陈卫 作品数:25 被引量:64 H指数:6 供职机构: 兰州大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省自然科学基金 甘肃省科技厅创新团队资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 经济管理 更多>>
临床生物化学检验技术课程中PBL+CBL教学案例的编写 被引量:12 2020年 “问题”结合“案例”的教学方法(PBL+CBL)具有研讨性、启发性和灵活性的优势,是激发学生学习兴趣、理论联系实践的一种有效教学方法。案例质量是PBL+CBL教学效果的决定性因素之一。在“临床生物化学检验技术”课程案例的编写过程中要明确教学目标,统筹学生已有知识架构,遵循由浅入深、循序渐进及学多深设计多深的原则。 张雪燕 姚海燕 郝春燕 陈卫关键词:PBL CBL 教案 X线照射诱导人胃癌SGC-7901细胞生物特性改变以及YKL-40基因表达变化 2010年 目的观察X线照射后胃癌SGC-7901细胞形态改变、细胞周期分布情况以及是否可以诱导YKL-40基因的表达。方法将胃癌细胞株SGC-7901分为空白对照组(不照射)和实验组(2Gy/1f和4Gy/2f),实验组细胞经6-MVX线照射后取两组细胞在倒置显微镜下观察细胞形态学的改变,流式细胞术检测SGC-7901细胞周期的变化情况,半定量RT-PCR检测基因YKL-40mRNA的表达。结果实验组(2Gy/1f)细胞经X线照射后出现明显的形态学改变;流式细胞检测发现,与空白对照组细胞比较,2Gy、4Gy实验组细胞S期上调,G2/M期下调,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测胃癌细胞株SGC-7901不表达YKL-40或检测不到YKL-40mRNA,经X线照射后YKL-40表达。结论 X线照射可使人胃癌细胞发生形态改变及细胞增殖周期再分布,并且可诱导人胃癌细胞表达YKL-40。 罗宏涛 车团结 王小虎 庞春艳 徐华 陈卫 李琳关键词:胃癌细胞系 生物特性 头颈部癌患者血液中β-GD、γ-GT及Afu的研究 陈卫 雒富基 朱昕 葛建国 吴颖等 该课题用酶学检测方法,对鼻咽癌、喉癌及上颌窦癌患者血清中β-葡萄糖苷酸酶(β-GD)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和α-L-岩藻糖苷酶(Afu)的活性进行了测定。研究证明:在鼻咽癌、喉癌及上颌窦癌患者血清中,三种酶的活性...关键词:关键词:头颈部癌 血清诊断 酶学检测 FABP7基因真核表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响 被引量:1 2008年 目的构建脑脂肪酸结合蛋白(BLBP/B-FABP,FABP7)基因的真核表达载体,并检测其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法采用逆转录方法从星型细胞瘤组织中扩增FABP7基因,双酶切后插入线性化的pcDNA3.1载体真核启动子下游,构建重组真核表达载体,转染人乳腺癌细胞MCF-7后,采用半定量RT-PCR检测FABP7基因mRNA的表达,MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的周期变化情况,并对细胞进行计数。结果FABP7基因重组真核表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染MCF-7细胞后48、72和96h,pcDNA3.1-FABP7组的细胞数和细胞的A490值均比pcDNA3.1空质粒组明显降低,G1期细胞百分含量均明显升高。结论已成功构建了FABP7基因的真核表达载体,该载体可抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖。 王毅君 车团结 张萍 闫琨 李琳 王勤 陈卫关键词:真核表达 乳腺癌 MCF-7细胞 增殖 油酸调节人血管平滑肌细胞TLR4的增殖活性及炎性因子的表达 被引量:6 2013年 目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性,增加油酸浓度,抑制细胞增殖。油酸上调TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1 mRNA表达最大幅度为6.5、7.4、7.4和7.1倍。IL-6、IL-8和MCP-1蛋白表达最大上调幅度为2.16、1.93和2.06倍。200μmol/L组TLR4蛋白表达的吸光度值为(1.70±0.62),与对照组(0.29±0.22)比较P<0.05。LPS组TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1的表达明显增加(P<0.05)。结论油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子mRNA及蛋白表达。 杨海静 陈卫 权金星 李伟华 刘静 邱明才关键词:油酸 细胞因子 基因表达 YKL-40转染对前列腺癌LNcap细胞增殖及侵袭活性的影响 被引量:1 2011年 目的探讨外源性YKL-40基因转染对前列腺癌LNcap细胞增殖、侵袭、迁移及黏附活性的影响。方法 RT-PCR法检测前列腺癌细胞LNcap、PC-3、DU-145 YKL-40基因内源性表达情况;用pcDNA3.1-YKL-40质粒转染LNcap细胞,分别经MTT法、Boyden小室法及黏附试验检测转染前后细胞增殖、侵袭、迁移及黏附活性,并进行体外药敏试验。结果仅DU-145细胞可内源性表达YKL-40基因;pcDNA3.1-YKL-40转染的LNcap细胞在第2~5天的A490值均显著高于对照组(P<0.05),其侵袭(75.11±4.40)和迁移穿膜细胞数(133.00±5.07)及黏附率(107.57%)均显著高于对照组(P<0.05),对5-FU、顺铂和依托泊苷的IC50值分别为(31.15±0.43)、(4.15±0.13)和(55.22±0.57)μmol/L,均显著高于对照组(P<0.05)。结论 YKL-40基因能促进LNcap细胞增殖,提高细胞侵袭、迁移及黏附活性,并使其对5-FU、顺铂和依托泊苷具有一定的耐药性。 夏艳 査成喜 杨海静 温玉婷 杨浩 陈卫关键词:LNCAP细胞 细胞增殖 肿瘤侵润 大肠癌中TIP30基因的表达及其与VEGF,survivin,cyclinD1的相关性 闫琨 车团结 王小虎 李琳 王毅君 陈卫TLR4通路在软脂酸诱导人血管平滑肌细胞IL-6基因表达中的作用 被引量:1 2013年 构建Toll样受体4(TLR4)shRNA腺病毒表达载体(pGSadeno—TLR4)并感染人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA—VSMC,以实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测NF—KBp65活性和IL-6的蛋白水平。结果显示,软脂酸增加HA—VSMCIL-6mRNA和蛋白水平,且具有明显的剂量依赖关系,软脂酸(400μmol/L)处理6h作用最明显。IL-6mRNA的表达水平为对照组的10.43倍(P〈0.01)。IL-6蛋白水平在软脂酸作用24h时达到峰值,约为对照组的2.18倍(P〈0.01)。NF.KB阻断剂parthenolide下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为65%和59%(均P〈0.01),蛋白激酶C(PKC)阻断剂白屈菜红碱下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为24%和28%(均P〈0.05)。而细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059和磷酸肌醇3激酶抑制剂wortmannin对软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达均无明显作用(均P〉0.05)。pGSadeno.TLR4下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为72%和75%(均P〈0.01),下调软脂酸刺激的NF—KBv65活性约62%(P〈0.01)。这些结果提示TLR-4/NF—KB和PKC信号通路介导了软脂酸诱导的人主动脉血管平滑肌细胞IL-6基因表达。 权金星 高啸波 杨海静 陈卫 李伟华 李永红 刘静关键词:软脂酸 TOLL样受体4 白细胞介素6 SELEX法筛选宫颈癌前病变核酸适配子 被引量:6 2018年 构建随机ssDNA文库,通过SELEX技术,以正常、炎性宫颈脱落细胞为反筛细胞,以上皮内低级别病变(CIN1)、上皮内高级别病变(CIN2、CIN3)和鳞状细胞癌脱落细胞为正筛细胞,经过12轮筛选特异性适配子高度富集得到宫颈癌前病变适配子库,经特异性、亲和力分析和细胞免疫荧光确立高特异性适配子CIN-Ap4可作为诊断宫颈癌前病变生物标志物,为宫颈癌前病变分子诊断奠定理论基础,提供新思路。利用Prime Premier 5.0设计构建了随机ssDNA文库并根据文库两端固定序列设计引物,对对称PCR和间接不对称PCR中的退火温度、循环数以及上、下游引物浓度比等条件进行优化,分析确定50μL反应体系中对称PCR的最佳反应条件为:最佳退火温度为49.5℃,最佳循环数为15个循环;间接不对称PCR的最佳反应条件为:50μL反应体系中上、下游引物浓度的最佳比例为80∶1,最佳循环数为35个循环。实验结果表明成功构建了寡核苷酸文库,在最适PCR条件下可获得理想的dsDNA和ssDNA,并具有良好的重复性,为顺利筛选适配子提供保证。 李文慧 石大林 贾茹涵 杨静 张艳艳 陈卫 韩跃武关键词:宫颈癌前病变 生物标志物 RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA对膀胱癌诊断价值的系统评价 被引量:6 2010年 背景与目的:Survivin基因逐渐成为肿瘤诊断、判断预后和治疗的靶点。用RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA作为一种无创性手段用于膀胱癌的诊断,国内外相关研究较多,但其结果不一。本研究旨在应用系统评价方法对相关文献进行客观评价,以评估RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA对膀胱癌的诊断价值。方法:以膀胱肿瘤、生存素、逆转录-聚合酶链反应、敏感度、特异度、诊断等为主要检索词检索PubMed、EMBASE、SCI、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CJFD)、中文科技期刊数据库(CSJD)、中华医学会数字化期刊等数据库,并结合Google Scholar等搜索引擎全面搜集1997年到2009年4月关于RT-PCR检测尿液survivin mRNA诊断膀胱癌的研究。根据QUADAS(quality assessment of diagnostic accuracy studies)质量评价标准评价纳入文献质量,用Meta-Disc软件对结果指标进行分析。结果:最终纳入26个研究,共2416例。Meta分析结果显示,RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA诊断膀胱癌与病理检查相比准确度指标合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比及SROC曲线下面积分别为88%、94%、14.56、0.13、0.9736;巢式RT-PCR技术检测的敏感度、特异度及SROC曲线下面积最高,分别为91%、95%、0.9805;普通RT-PCR技术检测的敏感度和特异度次之,分别为87%和94%;定量RT-PCR技术检测的敏感度为80%,特异度为93%。结论:与病理检查相比,RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA诊断膀胱癌有较高的敏感度和特异度,可作为膀胱镜检查的主要辅助手段之一,用于膀胱癌的筛查及术后监测。 夏艳 刘雅莉 杨克虎 陈卫关键词:SURVIVIN 逆转录-聚合酶链反应 RT-PCR