,用Ni sepharose亲和层析纯化,纯化产物进行干扰素生物学活性测定。结果经表达条件优化后,SDS-PAGE显示重组菌株表达与组氨酸标签人β干扰素分子量大小一致的条带,进一步的Western blotting分析中发现表达的蛋白能与人β干扰素抗体及组氨酸标签抗体产生结合反应,亲和层析纯化分离得到纯度92%的组氨酸标签人β干扰素,干扰素生物学活性测定表明,获得的组氨酸标签人β干扰素比活性为4.2×107U/mg。结论组氨酸标签人β干扰素编码基因在大肠杆菌中成功表达。建立了该蛋白的简便亲和纯化方法,表达产物具有人β干扰素生物学活性,为进一步以此系统表达及纯化其他具有生物学活性的科研用标签化细胞因子奠定了基础。
- 王丽非朱元军王松梅杜郁余腾斐王丽洪斌
- 关键词：干扰素Β重组融合蛋白质类
- 一种利用基因阻断菌株制备靶向性力达霉素生产菌株的方法及其用途
- 本发明涉及一种利用基因阻断菌株制备靶向性力达霉素生产菌株的方法。具体的，所述方法包括：将包含力达霉素辅基蛋白基因与不同肿瘤靶向分子编码序列组成之融合基因的表达质粒，导入力达霉素辅基蛋白基因阻断菌株，获得带有与所述肿瘤靶向...
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- 文献传递
