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黄诗莹
作品数:
1
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供职机构:
南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系
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发文基金:
国家教育部博士点基金
国家自然科学基金
广东省自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
陈滨
南方医科大学公共卫生与热带医学...
谭栩颖
南方医科大学公共卫生与热带医学...
陈晓光
南方医科大学公共卫生与热带医学...
郭斌
南方医科大学公共卫生与热带医学...
吴焜
南方医科大学公共卫生与热带医学...
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南方医科大学
作者
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邱洁蕾
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黄诗莹
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弓形虫GRA7基因的克隆表达及免疫分析
2013年
本文构建了刚地弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)基因原核表达重组质粒,进行蛋白表达并分析重组蛋白的免疫反应性。设计合成引物,从弓形虫RH株基因组DNA中特异扩增出GRA7基因片段并进行序列分析。目的片段用EcoRI和BamHI双酶切后分别构建重组质粒pET32a-GRA7和pET28a-GRA7,而后转人大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,Westernblotting分析表达蛋白。结果显示,从弓形虫RH株中成功扩增出大小约710bp的GRA7基因片段,构建的重组质粒经双酶切和PCR鉴定及测序,目的基因片段与预期相符。重组质粒pET32a-GRA7经IPTG诱导后,可高效表达重组蛋白,Westernblotting分析显示重组GRA7蛋白能被弓形虫慢性感染血清识别,而重组质粒pET28a-GRA7未能诱导表达出目的蛋白。原核表达的重组GRA7抗原具有特异的免疫反应性,为弓形虫的诊断应用和疫苗研究奠定了基础。
黄诗莹
邱洁蕾
谭栩颖
杨灿洪
郭斌
陈滨
吴焜
陈晓光
关键词:
刚地弓形虫
基因克隆
原核表达
免疫反应性
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