于建敏
- 作品数:28 被引量:60H指数:5
- 供职机构:中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金:青岛市科技发展计划项目国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生哲学宗教化学工程更多>>
- 新一代高通量测序在禽病毒检测中的应用
- 1引言高通量测序技术(High-throughput sequencing)又称"下一代"测序技术("Next-generation"sequencing technology),能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进...
- 王楷宬陈贵钱蒋文明刘硕侯广宇于建敏李金平庄青叶陈继明
- 关键词:高通量测序病毒
- 文献传递
- 新一代高通量测序在禽病毒检测中的应用
- 王楷宬陈贵钱蒋文明刘硕侯广宇于建敏李金平庄青叶陈继明
- 关键词:高通量测序病毒
- 痒病诊断技术
- 本标准规定了痒病临床诊断和实验室诊断的技术要求。 本标准适用于绵羊和山羊的痒病诊断。
- 王志亮刘雨田吴●三吴晓东于建敏邹艳丽王树双
- 关键词:痒病
- 文献传递
- 对一株超强马立克氏病毒株的检测和研究被引量:2
- 2015年
- 对从发病鸡场分离到的一株超强马立克氏病毒株,用PCR扩增该分离毒株的meq致瘤基因并测定了其序列,发现其与超强病毒株SD2012-1的核苷酸同源性为99%。该分离毒株的meq基因序列在第575-577位比疫苗株CVI988/Rispens的meq基因序列多插入3个碱基(CAC),与SD2012-1相同。使用该分离毒株进行疫苗免疫攻毒实验,未免组的发病率为80.0%,常规剂量HVT组和10×常规剂量HVT组的发病率分别为73.0%和76.6%,HVT不能提供有效免疫保护。常规剂量CVI988组和10×常规剂量CVI988组的发病率分别为30.0%和30.0%,常规剂量HVT+CVI988组和10×常规剂量HVT+CVI988组的发病率分别为26.6%和26.7%,免疫CVI988疫苗组鸡和HVT+CVI988联苗组鸡的发病率比免疫HVT疫苗组鸡低。说明,野外毒株的不断变异已经突破现有疫苗的免疫保护,会给养鸡业带来严重的损失。
- 张康龚振华林祥超郭光礼杜翔王丽萍于建敏李金平侯广宇单虎
- 关键词:疫苗
- 一种用于禽肿瘤病检测的PCR复合参照物及其制备方法
- 本发明涉及一种用于禽肿瘤病检测的PCR复合参照物及其制备方法,及其用于检测禽肿瘤病的方法和试剂盒。本发明所涉及的DNA参照物可专门用于马立克氏病、禽白血病、禽网织内皮增生症的PCR检测,该参照物集中了这三种疾病的基因特征...
- 龚振华吴晓东张丽娟李蕾张康任伟杰侯广宇李金平于建敏刘春菊王红丹胡永浩单虎王志亮马洪超
- 文献传递
- 2010—2014年山东H9N2亚型禽流感病毒分离鉴定及HA和NA基因序列分析被引量:3
- 2016年
- 旨在了解山东地区H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的流行和遗传变异情况,为该地区H9N2亚型禽流感的防制提供依据。通过鸡胚接种的方法从山东省分离到1 296株H9N2AIV,并选取40株对其进行HA和NA基因的扩增、测序及遗传进化分析。结果显示,2013年H9N2AIV的分离率最高,达42.30%;40株病毒的HA和NA的核苷酸序列同源性及推导的氨基酸相似性均在90%以上;HA裂解位点序列为PSRSSR↓GLF,NA颈部缺失3个氨基酸;HA和NA均存在糖基化位点的缺失和新的糖基化位点出现;大部分毒株发生了易于感染人型受体的突变;演化分析表明40株病毒的HA和NA基因均属于Y280-like亚分支。结果提示,H9N2AIV在山东省各地区普遍流行且在2013年达到高峰,所有毒株均符合低致病性禽流感病毒的分子特征,并且具有结合哺乳动物唾液腺受体的能力,因此应密切关注H9N2病原出现的新变化,制定相应的防控措施。
- 王冬冬张毅侯广宇刘永举刘朔蒋文明李金平于建敏范丹丹陈文雅王守春尹燕博陈继明
- 关键词:H9N2禽流感病毒HANA
- 我国部分地区H1亚型禽流感病毒分子流行病学分析被引量:3
- 2015年
- [目的 ]国内外对于H1亚型禽流感病毒缺乏系统的流行病学调查,对其流行状况和风险知之甚少。本研究旨在通过根据流行病学调查,分析该病毒流行状况和风险。[方法 ]2011–2013年间,在中国系统地开展了7次H1亚型禽流感病毒流行病学调查,共从24省(自治区、直辖市)949个场点采集38435份禽拭子样品,进行病毒分离、RT-PCR、序列测定等。[结果 ]共检出H1亚型禽流感病毒12株(5株H1N2、3株H1N3和4株H1N8),样品总阳性率为0.03%,鸡、鸽、鸭、鹅样品阳性率分别为0.00%(0/28786)、0.00%(0/646)、0.19%(11/5793)和0.06%(1/1131)。基因序列表明,这些病毒均属于东半球分支,均为低致病性禽流感病毒,且仅结合禽型受体。[结论 ]中国H1亚型禽流感病毒在家禽中感染率较低,主要分布在水禽中,未发现易于结合人型受体的突变,提示H1亚型禽流感病毒对中国家禽和公共卫生威胁较小。
- 刘向明刘朔侯广宇李金平庄青叶王素春蒋文明王楷宬于建敏单虎陈继明
- 关键词:禽流感病毒流行病学
- J亚群禽白血病病毒嵌套式PCR检测方法的建立及其应用被引量:1
- 2013年
- 根据GenBank中ALV-J亚群HPRS103株(登录号:Z46390.1)gp85蛋白基因序列,设计合成了2对引物,建立了针对ALV-J亚群的嵌套式PCR检测方法。外侧引物PCR扩增片段的大小为960bp,内侧引物PCR扩增片段的大小为766bp。筛选嵌套式PCR的最佳反应条件,并进行了特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床检测比较。结果显示,建立的嵌套式PCR方法能扩增ALV-J亚群特异性片段,而对禽网状内皮组织增殖病病毒、马立克氏病病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性腔上囊病病毒和减蛋综合征病毒的扩增结果均为阴性;该方法第一轮和第二轮扩增的敏感性分别为1fg/μL和0.1fg/μL,第二轮扩增的敏感性比第一轮的高10倍;通过对32份临床样品的检测,嵌套式PCR的检出率与病毒分离方法的检出率相同,且高于参考PCR的检出率18.7%。结果表明,本研究建立的嵌套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于ALV-J亚群的临床诊断。
- 王丽萍龚振华张康臧京帅王洪伟侯广宇李蕾李金平于建敏单虎
- 关键词:禽白血病病毒
- 双重RT-PCR快速检测H7N9流感病毒方法的建立被引量:10
- 2015年
- 为建立简便快速检测H7N9亚型流感病毒的方法,根椐Gen Bank中H7亚型流感病毒的HA基因序列和N9亚型流感病毒的NA基因序列,设计2对特异性引物,在建立H7亚型和N9亚型单项RT-PCR的基础上,优化双重RT-PCR反应条件,建立同时检测H7亚型和N9亚型的双重RT-PCR。对H7N9亚型流感病毒核酸模板进行双重RT-PCR扩增,结果可同时扩增HA基因263bp、NA基因520 bp的特异性片段,而对其他常见亚型的流感病毒的RT-PCR扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该双重RT-PCR方法的检测下限为3 pg的H7N9病毒模板。利用该双重RT-PCR方法对30份临床样品进行H7N9病毒进行检测,与病毒分离方法进行对比,结果显示,两者的符合率为100%。结果表明建立的双重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、敏感、准确的特点,可用于H7N9流感病毒的同时检测和鉴别诊断,为H7N9亚型流感的有效防控提供技术支撑。
- 蒋文明李金平于美芳孙文博王素春彭程侯广宇刘朔杜翔于建敏陈继明
- 关键词:流感病毒双重RT-PCR
- 用Nested-PCR诊断鸡弯曲菌病的研究被引量:2
- 2012年
- 本研究采用Nested-PCR方法,对于临床采集的感染空肠弯曲菌的病鸡组织样品进行了检测,研究结果表明,采用Nested-PCR方法检测空肠弯曲菌具有结果清晰,操作简便,快速等特点。研究还发现,空肠弯曲菌对鸡的致病性可能增强,应引起重视。
- 张康龚振华李蕾王洪伟李玉清张丽娟王丽萍庄青叶于建敏李金平刘国庆
- 关键词:空肠弯曲菌PCR禽病诊断