邹毅辉 作品数:5 被引量:11 H指数:2 供职机构: 石河子大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
中国美利奴细毛羊BAC文库的三维PCR筛选 被引量:5 2008年 本研究利用中国美利奴细毛羊全基因组BAC文库,构建了可供快速筛选的两级水平的混合池,一级混合池和二级混合池(Primary pools and secondary pools)。一级混合池基于每一384-well盘而构建,由盘、行、列三维混合池组成,二级混合池基于整个BAC文库而构建。设计了一种基于PCR技术的快速筛选方法,先筛选二级混合池,再根据结果筛选相应的一级混合池。利用此方法只需一步共66个PCR反应即可从BAC文库中7.4万个克隆中筛选出1个阳性克隆,或三步100个以内的PCR反应筛选出多个阳性克隆。以绵羊基因组多态性分子标记BF94-1为引物,用一步共66个PCR反应成功筛选到1个阳性克隆373D13。 吴新东 陈芳 李鑫 邹毅辉 邱巍 高剑峰关键词:绵羊 绵羊MHC classⅠ区段基因组成初步分析 绵羊是许多国家的国民经济中占有重要地位的家畜之一,拥有许多重要的可遗传的经济性状,同时也是重要的模式动物之一。但是,目前我们对绵羊的基因组信息知之甚少。研究绵羊MHC classⅠ区段基因组成旨在寻找并研究与重要经济性状... 邹毅辉关键词:绵羊养殖 杂交筛选 基因测序 基因文库 文献传递 中国美利奴羊外周免疫器官cDNA文库的构建及鉴定 被引量:6 2010年 为了筛选中国美利奴羊与免疫反应相关的的功能基因并研究这些基因的功能,构建了以美利奴羊外周免疫器官的cDNA文库。通过提取总RNA,分离纯化mRNA并以其为模版参照ZAP Express cDNA Synthesis Kit说明书构建cDNA文库。结果表明:该文库初级库容达到了3.28×105pfu,扩增库滴度为3.8×108pfu/mL,重组率为97.7%。插入片段介于0.5至2.3 kb之间,平均大小为1.5 kb。该文库的成功构建为后续研究奠定了分子基础。 李鑫 邹毅辉 杨晓亮 李桂芳 李峰 陈芳 石国庆 高剑峰关键词:中国美利奴羊 CDNA文库 中国美利奴羊MHC class Ⅰ区段基因组成预测分析 2010年 为了准确筛选中国美利奴羊MHC classⅠ区段,试验采用GenScan软件对覆盖绵羊MHC classⅠ区段的11个BAC克隆测序结果进行预测,在GenBank数据库中BlastX比对分析预测的基因,获得的信息在KEGG数据库中进行基因注释。结果表明:覆盖绵羊MHC classⅠ区段的11个BAC克隆共预测出基因数123个,其中编码抗体基因19个,占预测基因总数的15%;其他基因65个,占53%;未知基因39个,占32%;并明确了预测基因在BAC克隆上的分布情况及其编码的多肽可能具有的生物学功能。 薛峰 李峰 邹毅辉 李鑫 陈芳 高剑峰关键词:MHC 基因 基因注释 绵羊MHC区段BAC克隆探针的制备 被引量:1 2010年 为了摸索适用于高通量核酸杂交筛选的探针的制备方法,采用GeneQuest软件分析并选取限制性内切酶BseDⅠ酶切MHC区段BAC克隆374N21,对酶切产物32P末端标记,并采用Omega E.Z.N.A DNA Probe Purifi-cation Kit纯化后放射自显影检测的方法。结果显示:酶切结果与软件分析一致,纯化后探针分布为0.5~2.0kb,纯化回收效率为60%。探针的分布合理,质量较高,可满足高通量杂交筛选的需要。 邹毅辉 李鑫 李峰 薛峰 陈芳 高剑峰关键词:绵羊 MHC DNA探针