任峰
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶重组腺病毒载体的构建、鉴定及初步应用被引量：1
- 2010年
- 目的:构建携带Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(PKGⅡ)基因的重组腺病毒载体,并以此初步研究PKGⅡ对增殖相关的MAPK信号转导的影响。方法:将PKGⅡcDNA片段自载体pRC/CMV-GKⅡ(wt)中切出,克隆至穿梭质粒pENTR 1A,用ClonaseⅡ将pENTR-PKGⅡ中的PKGⅡcDNA片段定向克隆到pAd/CMV/V5-DEST中构建pAd/CMV/V5-DEST-PKGⅡ(Ad-PKGⅡ)。重组质粒Ad-PKGⅡ用PacⅠ酶酶切,使其线性化,再用脂质体转染法转染HEK293A细胞进行包装和扩增,微量全细胞病变法检测病毒滴度,蛋白质印迹法检测重组腺病毒Ad-PKGⅡ感染细胞后PKGⅡ的表达以及MAPK通路关键成分胞外信号调节激酶(ERK)活性的变化。结果:重组腺病毒滴度达5×109pfu/ml,蛋白质印迹法检测显示重组腺病毒感染CS54细胞后使其PKGⅡ表达明显增高;在BGC-823胃癌细胞株,PKGⅡ对EGF导致的ERK的激活有明显抑制作用。结论:成功构建了携带PKGⅡ基因的重组腺病毒,初步证明PKGⅡ对细胞增殖相关信号转导有抑制作用,为进一步研究PKGⅡ与肿瘤细胞发生发展的关系提供了基础。
- 屈睿刘加宝桑建荣任峰赵爽陈永昌
- 关键词：腺病毒载体DNA重组胞外信号调节激酶
- cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ对胃癌细胞BGC-823迁移的影响
- 2010年
- 目的:研究cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(cGMP dependent protein kinaseⅡ,PKGⅡ)对胃癌细胞株BGC-823迁移活动的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法:以携带PKGⅡ基因的腺病毒结构Ad-PKGⅡ感染胃癌BGC-823细胞,用蛋白质印迹法及免疫荧光检测感染病毒后PKGⅡ的表达。用特异性PKGⅡ激活剂8-pCPT-cGMP作用感染病毒的细胞,通过Boyden槽迁移率、刮除迁移分析法分析PKGⅡ高表达和活性增高对Ras同源性蛋白A(Ras homologA,RhoA)激动剂溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)诱导的胃癌细胞迁移的影响。结果:胃癌细胞株BGC-823在感染Ad-PKGⅡ后高表达PKGⅡ,经cGMP类似物8-pCPT-cGMP激活后,使RhoA活化诱导的细胞迁移活动受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PKGⅡ能明显抑制胃癌细胞株BGC-823的迁移。
- 任峰高倩陶燕桑建荣杨小明范少华陈永昌
- 关键词：胃癌细胞细胞迁移
- 血小板源性生长因子-BB对大鼠血管平滑肌细胞表皮调节素表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究表皮调节素(epiregulin)在血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)促进大鼠血管平滑肌CS-54细胞株增殖中的作用。方法:针对大鼠表皮调节素基因的mRNA序列合成siRNA,采用脂质体转染法将其转染CS-54细胞;用蛋白质印迹检测PDGF-BB及siRNA转染对CS-54细胞表皮调节素蛋白表达的影响;用MTT法分析干扰表皮调节素表达对PDGF促进CS-54细胞增殖效应的影响。结果:PDGF-BB促进细胞增殖,效应具有浓度和时间依赖性,在50 ng/ml PDGF-BB作用24 h时其效果最为明显;PDGF-BB可以刺激CS-54细胞表皮调节素蛋白的表达;表皮调节素siRNA转染细胞,可使表皮调节素蛋白表达水平明显降低,并明显阻断PDGF-BB对CS-54细胞增殖的促进作用(P<0.05)。结论:PDGF-BB刺激CS-54细胞增殖的作用是通过诱导CS-54细胞表达表皮调节素蛋白实现的。
- 吴彩云桑建荣任峰吴燕李璟妍陈永昌
- 关键词：血小板源性生长因子-BB血管平滑肌细胞细胞增殖
- 胃癌细胞株SGC-7901诱导凋亡过程中细胞外RNA测定
- 2010年
- 目的:研究胃癌细胞株SGC-7901细胞外RNA稳定性,探讨细胞外RNA来源。方法:将胃癌细胞株SGC-7901分为正常培养组、过氧化氢(H2O2)诱导坏死组和地塞米松(DEX)诱导凋亡组,巢式PCR测定各组不同时间点细胞上清液中RNA含量;应用RNA酶等处理上述细胞上清液,观察每组释放到细胞外RNA的稳定性。结果:正常培养组细胞外RNA在30 m in即可被检测到,随后逐渐增加,8 h后维持稳定;诱导坏死组和凋亡组在4 h之后细胞外RNA的量均有明显的增加,12 h后在高水平维持稳定。细胞凋亡组细胞外RNA有很强的稳定性,正常培养组和坏死组细胞外RNA则容易降解。结论:凋亡细胞释放的RNA有着特殊的稳定性,可能是被检测到的血液中RNA的主要来源。
- 袁方任峰高润娣陈永昌
- 关键词：稳定性凋亡
- 缺血预处理对缺血-再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43表达的影响
- 2009年
- 目的研究缺血预处理对缺血-再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨Cx43在缺血-再灌注中的作用及其意义。方法SD大鼠30只分3组:假手术Sham组、缺血-再灌注(I-R)组、缺血预处理(IPC)组。于再灌注2h后检测肾组织匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平;肾组织切片HE染色行中性粒细胞(PMN)计数及Paller评分,量化肾损害程度;Westernblot定量分析Cx43蛋白在肾组织中的表达。结果IPC组肾组织中NO、总NOS(TNOS)、诱导型NOS(INOS)水平明显高于IR组;IPC组PMN计数及Paller评分明显低于IR组;IPC组Cx43蛋白表达明显高于IR组,IR组Cx43蛋白表达明显低于Sham组。结论缺血预处理可能通过提高Cx43在肾组织中的表达减轻肾缺血再灌注损伤。
- 孙浩周留正贾俊海任峰
- 关键词：缝隙连接蛋白43缺血预处理缺血-再灌注损伤
- Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶对胃癌细胞增殖、迁移等生物学活性的影响
- 研究目的:
研究Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶/(cGMP dependent protein kinaseⅡ,PKGⅡ/)对人胃癌细胞增殖、迁移等生物学活性的影响。
研究方法:
/(1/...
- 任峰
- 关键词：胃癌细胞增殖迁移
- 文献传递
- 丹酚酸B对缺血再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43表达的影响
- 2010年
- 目的研究丹酚酸B对缺血再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨Cx43在丹酚酸B抗肾缺血再灌注损伤(RIRI)中的作用及其意义。方法 SD大鼠30只,分3组,每组10只,假手术(Sham)组、缺血再灌注(IR)组、丹酚酸B(Sal-B)组,于再灌注2h后检测肾组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);肾组织切片HE染色行中性粒细胞(PMN)计数及Paller评分,量化肾损害程度;Western-blot定量分析Cx43蛋白在肾组织中的表达。结果肾组织中MDA水平:Sal-B组明显低于IR组;SOD水平:Sal-B组明显高于IR组;PMN计数及Paller评分:Sal-B组明显低于IR组;Cx43蛋白表达:IR组明显低于Sham组,Sal-B组明显高于IR组。结论丹酚酸B提高Cx43在肾组织中的表达,减轻肾缺血再灌注损伤。
- 周留正孙浩贾俊海任峰
- 关键词：丹酚酸B缝隙连接蛋白43缺血再灌注损伤
- 64排螺旋CT间接预测心肌缺血的临床应用被引量：3
- 2008年
- 目的：探讨64排螺旋CT冠状动脉造影（CT angiography，CTA）诊断冠脉狭窄的程度与单光子发射计算机断层扫描（single photon emission computed tomography，SPECT）心肌灌注显像（myocadiac perfusion imaging，MPI）诊断相关狭窄动脉所支配的心肌血流灌注状况之间的对应关系。方法：112例可疑冠心病的胸痛患者在1周内均行CTA及^99mTc-MIBI（甲氧基异丁基异腈）MPI。比较不同狭窄程度的冠脉与相关狭窄动脉所支配的心肌血流灌注之间的关系。结果：分别以冠脉狭窄≥50％及〉170％为诊断心肌缺血的阳性标准。以患者作为比较对象，CTA预测心肌缺血的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88％，52％，74％，74％和76％，86％，90％，70％；以病变血管作为比较，CTA预测心肌缺血的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为92％，73％，66％，94％和47％，94％，82％，76％。结论：CTA诊断的冠脉狭窄程度≥70％时与相应的MPI显示心肌缺血之间的一致性较高，而狭窄在50％～70％的患者中两者的结果差异较大。
- 任峰付强徐健李先进
- 关键词：心肌灌注显像64排螺旋CT冠心病
