金成艳
- 作品数:7 被引量:10H指数:2
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- 发文基金:黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
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- SHP-2在三氧化二砷诱导HEK293T细胞凋亡中的作用被引量:3
- 2009年
- 目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在三氧化二砷(As2O3)诱导HEK293T细胞凋亡中的作用。方法将pIRES-GFP空载体、pIRES-GFP-SHP-2野生型和pIRES-GFP-SHP-2C459S突变体载体通过磷酸钙方法转染HEK293T细胞;在5μmol.L-1的As2O3孵育48 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot方法检测Cyt-C、Caspase-3、p-ERK、ERK、p-JNK及JNK的表达变化。结果5μmol.L-1As2O3可诱导HEK293T细胞凋亡,SHP-2能抑制其作用;SHP-2C459S突变体组Cyt-C和Caspase-3表达均高于空载体组,SHP-2野生型组则低于空载体组;SHP-2野生型组p-ERK表达高于空载体组,SHP-2C459S突变体组则相反;p-JNK的表达,SHP-2C459S突变体组高于空载体组,而SHP-2野生型组低于空载体组。结论SHP-2可抑制As2O3诱导的HEK293T细胞凋亡,其机制可能与激活ERK和抑制JNK途径有关。
- 司云凤祝晓春孙东升齐琦王果元金成艳王丽娜徐长庆田野张力
- 关键词:三氧化二砷细胞凋亡JNK细胞信号转导
- 过表达Shp-2通过Erk减轻心肌细胞凋亡
- 王果元金成艳徐长庆田野张力
- SHP-2^(C459/S)突变体在三氧化二砷诱导的HEK293T细胞凋亡中的作用
- 2009年
- 目的观察三氧化二砷(As2O3)对293T细胞凋亡和增殖的影响并探讨SHP-2在其中的作用。方法显性负性SHP-2突变体SHP-2C459/S与具有绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP-C1共转染入HEK293T细胞,Ho-echst33258染色检测细胞凋亡,细胞计数及荧光分光光度法检测细胞增殖。结果SHP-2C459/S突变体能增强细胞凋亡和减轻增殖抑制。结论SHP-2可能参与到As2O3诱导的细胞凋亡和增殖抑制的信号转导通路中。
- 董红岩司云凤孙东升祝晓春齐琦王果元金成艳王丽娜李全凤赵雅君田野徐长庆张力
- 关键词:SHP-2三氧化二砷凋亡
- 过表达SHP-2可以减轻心肌细胞的凋亡
- 目的:探讨SHP-2在去血清诱导心肌细胞凋亡中的作用。并在HEK293细胞内扩增Ad-GFP,包装Ad-GFP-SHP-2,Ad-GFP-SHP-2E76A重组腺病毒。
方法:采用能够去除内毒素的小量质粒抽提盒分别...
- 金成艳
- 关键词:心肌细胞动物模型SHP-2腺病毒
- SHP-2重组腺病毒的包装及对心肌细胞的感染被引量:2
- 2010年
- 目的采用HEK293细胞包装Ad-GFP-SHP-2和Ad-GFP-SHP-2-E76A并扩增Ad-GFP重组腺病毒并感染乳鼠心肌细胞。方法纯化两种载体;PacⅠ酶切线性化;线性化的载体转染入HEK293细胞进行包装;从病变的HEK293细胞分离重组腺病毒。利用重组的腺病毒感染乳鼠心肌细胞,并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。结果 PacⅠ酶切后,琼脂糖凝胶上显示有4.5 kb的条带;转染线性化的重组腺病毒载体入HEK293细胞中,反复冻融HEK293,其上清中含有重组腺病毒,当感染乳鼠心肌细胞感染复数为100时,感染效率大于90%。结论成功包装重组腺病毒,包装后的腺病毒可高效感染乳鼠心肌细胞。
- 张力李全凤李弘王丽娜金成艳董红岩王秀丽张丽景王果元徐长庆田野
- 关键词:SHP-2重组腺病毒心肌细胞
- 蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2减弱心肌细胞凋亡
- 目的成年心肌细胞为终末分化细胞,不能通过分裂增殖。细胞凋亡作为细胞死亡的一种形式伴随着心脏疾病的终末阶段,可使细胞数量减少,进而影响心脏功能。因而,揭示心肌细胞凋亡的机制有望为阻断心肌细胞的死亡提供理论思路。方法本研究采...
- 王果元金成艳张丽景吴博李全凤徐长庆田野张力
- 关键词:心肌细胞
- 文献传递
- 蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞增殖的影响被引量:6
- 2012年
- 目的:探讨含有Src同源结构域2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology 2 domain-containing pro-tein tyrosine phosphatase 2,SHP-2)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激的心肌成纤维细胞(cardiac fi-broblasts,CFs)增殖的作用。方法:差速贴壁法体外培养心肌成纤维细胞,以波形蛋白(vimentin)鉴定CFs纯度;MTT法检测AngⅡ作用下心肌成纤维细胞增殖率,采用重组腺病毒过表达SHP-2和SHP-2抑制剂NSC-87877分别对AngⅡ作用下的细胞增殖的影响。结果:AngⅡ对CFs增殖的促进作用有剂量依赖性,其促进细胞增殖的最高浓度为10-7mol/L;在AngⅡ的刺激下,SHP-2可以促进心肌成纤维细胞增殖,并且突变体组比野生型组增殖更明显(P<0.01)。SHP-2抑制剂NSC-87877达到50μmol/L时可以明显抑制AngⅡ刺激下的CFs增殖。结论:AngⅡ的促CFs增殖作用是通过SHP-2调控的。
- 张丽景金成艳王果元吴博李全凤徐长庆田野张力
- 关键词:心肌成纤维细胞细胞增殖