黄力坤
- 作品数：10 被引量：25H指数：2
- 供职机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种土壤微生物cDNA文库的构建方法
- 本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法，本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA，单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接，再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应，反应后的c...
- 方长旬林文雄黄力坤许铁城林瑞余
- 文献传递
- 一种土壤微生物基因组DNA和总RNA的提取方法
- 本发明提供一种有效提取作物根际土壤微生物基因组DNA和总RNA的方法，包括将土壤样品先用硫酸铝去除腐殖质等严重干扰核酸提取的杂质，进一步用玻璃珠破碎土壤微生物细胞，再加入SDS及LiCl溶液裂解细胞、游离核酸，加入酚、氯...
- 方长旬林文雄王清水余彦黄力坤林瑞余
- 文献传递
- 硅及其吸收基因Lsi1调节水稻耐UV-B辐射的作用被引量：8
- 2011年
- 硅能提高植物对生物和非生物胁迫的抗性,水稻是吸收硅较多的作物之一。本研究以UV-B耐性水稻Lemont和UV-B敏感水稻Dular及其转硅吸收基因(Lsi1)的水稻为材料,研究硅与水稻耐UV-B辐射的关系。结果发现,自然光照条件下,缺硅培养的UV-B耐性水稻Lemont和UV-B敏感水稻Dular叶片的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase,PAL)和光裂解酶(photolyase,PL)基因的表达以及总酚、类黄酮的含量都分别低于加硅的处理;UV-B辐射后,上述指标在不同硅处理的两水稻中都增加和增强,但缺硅培养的水稻仍显著低于加硅培养的水稻。进一步分别以Lsi1被抑制、增强的两种转基因Lemont水稻,以及Lsi1增强的转基因Dular水稻为材料,采用加硅培养的方式对转基因水稻的上述指标进行研究,结果也发现,抑制水稻Lsi1基因表达,其叶片PAL、PL基因表达也下调,总酚、类黄酮含量降低,此结果与缺硅培养下的野生型植株相似;增强表达Lsi1基因则结果相反。UV-B辐射后,上述指标也增强和增加,但在相同的水稻品种中仍表现为Lsi1被抑制的植株最低,Lsi1增强的植株最高。研究结果表明,通过调节水稻Lsi1能够改变水稻耐UV-B辐射的能力。
- 方长旬王清水余彦黄力坤吴杏春林文雄
- 关键词：硅水稻紫外线B
- 一种土壤微生物cDNA文库的构建方法
- 本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法，本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA，单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接，再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应，反应后的c...
- 方长旬林文雄黄力坤许铁城林瑞余
- 烟草SSR标记的电子遗传定位被引量：2
- 2018年
- 烟草中已开发的SSR标记只有一部分定位到遗传图谱中(记为M-SSR),而大部分还没有定位(记为N-SSR)。本研究利用已发表的5 000多对烟草SSR标记引物和包含2 000多个SSR标记的高密度遗传图谱以及3个烟草品种基因组序列的数据,通过e-PCR将SSR标记定位到烟草基因组中,并根据位于相同支架的M-SSR和N-SSR标记的连锁关系,将92个N-SSR标记定位到烟草遗传图中。本研究结果增加了烟草SSR遗传图的密度,证明了这种电子遗传定位方法的可行性,可在不同物种中应用。
- 迟文超黄力坤唐唯其唐唯其高文霞
- 关键词：烟草SSR
- 水稻品种“Lemont”响应低氮培养及共培稗草的上调表达基因分析被引量：1
- 2012年
- 营养匮乏和伴生杂草是水稻种植过程中的常见影响因素。本研究应用抑制消减杂交(SSH)技术,分别研究低氮、稗草条件下,非化感水稻品种"Lemont"的上调表达基因。结果显示,低氮条件下,"Lemont"水稻中参与生长调控的生长素响应蛋白,参与抗逆防御的类NBS-LRR蛋白、过氧化氢酶、金属硫因蛋白,以及参与蛋白质代谢相关蛋白的编码基因上调表达。稗草共培下,编码NADH脱氢酶、细胞色素氧化酶、ATP依赖性RNA解旋酶等与植物生长相关的基因,与抗逆防御相关的几丁质酶和糖基水解酶基因,以及与信号转导相关的锌指蛋白及组氨酸激酶基因增强表达。研究结果表明,非化感水稻"Lemont"能够通过调节抗逆以及生长调节相关基因的表达,从而响应不同的胁迫。
- 方长旬许铁城黄力坤王清水何海斌林文雄
- 关键词：水稻基因表达
- 一种土壤微生物基因组DNA和总RNA的提取方法
- 本发明提供一种有效提取作物根际土壤微生物基因组DNA和总RNA的方法，包括将土壤样品先用硫酸铝去除腐殖质等严重干扰核酸提取的杂质，进一步用玻璃珠破碎土壤微生物细胞，再加入SDS及LiCl溶液裂解细胞、游离核酸，加入酚、氯...
- 方长旬林文雄王清水余彦黄力坤林瑞余
- 混合QTL定位软件改进与在线平台的构建
- 分离体混合分析(BSA)与新一代测序技术相结合(简称BSA-Seq)已被证明是一种十分有效的快速定位数量性状基因座(QTL)的方法,当下在各个物种上的应用越来越多,日渐成为QTL定位的主流方法之一。最近,本实验室建立了一...
- 黄力坤
- 关键词：QTL定位JOOMLA
- 文献传递
- 一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA聚合酶的方法
- 2012年
- 通过37℃恒温振荡培养含有Taq DNA聚合酶基因的E.coli菌株,并用IPTG诱导该基因表达获得TaqDNA聚合酶蛋白,利用40%硫酸铵沉淀该蛋白后溶解于storage buffer中。此法获得的Taq DNA聚合酶带负电荷,因此采用阴离子交换柱纯化蛋白。试验结果表明,此法与传统的透析方法相比能快速地去除生物小分子杂质,同时去除透析方法无法除去的杂蛋白;既能保证Taq DNA聚合酶的生物学活性,同时能缩短纯化时间、提高Taq DNA聚合酶的纯度。以土壤微生物DNA、水稻cDNA为模板进行PCR扩增并对扩增产物进行测序,结果显示纯化后的Taq DNA聚合酶具有较高的扩增效率和保真性。
- 余彦李程勋陈树清叶长亮黄力坤许铁城林文雄
- 关键词：TAQDNA聚合酶硫酸铵
- 不同胁迫条件下化感与非化感水稻PAL多基因家族的差异表达被引量：14
- 2011年
- 水稻苯丙氨酸解氨酶(PAL)调控酚酸类化感物质的合成代谢。编码PAL的基因是一个基因家族,包含至少11个基因成员,并受不同环境条件的调控。为了明确PAL基因家族中调控水稻化感作用的特定基因成员,运用实时荧光定量PCR技术分析了低氮及稗草胁迫条件下强化感水稻PI312777与非化感水稻Lemont中根系的11个PAL成员基因的表达差异。结果表明,低氮和稗草胁迫条件下,PI312777和Lemont中的PAL4和PAL10均不表达,其余9个PAL基因成员发生了不同程度的表达变化。其中,PAL11均上调表达,其分别在低氮处理和稗草胁迫的PI312777中上调3.29倍和1.07倍,而在相同处理下的Lemont中上调3.92倍和1.08倍;PAL3和PAL9则仅在低氮和稗草胁迫条件下的PI312777中上调表达,低氮胁迫分别为1.83倍和2.66倍,稗草胁迫为1.46倍和2.65倍;而这两个基因在相同处理下的Lemont中表达下调,低氮胁迫下调1.05和1.24倍,稗草胁迫下调1.14和1.16倍,推测PAL3和PAL9可能与胁迫初期调控水稻化感作用有关。
- 方长旬王清水余彦罗美蓉黄力坤熊君沈荔花林文雄
- 关键词：胁迫化感作用苯丙氨酸解氨酶基因
