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连正兴: 作品数：188 被引量：543H指数：13; 供职机构：中国农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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一种通过抑制FOSL1表达和活性促进绵羊骨骼肌卫星细胞成肌分化的方法与应用: 本发明公开了一种通过抑制FOSL1表达和活性促进绵羊骨骼肌卫星细胞成肌分化的方法与应用。本发明提供了抑制FOSL1基因表达的物质在如下任一中的应用：促进人或动物骨骼肌卫星细胞成肌分化；促进人或动物骨骼肌卫星细胞向肌管细胞...; 连正兴陈明明赵越于坤李岩

沉默羊传染性脓疱皮炎病毒DNA聚合酶基因的RNAi载体的构建: 2012年; 为了构建用于沉默羊传染性脓疱皮炎病毒(Orf virus,ORFV)DNA聚合酶基因的2种载体,试验选择病毒复制所必需的DNA聚合酶基因作为干扰靶基因,并设计靶基因的扩增引物,经PCR扩增后测序;随后,与Check2载体分别经PmeⅠ和NotⅠ双酶切,酶切后连接产生Check2-靶基因(Check2-D)重组质粒;然后,利用公用网站按照RNAi序列设计的原则,设计RNAi靶点序列并合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经XhoⅠ和HpaⅠ酶切后的pll3.7载体连接产生pll3.7-shRNA质粒;最后,利用磷酸钙法进行pll3.7-shRNA质粒和Check2-D质粒共转染293T细胞,利用双荧光检测系统试剂盒检测其RNA干扰效果。结果表明:成功构建了pll3.7-shRNA质粒和Check2-靶基因重组质粒,干扰效果最好,可达到91.0%。; 李姗姗潘求真崔玉东连正兴; 关键词：DNA聚合酶基因 RNA干扰

高光谱漫反射无损检测鸡蛋受精状态: 2022年; 种鸡蛋孵化期间受精状态的检测需要消耗大量人力、物力,并且孵化期间的种鸡蛋不能保证均为健康蛋,需要能够在孵化早期将无精蛋和死精蛋快速准确挑选出来达到降低生产成本的目的。以白来航鸡蛋为研究对象,采用高光谱分选仪批量采集受精、未受精、死精三类鸡蛋共119枚在382~1026 nm范围内的高光谱数据,其中受精蛋采集孵化3,5,7,9,11,13和15 d的数据,并通过黑白校正方法对原始光谱图做校正处理,得到其漫反射率,经过实验对比以及根据实际生产需要,受精蛋选用孵化3和5 d的光谱数据作为建模数据。同时提出了一种将光谱数据转换为图像数据的方法,在最大化保证光谱原始数据的前提下达到了光谱向量数据可视化的效果,可以有效与深度学习图像识别算法相结合。采用连续投影算法(SPA)、竞争性自适应重加权算法(CARS)对光谱波段进行筛选,建立基于全波段、CARS筛选的特征波长、SPA筛选的特征波长与SVM、RandomForest算法与AlexNet、MobileNet网络的判别模型,其中AlexNet-5dFull Wave Bands准确率最高为93.22%。与通过不同特征波长算法筛选出的数据实验结果对比发现,经过SPA算法筛选后的特征波长的建模效果相比于CARS效果更好,其中SVM-SPA3d模型准确率为91.52%,RandomForest-SPA3d模型的准确率为89.83%,AlexNet-SPA3d模型的准确率为89.83%,表明经过SPA筛选后的特征波长能够保存更多关于种蛋信息差异的有效信息。研究结果表明,利用高光谱分选仪对批量种蛋进行漫反射光谱采集,并将黑白校正后的原始光谱漫反射率数据转换为图像数据,将转换后的图像数据利用深度学习图像识别算法对鸡蛋的受精状态进行准确、无损鉴别是可行的,为后续相关自动化的批量检测提供了技术支持。; 崔德建柳洋洋夏元天贾伟娥连正兴李林; 关键词：受精蛋

一种监测具有单核细胞的动物的抗病性的方法: 本发明公开了一种监测具有单核细胞的动物的抗病性的方法。本发明所提供的监测具有单核细胞的动物的抗病性的方法，是检测动物的下述单核细胞活性中的一种或几种：吞噬性，细胞毒性，黏附性和溶酶体活性；所述几种指两种或三种或四种。本发...; 连正兴孙书锋李宁; 文献传递

一种提高鸡骨骼肌成肌细胞分化能力的制剂及其应用: 本发明公开了一种提高鸡骨骼肌成肌细胞分化能力的制剂及其应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的制剂是由肌源成纤维细胞提取物、丙酮酸盐和钙盐组成。其中，肌源成纤维细胞提取物是鸡肌源成纤维细胞经超声波裂解后，分离得到小于1...; 张宇李海刘忠华连正兴; 文献传递

鸡类囊胚获得及其生物学特性研究被引量：5: 2005年; 鸡胚是研究胚胎发育、组织分化、基因表达与调控良好的实验模型, 是动物功能基因组学研究的重要材料. 实验选取白来航蛋鸡所产新鲜种蛋, 采用纸环法收集胚盘, 机械打碎后进行悬浮培养, 获得了哺乳动物囊胚样结构, 命名为类囊胚. 体外培养12～24 h是类囊胚发育的高峰期, 其直径显著增加近1倍. FBS可促进类囊胚的发育, 而卵黄在12 h前对类囊胚发育没有明显影响, 但到24 h时可促进类囊胚的贴壁生长. 经碱性磷酸酶(AKP)染色初步显示类囊胚中含有大量碱性磷酸酶活性的胚胎干细胞, 胚胎干细胞特异性表面标志SSEA-1免疫荧光染色后呈阳性, 进一步肯定了类囊胚中ES细胞的存在, 最终从贴壁类囊胚中分化出神经样和成纤维样等多种类型细胞. 由此可以得出: 悬浮培养鸡胚盘细胞可以形成含有胚胎干细胞的、类似哺乳动物囊胚样的结构, 并能保持其内胚胎干细胞的特性和分化潜能.; 李佳潘求真李俊英韩红兵孙书锋杨君徐曙光田亮连正兴杨宁李宁; 关键词：基因表达与调控鸡类细胞特异性组织分化 ES细胞分化潜能

绵羊和山羊抑肌素基因的基因组结构和序列分析被引量：10: 2003年; 提取文登奶山羊和多赛特绵羊的基因组DNA,依据绵羊、奶牛、猪的抑肌素基因外显子区序列同源性设计并合成PCR引物进行扩增,将所获得的DNA片段克隆进行序列测定,绵羊和山羊内含子Ⅰ的序列同源性为98.2％,内含子Ⅱ的序列同源性为98％,内含子Ⅱ中的重复序列明显多于内含子Ⅰ。DNA序列的聚类分析结果与生物进化过程吻合,说明内含子Ⅱ的复杂程度高于内含子Ⅰ,且进化保守性很强,所测定的序列已在GenBank登录。; 潘求真陈慧勇连正兴李宁吴常信; 关键词：绵羊基因组结构内含子外显子生长转化因子 PCR方法

绵羊IL-6启动子的克隆及pIL6-TLR4载体构建被引量：2: 2017年; 为生产抗病转基因绵羊,并确保转基因羊的安全性。克隆绵羊IL-6启动子序列,以IL-6为启动子构建TLR4过表达载体,转染绵羊成纤维细胞验证功能。用1μg·L-1的LPS刺激转染后的绵羊成纤维细胞,利用q PCR技术和ELISA方法检测受LPS刺激后的成纤维细胞TLR4 m RNA表达量和TLR4蛋白表达量。结果表明,转染后的TLR4 m RNA表达量在2、4、24、48 h显著高于对照组(P<0.05),其中2、4、24 h极显著高于对照组(P<0.01),TLR4蛋白表达量始终高于对照组。说明p IL6-TLR4过表达载体构建成功。; 宗炎阚童童潘求真王静宜连正兴; 关键词：转基因绵羊

一种动物饲喂添加剂以及动物的饲喂方法: 本发明涉及畜牧及动物饲养领域，具体公开了一种动物饲喂添加剂，所述添加剂基于每千克体重每日摄入量计，含有0.05～1.58g的α‑酮戊二酸。本发明还涉及一种动物的饲喂方法，该方法以每日每千克体重摄入0.05～1.58g的α...; 刘国世何长久张珍珍连正兴王静朱宽峰; 文献传递

藏灵菇嗜热链球菌胞外多糖对人结肠癌细胞的增殖抑制被引量：13: 2008年; 探讨从藏灵菇中筛选的嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)所产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对人结肠癌HCT-8细胞增殖的影响。采用CCK-8法测定EPS对HCT-8细胞生长的抑制率;形态学观察EPS对HCT-8细胞的杀伤作用;流式细胞术检测EPS对HCT-8细胞周期的影响。结果显示:EPS对HCT-8细胞增殖有明显的抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;倒置显微镜下观察部分细胞脱壁、核碎裂、固缩,细胞悬浮坏死;细胞周期分析显示G1期细胞百分率增大。说明EPS通过直接杀伤人结肠癌HCT-8细胞,使细胞周期阻滞于G1期而抑制细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用。; 马杉姗王世平连正兴韩红兵刘慧; 关键词：嗜热链球菌胞外多糖人结肠癌细胞增殖抑制细胞周期

连正兴

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