赵淑珍
- 作品数：10 被引量：114H指数：5
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：云南省烟草公司项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 人乙肝病毒表面抗原基因在转基因烟草中的表达被引量：32
- 1993年
- 本文报道了将乙型肝炎病毒(adw亚型)表面抗原基因导入植物中并得到了表达。将人乙型肝炎病毒(adw亚型)表面抗原(HBs Ag)基因插入植物双元载体pRoK Ⅱ的CaMV 35S启动子下游,构建重组质粒pRoK Ⅱ-HBs ag,将此质粒导入农杆菌LBA4404中,利用农杆菌感染叶盘的方法转化烟G-140品种,得到了抗卡那霉素的转化植株,并进一步获得了后代植株。酶联免疫分析表明转化植株及其后代均能产生具免疫活性的HBs Ag;免疫吸附电镜观察表明,转化植株产生的HBS Ag呈典型的直径为22 nm的颗粒。本文显示了用植物廉价生产HBs Ag的可能性。
- 刘玉乐王晋芳邱并生赵淑珍田波
- 关键词：表面抗原转基因烟草乙型肝炎病毒
- 通过基因工程获得高抗黄瓜花叶病毒的NC89植株
- 1993年
- 将黄瓜花叶病毒(CMV)的卫星RNA 基因和外壳蛋白(CP)基因同时插入植物表达载体 ROKII 质粒,构成嵌合基因表达盒,通过叶盘转化法导入 NC89单倍体植株,对转化植株进行了 CMV 人工攻毒试验,结果表明,其 CMV 抗性较对照 NC89有明显提高,其中约10%在攻毒90天后病级仍低于2级,个别株完全不发病。
- 吴中心张同庆姚根怀梁洪敏赵淑珍赵丰田波谢德平张仁义
- 关键词：基因工程黄瓜花叶病毒
- 由卫星互补DNA单体和双体基因构建的抗黄瓜花叶病毒的转基因番茄被引量：32
- 1990年
- 本研究是用卫星cDNA单体和双体基因获得抗黄瓜花叶病毒的转基因番茄。将单体和双体基因组建植物基因载体ROK2,通过三菌结合把基因引入根癌脓杆菌并感染转化番茄获得再生转基因植株。接种攻毒试验表明,卫星cDNA转基因番茄能够干扰病毒的复制,减轻症状程度表现出对CMV的显著抗病性,经过三代检测选育也获得单株纯化的转基因植物株系。初步的田间实验证明,转基因植株在自然条件下,也表现出对CMV的抗病性,表现了良好的生产潜力,为解决我国番茄等作物的病毒病开辟了新的途径。
- 赵淑珍王昕王革娇张秀华张春霞杨希才徐雷新刘怡之田波
- 关键词：转基因番茄黄瓜花叶病毒
- 新疆大麦条纹花叶病毒的研究 Ⅱ.病毒核酸cDAN的合成及克隆被引量：1
- 1985年
- 本文采用改进的新技术从大麦条纹花叶病毒核酸合成互补脱氧核糖核酸,重组质粒及选择特异性克隆。由于技术的改进,简化了操作程序,提高了工作效率。我们以大麦条纹花叶病毒三个组分核酸混合物为模板,寡(dT)8为引物,合成cDNA第一条链,用Gubler和Hoffman缺口翻译法合成第二条链,采用加HindⅢ人工接头的方法将cDNA插入pUC 9质粒载体上,于大肠杆菌JM-103中进行克隆,并以克隆颜色变化表示有无β-半乳糖苷酶活性的直观法,选择含有外源DNA的克隆。再以克隆原位分子杂交法检查克隆对病毒RNA各组分的特异性。仅对RNA_1或RNA_2有特异性的克隆,分别称为pBV_1和pBV_2,另有相当数量的克隆既与RNA_2也与RNA_3杂交,所以称为pBV2+3。用HindⅢ内切酶对一部分RNA_3杂交阳性的PBV2+3进行分析表明,插入的外源基因长度在500～1,000碱基对之间。文中讨论了RNA_2与RNA_3存在同源的可能性。
- 吴世宣孙祖同蔡文启赵淑珍莽克强
- 关键词：大麦条纹花叶病毒重组DNA分子克隆
- 抗烟草花叶病毒（TMV）转基因烟草的初步选育
- 1995年
- 抗烟草花叶病毒（ＴＭＶ）转基因烟草的初步选育ＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＹｕｎｎａｎＣｏｍｍｅｒｃｉａｌＴｏｂａｃｃｏＣｕｌｔｉｖａｒｗｉｔｈＴＭＶ５４ｋＤｇｅｎｅａｎｄＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＰｌａｎｔｓｔｏＴ...
- 吕华飞何云昆张仲凯赵淑珍王苏燕
- 关键词：烟草花叶病毒转基因烟草抗病性抗性育种
- 由卫星互补DNA单体构建的抗黄瓜花叶病毒的烟草基因工程植株被引量：19
- 1989年
- 本文将合成的卫星RNA-1的全长cDNA单体重组到含CaMV-35S启动子的植物表达载体ROK_2上,并将此重组质粒转入含Ti质粒的根癌杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中,用以感染我国推广烟草品种G-140的叶圆片并再生成植株。经CMV强毒分离物接种后,大部分转化植株有大量卫星RNA表达,并表现出症状的减轻。第二代转基因植物仍保持大量卫星RNA的表达及对CMV的抗性并出现基本符合孟德尔遗传规律的分离。经分离和选育我们可得到纯化的抗病毒品种。
- 吴世宣赵淑珍王革娇杨希才张春霞王昕田波
- 关键词：卫星RND黄瓜花叶病毒烟草
- 转基因油菜中核酶介导的对花椰菜花叶病毒的高度抗病性被引量：13
- 1997年
- 设计了特异切割花椰菜花叶病毒(CaMV,ds DNA病毒)35S RNA的锤头型核酶基因(Rz);同时将核酶保守区内的一个G碱基以U代替构成核酶突变体(mRz)作为对照.体外切割实验表明.Rz可按设计要求高效特异地切割355 RNA,而mRz则完全没有切割活性.将Rz和mRz克隆到pROK2构建成植物表达载体pROK2-Rz和pROK2-mRz.采用转化下胚轴法转化油菜,通过筛选获得转Rz和mRz基因油菜植株、攻毒实验证明Rz当代转化植株表现出对CaMV的高度抗病性,75%的植株不表现任何症状,也测不出CaMV的存在,其抗病植株的T_1后代的抗病性按孟德尔定律3:1分离.mRz当代转化植株及其T_1后代植株只具有极其微弱的减轻症状的作用.
- 王苏燕叶寅赵淑珍田波
- 关键词：油菜转基因油菜花椰菜花叶病毒抗病性
- 烤烟栽培品种G－28、K326抗病毒遗传转化的研究被引量：2
- 1994年
- 用携带植物抗病毒基因表达载体ｐＥＣ２３和ｐＲＣＰⅠ的农杆菌转化云南烤烟栽培品种Ｇ－２８和Ｋ３２６，获得了大量转基因植株，载体质粒ｐＥＣ２３上有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）和ＣａＭＶ３５ｓ启动子控制的烟草花叶病毒（ＴＭＶ）５４ＫＤ蛋白基因，ｐＲＣＰⅠ上则有卡那霉素抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）外壳蛋白基因、ＣＭＶ卫星ＲＮＡ基因，品种Ｇ－２８、Ｋ３２６的叶片与携带载体质粒的农杆菌共培养后，将其按品种分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ＋２．０ｍｇｌ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／ｌＫＴ培养基上培养筛选，２～３周后分化出芽，切下小芽分别转移到含６０μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌＫｍ的ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＮＡＡ的培养基上进一步筛选并使转化体生根，再对生根植株叶片进行抗性鉴定，结果表明，至少Ｋｍ抗性标记基因（ＮＰＴⅡ）已转入烤烟植株。
- 吕华飞何云昆赵淑珍王苏燕叶寅张仲凯田波
- 关键词：烟草烤烟抗病性
- 异源单克隆和多克隆抗体在检测无病毒唐菖蒲试管苗中的应用
- 1989年
- 利用异源的单克隆抗体和多克隆抗体通过间接酶联免疫吸附试验,检测了深圳唐菖蒲的叶组织、块茎和试管苗中的病毒。单克隆抗体检测效果优于多克隆抗体,并与电镜观察结果相符。在间接酶联免疫吸附试验中,同源多克隆抗体对烟草花叶病毒(TMV)检测的灵敏度比侵染性试验高30倍。同时对该方法在大规模检测其它无病毒试管苗中的重要性和可行性进行了讨论。
- 蔡文启徐绍华赵淑珍莽克强黄鸿枢陈维云杨燕仪朱爱芳
- 关键词：多克隆抗体唐菖蒲
- 水稻条纹叶枯病毒外壳蛋白基因在工程水稻植株中的表达被引量：21
- 1992年
- 水稻条纹叶枯病是以灰飞虱(Laodelphax striatellus)为传播介体的间歇性水稻病毒流行病害,流行年份造成水稻生产严重损失。在对该病病原水稻条纹叶枯病毒(RSV)外壳蛋白进行了氨基酸组成、cDNA合成、克隆、产物表达和全序列分析基础上,将RSV外壳蛋白基因插入植物表达载体pROK Ⅱ,用基因枪法转化水稻悬浮细胞系。轰击前将分散性好的胚性细胞团均匀地铺在含有滤纸的平皿上。用CaCl_2和亚精胺将质粒DNA包裹于平均直径为1.09μm的钨粉上。将钨粉滴在子弹前部凹穴中,在-0.095 MPa真空度的条件下击发。在存在G418条件下,两个月后可从褐化培养物中筛选出一些抗性细胞团。将其转入分化培养基后分化出绿苗。用Southern杂交法测定了由抗性细胞团再生的10株水稻苗,其中有2株出现了分子量与CP基因对应的杂交带。Western测定的结果显示,在转化植株中有CP基因的表达。
- 燕义唐王晋芳邱并生何雪梅赵淑珍王小凤田波
- 关键词：水稻病毒外壳蛋白基因表达
