韩世炜
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：北京师范大学生命科学学院细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- POLD1启动子转录活性及其与几种细胞周期因子的相关性研究
- 在该研究中,我们利用PCR方法获得了POLD1基因转录起始区上游不同长度的序列片段,并将它们与带有荧光素酶基因的pGL2-Basic载体连接而构建了一系列的重组质粒.用这些质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞后,通过荧光素酶检...
- 韩世炜
- 关键词：启动子细胞周期调控
- 文献传递
- MCF-7细胞瞬时基因表达转染模式的建立
- 2005年
- 目的 建立一种高效、简便、低毒、价廉的瞬时基因表达细胞转染模式。 方法 选择人乳腺癌细胞 系MCF 7,采用Polyethylenimine(PEI)作为转染剂,对细胞密度、载体DNA量、PEI氮与DNA磷的比率(PEI N∶DNA P) 以及PEI DNA混合物与细胞共存的无血清培养时间等对转染效率的影响进行了比较分析。 结果 转染时的24 孔板每孔接种的细胞以2×105为宜,PEI N∶DNA P的最优比率不是固定的,它与转染时DNA的量有关,每孔转染1 μgDNA时其最优PEI N∶DNA P比率为33∶1左右,而每孔转染4μgDNA时其最优PEI N∶DNA P比率为9∶1左右。 另外,PEI DNA混合物与细胞共存的无血清培养时间至少需要3h,最佳时间为5～7h。 结论 利用转染剂PEI, 控制合适的细胞密度、DNA质量、PEI N∶DNA P比率和无血清培养的时间,可成为一种高效、简便、低毒、价廉的瞬时 基因表达的细胞转染模式。
- 张海江韩世炜桑建利何大澄
- 关键词：细胞转染
- 真核细胞DNA聚合酶δ的结构与功能被引量：3
- 2004年
- DNA聚合酶δ(Polδ)在真核细胞的DNA复制过程中具有核心酶的作用,同时还参与DNA的修复。Polδ是一种由多个亚基组成的复合体,目前已从哺乳动物、裂殖酵母和芽殖酵母等多种真核生物细胞中分离出,并对它们的亚基组成进行了分析,但还未得到确切一致的结果。Polδ在DNA复制中的具体作用已基本了解,它参与催化整个前导链的复制以及一些或大部分滞后链的复制。此外,Polδ还参与DNA的修复,此酶的这一功能可减少DNA的变异,但目前对其作用机理还知之较少。在Polδ活性调控方面,主要研究了一些相关蛋白因子对Polδ活性的调控作用以及转录因子对催化亚基表达的调控作用。
- 张海江韩世炜桑建利
- 关键词：真核细胞DNA聚合酶DNA
