闫晓红
- 作品数:32 被引量:90H指数:5
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 鸡KLF2基因的表达分析和功能研究
- 转录因子Kruppel like factor2(KLF2)基因在哺乳动物的细胞分化和胚胎发育过程中发挥重要调控作用,但其在鸟类中的作用还不清楚。本研究采用RT-PCR方法克隆了鸡KLF2(gKLF2)基因的完整编码区序...
- 张志威荣恩光史明欣陈月婵闫晓红王宁李辉
- 关键词:锌指结构脂肪细胞分化转录调控
- 文献传递
- 一种建立鸡永生化前脂肪细胞的方法
- 一种建立鸡永生化前脂肪细胞的方法,本发明涉及建立鸡永生化前脂肪细胞的方法。本发明是要解决原代鸡前脂肪细胞不能无限传代、异质性、不同来源的细胞存在遗传背景差异等导致研究难以获得稳定可靠的结果的问题。一、克隆鸡端粒酶逆转录酶...
- 王宁王伟李辉闫晓红
- 文献传递
- 鸡miR-19a、miR-19b通过靶向抑制LIN9促进前脂肪细胞增殖被引量:4
- 2016年
- miR-17-92基因簇编码包括miR-19a、miR-19b在内的至少6个miRNA,在鸡细胞的增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中发挥重要作用,但其作用机制尚不清楚。生物信息学分析显示,细胞周期调控子LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19b的潜在靶点。为验证这一预测,构建含野生型LIN9 3'-UTR荧光素酶报告基因载体(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-WT)及突变型报告基因载体(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-MUT),开展靶标LIN9的鉴定。复合转染结合报告基因酶活性测定结果表明,过表达miR-19a和miR-19b能显著抑制含野生型LIN9 3'-UTR的报告基因表达,而过表达miR-19a和miR-19b抑制剂显著提高野生型LIN9 3'-UTR报告基因的表达。实时定量PCR(RT-q PCR)证明,miR-19a和miR-19b抑制剂对内源性LIN9 mRNA的表达没有影响,提示miR-19a和miR-19b可能不是通过降解mRNA调控LIN9表达。转染结合CCK-8细胞增殖分析显示,在鸡前脂肪细胞过表达LIN9明显抑制细胞增殖。与此相一致的是,细胞增殖标志分子Cyclin D1、c-Myc、PCNA、Ki67的mRNA表达量明显降低。本研究证实,LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19b的靶标,同时证实,LIN9抑制鸡前脂肪细胞的增殖。是否miR-17-92基因簇编码的其它mi-RNA成员也以LIN9为靶标尚不得而知,我室正在研究中。
- 宋鹤张潇飞褚衍凯邢天宇闫晓红李辉王宁
- 关键词:细胞增殖
- 猪BYSL基因克隆、序列特征及表达分析被引量:1
- 2011年
- BYSL基因是哺乳动物胚胎着床和胚胎发育的关键因子。为进一步研究猪BYSL基因的结构与功能,揭示其表达模式,本研究结合基因同源序列克隆技术和RT-PCR方法克隆了猪BYSL基因;利用生物信息学软件对该基因进行序列特征和结构分析;利用Real-time PCR技术分析了BYSL基因的时空表达模式。结果表明,猪的BYSL编码区全长为1 308 bp,共编码435个氨基酸;猪BYSL含有一个Bystin结构域;BYSL蛋白序列与人(90%)和牛(90%)BYSL的蛋白序列具有很高的相似度。组织表达模式研究发现,猪BYSL基因在卵巢和子宫组织中均有较高水平的表达;子宫组织发育表达模式研究发现,猪BYSL基因在性成熟前表达量逐渐升高,4月龄达到最大值。研究发现BYSL基因在哺乳动物中具有相似的生物学功能,猪BYSL基因在繁殖过程中也可能发挥重要作用。
- 牛步月闫晓红狄生伟王洋李海涛熊远著王希彪
- 关键词:克隆
- 鸡DLK1基因的生物信息学分析被引量:1
- 2011年
- DLK1基因是哺乳动物的一个印记基因,DLK1蛋白促进哺乳动物肌肉的生长发育,但抑制脂肪的生长发育。禽类不存在基因组印记现象,目前禽类DLK1基因的功能和调控机制还不清楚。本研究针对鸡等13种动物的DLK1蛋白进行了多序列比较分析、分子进化分析及糖基化分析,同时还比较了人、鼠及鸡的DLK1基因结构、基因同线性、启动子结构以及3′端非编码区结构。结果表明,尽管鸡和人DLK1基因的进化关系较远,但从mRNA拼接形式、基因结构、启动子结构等来看,与鼠相比,鸡和人的DLK1基因有较多相似之处。研究结果为下一步鸡DLK1基因的功能和调控研究提供了参考依据,同时,也为印迹基因的进化研究以及鸡的脂肪生长发育研究奠定了基础。
- 闫晓红王宁
- 关键词:生物信息学分子进化分析
- 鸡miR-17-92基因簇靶基因ZFPM2的鉴定及功能分析被引量:5
- 2017年
- miR-17-92基因簇在哺乳动物的许多生理和病理过程中发挥重要作用。本实验室前期研究发现,miR-17-92基因簇促进鸡前脂肪细胞的增殖,但其作用机制尚不清楚。为了揭示miR-17-92基因簇促进鸡前脂肪细胞增殖的作用机制,本研究采用CCK-8细胞增殖检测方法分析干扰ZFPM2对前脂肪细胞的影响,结果发现,干扰ZFPM2能显著促进鸡前脂肪细胞的增殖(P<0.01);与CCK-8分析结果相一致,干扰ZFPM2可致使细胞增殖标志基因PCNA、Ki67、Cyclin D1的mRNA表达量明显升高(P<0.01或P<0.05)。进一步对鸡ZFPM2基因进行生物信息学分析,发现该基因mRNA的3′UTR有两个区域存在miR-17-92基因簇4个成员(miR-17-5p、miR-20a、miR-19a及miR-19b)的潜在结合位点。为验证miR-17-92基因簇是否靶作用于鸡ZFPM2基因,构建了鸡ZFPM2基因3′UTR区的荧光素酶报告基因载体(野生型)(psi-CHECK2-ZFPM2-3′UTR-WT)及其突变型的荧光素酶报告基因载体(psi-CHECK2-ZFPM2-3′UTR-MUT)。报告基因活性分析显示,过表达mi-17-92基因簇能极显著地抑制野生型ZFPM2的报告基因活性(P<0.01);转染miR-17-5p、miR-20a及miR-19a的抑制剂均能显著地提高野生型ZFPM2报告基因的活性(P<0.01或P<0.05),但这些抑制剂对突变型ZFPM2报告基因的活性无明显影响。q RT-PCR分析发现,miR-17-5p、miR-19a及miR-20a的抑制剂能显著提高内源性ZFPM2基因mRNA的表达水平(P<0.01或P<0.05)。共转染分析发现,尽管差异不显著,但miR-17-5p和miR-19a的抑制剂均倾向于降低ZFPM2干扰片段的促细胞增殖作用。本研究结果表明:miR-17-92基因簇成员miR-17-5p、miR-20a、miR-19a及miR-19b靶作用于ZFPM2;miR-17-92基因簇至少部分通过抑制ZFPM2基因表达从而促进鸡前脂肪细胞的增殖。
- 张潇飞宋鹤刘静张文建闫晓红李辉王宁
- 关键词:细胞增殖
- 鸡miR-17-92基因簇宿主基因启动子的甲基化及其功能分析
- 2018年
- 为研究鸡脂肪组织miR-17-92基因簇宿主基因(MIR17HG)启动子的甲基化情况,实验以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,采用Sequenom MassARRAY法检测鸡腹部脂肪组织MIR17HG启动子区CpG岛的甲基化;利用CpG甲基转移酶处理MIR17HG启动子片段,采用报告基因技术检测DNA甲基化对MIR17HG启动子活性的影响。结果表明:高、低脂鸡脂肪组织中MIR17HG启动子区都存在一定程度的甲基化,其中2周龄低脂鸡脂肪组织MIR17HG启动子区的整体甲基化程度显著高于高脂鸡(P<0.05),4个CpG位点(25、26、27、28)的甲基化在高、低脂鸡脂肪组织间差异均显著(P<0.05);3周龄高、低脂鸡脂肪组织中MIR17HG启动子区的甲基化程度无显著差异(P>0.05);7周龄低脂鸡脂肪组织MIR17HG启动子的2个CpG位点(41和42)的甲基化程度显著低于高脂鸡(P<0.05)。总体看,高、低脂鸡脂肪组织MIR17HG的启动子甲基化随年龄增长呈下降趋势;体外甲基化分析发现,DNA甲基化抑制MIR17HG启动子活性。
- 邢天宇崔婷婷黄佳新闫晓红李辉王宁
- 关键词:启动子DNA甲基化
- 脂肪分泌组学的研究进展被引量:3
- 2021年
- 分泌蛋白是由细胞主动运输到细胞外的一大类具有重要生物学功能的蛋白,主要参与细胞信号转导、细胞的增殖、分化及凋亡等多种生物学过程。细胞、组织、器官及个体分泌的所有蛋白称为分泌组。脂肪组织曾被认为只是机体内能量储藏的地方,但现在发现它还是体内最大的内分泌器官。近年来,由于蛋白质组学技术的快速发展,脂肪分泌组研究已成为脂肪生物学、肥胖症及其相关疾病研究的热点之一。本文概述了脂肪分泌组学研究的主要策略和方法,重点介绍了脂肪组织间充质干细胞、前脂肪细胞、脂肪细胞以及三类脂肪组织的分泌组研究进展,分析了目前脂肪分泌组学研究中存在的问题,并提出了未来脂肪分泌组学的研究方向。
- 闫晓红王宁
- 关键词:脂肪组织蛋白质组生物信息学脂肪细胞因子
- 一种预示和鉴定绵羊羊毛长度的分子标记方法
- 一种预示和鉴定绵羊羊毛长度的分子标记方法,它涉及一种分子标记方法。方法:一、提取绵羊基因组DNA,设计引物,进行PCR扩增,然后酶切,得酶切产物;二、酶切产物电泳分离,根据电泳分离结果进行基因型判定;三、进行关联分析,并...
- 王宁荣恩光闫晓红乔书培王宇祥杨华李辉
- 文献传递
- 脂肪细胞分化辅助调节因子的研究进展被引量:1
- 2009年
- 辅助调节因子是一类重要的反式作用因子,其虽不能与DNA结合,但可以直接或间接与转录因子作用,从而调节基因转录。近年来的研究表明,辅助调节因子在脂肪细胞分化过程中发挥重要的调控作用。本文对脂肪细胞分化辅助调节因子(辅助共激活因子和辅助共抑制因子)的新近研究进展予以综述。
- 王宁闫晓红
- 关键词:脂肪细胞分化