韩海燕
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB研究进展被引量：3
- 2012年
- 葡萄球菌呼吸相关双组分系统SrrAB能感应外界O2浓度,并将信号传至胞内,调控下游基因的转录,以应对外界环境的变化。有研究表明,金黄色葡萄球菌SrrAB在有氧条件下促进毒力因子的表达,抑制生物膜的形成;在厌氧条件下抑制毒力因子的表达,促进生物膜的形成。另外,在有氧及厌氧条件下,金黄色葡萄球菌SrrAB调控生长代谢的途径也不一致。表皮葡萄球菌中也存在类似的双组分系统SrrAB,且与金黄色葡萄球菌SrrAB具有较高同源性,但目前尚不清楚两者在生长代谢及毒力调控方面的异同。结合课题组研究工作,简要综述葡萄球菌SrrAB的调控机制,着重比较其在有氧及厌氧条件下的调控差异,这对临床诊治葡萄球菌引起的感染具有一定的借鉴意义。
- 武有聪许涛刘华勇韩海燕吴旸白丽瞿涤
- 关键词：葡萄球菌
- 表皮葡萄球菌YycG单克隆抗体抗生物膜活性的研究
- 2015年
- YycFG双组分信号转导系统调控葡萄球菌细胞壁合成、代谢及生物膜形成,PAS是组氨酸激酶YycG的胞外信号感应区域。本研究针对胞外PAS区域制备抗YycG-PAS单克隆抗体(YycG-PAS MAb)。免疫鉴定结果表明,YycG-PAS MAb可与重组YycG-PAS蛋白和表皮葡萄球菌菌体YycG蛋白结合,属于IgG2a亚型,效价为log 215。YycG-PAS MAb(80μg/ml)与表皮葡萄球菌RP62A菌株共培养24h,对细菌生物膜形成的抑制率达46.5%,与mIgG(80μg/mL)组相比有显著差异(P<0.05)。YycG-PAS MAb(80μg/ml)与低浓度万古霉素(1μg/ml)联用可增强对24h细菌生物膜的抑制作用,抑制率由57.6%提高至93.0%(P<0.01)。YycG-PAS MAb对浮游状态表皮葡萄球菌的生长及存活无显著影响。本研究为YycGPAS MAb在抗生物膜感染中的潜在应用价值奠定了一定基础。
- 龚婷韩海燕吕智慧王小飞曹鋆程训佳吴旸瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜单克隆抗体
- 表皮葡萄球菌磷酸盐转运相关蛋白PhoU2生物学功能的研究
- 王小飞韩海燕吴旸瞿涤
- 表皮葡萄球菌SrrAB生物信息分析及SrrA蛋白的原核表达
- 2016年
- 目的分析表皮葡萄球菌SrrAB生物信息,表达及纯化SrrA蛋白,为SrrA功能研究奠定基础。方法以表皮葡萄球菌SE1457基因组为模板,PCR扩增srrA基因,构建重组表达质粒pET28a-srrA,转入大肠杆菌BL21,利用纯化的重组蛋白SrrA免疫小鼠,制备SrrA多克隆抗体,并检测SrrA在表皮葡萄球菌不同生长时期的表达水平。序列比对利用Clustalw2软件,蛋白结构域分析用DNAMAN软件。结果表皮葡萄球菌SE1457SrrAB单独组成一个操作子,SrrA位于胞浆中,与金黄色葡萄球菌和枯草杆菌类似物的同源性分别为95%和65%,SrrB为跨膜蛋白,与上述细菌类似物的同源性分别为71%和33%;表皮葡萄球菌SrrA于对数生长中期表达量最高。结论成功表达并纯化了表皮葡萄球菌SrrA蛋白,为SrrAB下游调控机制研究奠定基础。
- 武有聪王涛韩海燕瞿涤白丽
- 关键词：表皮葡萄球菌生物信息原核表达
- 以质粒为基础的同源重组技术在葡萄球菌基因敲除中的应用被引量：7
- 2019年
- 葡萄球菌是医院内感染的重要病原菌,通过同源重组敲除葡萄球菌的靶基因是研究其功能的重要方法。以质粒为基础的重组系统是外源基因序列传递,发生同源重组的重要载体。近年来,葡萄球菌基因敲除所用的重组质粒的特性取得不断改进。结合本课题组工作,简要综述以质粒为基础的同源重组技术在葡萄球菌基因敲除中的应用及技巧,重点比较不同质粒的特点及使用条件,对于葡萄球菌致病机制研究具有借鉴意义。
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- 关键词：质粒同源重组基因敲除葡萄球菌
- 表皮葡萄球菌PhoU同源物(SERP0316)的抗体制备及免疫鉴定
- 2014年
- 表皮葡萄球菌可在植入性医疗材料表面形成生物膜,对多种抗生素耐受,而持留菌的形成是导致细菌生物膜耐药的原因之一。研究发现,大肠埃希菌中PhoU可影响持留菌的形成,与细菌对多种抗生素及压力条件的耐受相关,但表皮葡萄球菌中PhoU的功能仍不清楚。生物信息学分析显示,在表皮葡萄球菌中存在2个phoU同源基因,其中serp0956位于pst操纵子中,命名为phoU1;另一个编码功能未知蛋白的phoU基因同源物(serp0316)命名为phoU2。前期研究显示,敲除phoU1并不影响表皮葡萄球菌生长、生物膜形成等生物学特性,为此本研究对PhoU2进行了初步探讨。利用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测phoU2基因在表皮葡萄球菌SE1457不同生长时期的转录水平,发现其在细菌生长不同时间点持续表达,其中对数期(6h)表达量相对较高。为进一步研究表皮葡萄球菌中PhoU2的表达情况,对PhoU2蛋白进行原核表达和纯化,并用纯化的重组PhoU2蛋白免疫小鼠制备PhoU2多克隆抗体。在此基础上,利用蛋白免疫印迹法检测PhoU2在SE1457菌株不同生长时间点的表达水平,结果显示PhoU2在细菌生长对数期和平台期均有表达。另外,在不同的表皮葡萄球菌临床分离株中均检测到PhoU2蛋白表达,表明PhoU2具有一定的保守性。以上研究提示,PhoU2可能作为PhoU的功能同源物发挥一定的作用,为进一步研究表皮葡萄球菌PhoU2的生物学功能及其在生物膜和持留菌形成中的作用奠定了基础。
- 韩海燕王小飞武有聪许涛刘华勇蔡霞瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌原核表达
- 表皮葡萄球菌生物膜感染动物模型的建立被引量：3
- 2013年
- 表皮葡萄球菌是引起医院内感染的常见条件致病菌之一,可在植入性医疗材料表面形成生物膜而引起慢性持续性感染。为建立表皮葡萄球菌生物膜感染动物模型,选取新西兰白兔、樱桃谷鸭、豚鼠、C57小鼠、BALB/c小鼠和Sprague-Dawley(SD)大鼠为受试对象,分别采集血清,在体外检测其对表皮葡萄球菌生物膜的抑制作用,筛选出抑制效应较弱的新西兰白兔用于建立生物膜感染模型。经兔皮下埋植小盘后接种表皮葡萄球菌(1ml,109CFU/ml),72h后用光学显微镜、激光共聚焦显微镜及扫描电子显微镜观察小盘表面生物膜的形态,并进行菌落计数。结果显示,动物模型内形成的生物膜与体外培养的生物膜在形态上相似。进而利用该模型初步研究万古霉素在体内对细菌生物膜形成的影响,结果显示,万古霉素局部给药组生物膜内的活菌数明显低于未处理组(P<0.01)。本研究成功建立了表皮葡萄球菌生物膜感染新西兰白兔模型,可用于研究表皮葡萄球菌在体内形成生物膜的能力及局部药物的抗生物膜效果评价。
- 刘华勇武有聪何年安胡健许涛龚婷韩海燕吴旸瞿涤
- 关键词：动物模型生物膜表皮葡萄球菌
- 表皮葡萄球YycG/YycF双组分信号转导系统功能和调控下游基因机制的研究
- 目的表皮葡萄球菌是临床上医疗植入材料相关感染中最常见的病原。双组分信号转导系统感应外界信号并调控细菌的生物学功能,其中YycG/YycF是目前已知的表皮葡萄球菌中唯一一对生长所必需的系统。本研究通过寻找和分析其调控的下游...
- 许涛刘华勇韩海燕吴旸瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌反义RNA
- 上海市全科医生控烟知识与态度及其影响因素
- 目的：了解上海市社区全科医生的吸烟状况和控烟知识与态度，并对其影响因素进行分析，为进一步提高社区全科医生的控烟知识与态度及控烟政策的制定提供参考依据。 方法：采用横断面调查的方法，对上海市17家社区卫生服务中心的499...
- 韩海燕
- 关键词：全科医生控烟知识
- 文献传递
