赵丽萍
- 作品数：17 被引量：63H指数：5
- 供职机构：香港大学更多>>
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- 鼠顶盖提取液30kD蛋白分子对培养视网膜神经节细胞的影响被引量：8
- 1991年
- 本文以MTT微量比色法测定在视网膜神经细胞的培养中,含Te,10—30kD和≥30kD蛋白质3组的细胞活性均比无Te的对照组高2—4倍.以预先用辣根过氧化物酶(HRP)逆行标记视网膜神经节细胞(RGC)的神经细胞培养在Te PhastGel上,显示生长在30kD蛋白带上的大细胞(>18μm)都是HRP阳性的RGC.以视网膜组织块与含30kD蛋白凝胶近距培养,可见许多突起,单细胞和小块组织朝30kD凝胶伸延或迁移.它们都是神经特异性烯醇酶和Thy1.1免疫标记阳性的RGC.结论:30kD蛋白是RGC特异性的诱向因子.
- 周明华赵丽萍任麟孙
- 关键词：视网膜神经节细胞
- 全文增补中
- 酶消化的人羊膜基膜对鸡胚前脑神经细胞生长的影响被引量：1
- 1990年
- 本研究采用肝素酶Ⅰ、Ⅱ、胶原酶和软骨素酶ABC消化的人羊膜基膜(HABM)作为支持物,研究对前脑神经细胞的生长支持作用。包被HABM的24孔培养板,首先用酶37℃消化1小时,然后以RPMI1640加6％小牛血清(含20mmol/L HEPES)作为培养液,培养神经细胞20小时,以微量自动比色法定量神经细胞的生长。微量自动比色法是利用四唑盐(MTT)可被活细胞吸收并转变成甲(?)产物的原理,以ELISA仪测光密度(OD)值,以显示活细胞数量。结果表明,肝素酶Ⅰ、胶原酶和软骨素酶ABC明显减少HABM上神经细胞的粘附,而肝素酶Ⅱ明显增加HABM上神经细胞的粘附,并促进神经细胞的生长和存活。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：神经细胞酶消化
- 神经细胞诱向(营养)因子被引量：5
- 1990年
- 神经营养因子(neurotrophic factors, NFs)是靶组织产生的一种特异蛋白分子,有促进和维持神经细胞的生存、生长、分化和执行功能的作用,但不刺激细胞分裂。虽然不同的作者用过不同的名称(如Patterson称为指令因子instructive factor),但是他们对其生物效应的结论是一致的。在NFs中,有的NF只管理特定神经细胞特定显型的表达,如专门或主要使培养神经细胞突起伸长的因子,对这种促进分化的因子特称为突起伸长因子(neurite extension factor, NEF);有的NF主要促进神经细胞存活。
- 周明华吴玺印赵丽萍任峰任麟孙
- 关键词：神经细胞
- RGNTF单抗与多抗的特性和抑制作用(简报)被引量：1
- 1991年
- 继本实验室周明华等新近发现顶盖提取液(Te)中,有视网膜神经节细胞诱向因子(RGNTF)之后。
- 周明华任峰赵丽萍邱鹏新
- 关键词：单克隆抗体多克隆抗体
- 视网膜神经节细胞的纯化和体外存活被引量：3
- 1991年
- 我们用特异性抗体Thy1.1结合尼龙筛方法分离和纯化新生大鼠视网膜神经节细胞,比较顶盖提取液对这些纯化细胞的作用。预先以快蓝(fast blue,FB)逆行标记的视网膜细胞悬液,接种在包被了Thy1.1抗体的培养皿上30分钟,冲洗未粘附的细胞,显微镜下计数粘附细胞中FB标记的视网膜神经节细胞纯度的百分比,最高为95%。用孔径15μm尼龙筛方法分离的纯度仅为60±5%。上述两种方法纯化的视网膜神经节细胞,仅在有顶盖提取液存在时,细胞存活并生长活跃,胞体大且有突起伸出。MTT微量比色法测定培养24小时纯化细胞存活的光密度(OD)值,显示以Thy1.1特异性抗体纯化的细胞,其OD值比值(+Te/-Te)是12.3(0.111/0.009);以尼龙筛纯化的OD值比值(+Te/-Te)是6.4(0.102/0.016);未经纯化的OD值比值(+Te/-Te)是3.8(0.095/0.025)。在上述三组中,加Te与无Te细胞生存的OD值比较,相差均非常显著(P<0.01)。结论:在纯化的视网膜神经节细胞的培养中,由于排除了其他细胞所引起的非特异性反应,神经节细胞能够更直接地反映顶盖提取液的生物效应;视网膜神经节细胞纯度越高,其作用越显著。
- 赵丽萍周明华
- 关键词：视网膜神经节细胞纯化
- 对新生大鼠视觉各结构细胞之间相互作用的体外培养研究被引量：2
- 1990年
- 本实验采用分离细胞体外培养和MTT微量比色法,观察了新生大鼠视网膜(R)、顶盖浅灰质(T)、间脑后外侧部(G)和枕叶皮质(C)等细胞体外培养生长的相互影响。培养3天后,MTT微量比色法测定发现:分别取自视觉系统两个部分的混合细胞培养,除G+C和T+G生长不活跃外,其余的混合培养均比单独培养的细胞生长明显活跃(高1.3～3倍不等)。其中R+T和R+G生长最为活跃,其次为R+C和T+C。另外T的条件培养液(Tc)可使R细胞生长活跃3倍,使G细胞生长活跃2倍。R的条件培养液(Rc)增强G和C细胞生长活性分别为1.3倍和2倍。以上的实验表明,T和R的条件培养液中,可能有神经诱向因子存在。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：视网膜细胞体外培养
- 人羊膜基膜对腹腔巨噬细胞、CCLM24黑色素瘤细胞和神经细胞生长的影响
- 1989年
- 本文采用人羊膜基膜(HABM)做为腹腔巨噬细胞、CCLM24黑色素瘤细胞和神经细胞生长的支持物,MTT定量法测定这三种细胞在HABM上的生长。发现CCLM 24黑色素瘤细胞在HABM上生长最为活跃,神经细胞次之,而巨噬细胞生长受到抑制。HABM经肝素酶Ⅰ、Ⅱ消化后,CCLM 24细胞生长更加活跃。胶原酶和软骨素酶ABC消化后其生长活性降低25％和30％。神经细胞在肝素晦Ⅰ消化的HABM上生长活跃,而其余酶消化的HABM均使神经细胞生长活性降低。提示不同的细胞在HABM上的生长性质不同。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：羊膜细胞生长
- 酶消化后人羊膜基膜超微结构的观察
- 1990年
- 本研究通过对几种酶消化后人羊膜基膜(HABM)超微结构改变的观察,发现肝素酶Ⅱ可使HABM表层呈微绒毛状改变,并使基膜致密层和透明层变薄及小空洞等改变。推测肝素酶Ⅱ消化后的HABM,可使表面积相对增加,细胞易于附着。肝素酶Ⅱ的作用,主要是使HABM表面的硫酸乙酰肝素降解,使其内的基板蛋白暴露出神经细胞附着和生长位点,从而能使神经细胞的生长增加150％。而肝素酶Ⅰ、胶原酶Ⅰ和硫酸软骨素酶AC消化后的HABM,失去了支持神经细胞附着和生长的各种因素,结果使神经细胞的生长下降。本文从形态学的角度,支持经肝素酶Ⅱ消化后的HABM是神经细胞粘附和生长的理想支持物。
- 周明华王云亮赵丽萍
- 关键词：肝素酶酶消化电镜
- 鸡胚前脑细胞在各种支持物特别是人羊膜基膜上生长的定量研究被引量：11
- 1989年
- 作者采用Ⅰ型胶原、人羊膜基膜(HABM)基质面、Fibronectin(FN)、多聚鸟氨酸(PO)、PO+FN、PO+Laminin(LN)、鼠尾胶原和 HABM 上皮面作为8天鸡胚前脑细胞生长的支持物,观察这些支持物对前脑细胞生存生长的影响。前脑细胞以每个孔不同的细胞密度在 PO、LN 和HABM 上皮面培养。发现每个孔4×10~5细胞密度细胞生长最好。用 MTT 做为线粒体脱氢酶底物的自动比色法,对前脑细胞在各种支持物上的生长进行了定量测定。结果表明,所测光密度值(OD)与细胞生存、生长成正比,且 HABM 上皮面是前脑细胞生长最好的支持物。各种支持物促进前脑细胞生长的顺序浓次是:HABM 上皮面>鼠尾胶原>PO+LN>PO+FN>PO>FN>HABM 基质面>Ⅰ型胶原。HABM 上皮面比基质面促进前脑细胞生长作用明显强(P<0.01);鼠尾胶原比Ⅰ型胶原强(P<0.05);PO+LN 比 PO 作用强(P<0.05)。这提示 LN 很可能是 HABM、鼠尾胶原和 PO+LN 中促进神经生长的主要活性因子。
- 赵丽萍周明华
- 关键词：鸡胚
- 神经细胞及其上清液对小鼠腹腔巨噬细胞的作用—细胞化学及MTT定量研究被引量：3
- 1989年
- 本研究采用细胞化学和MTT定量的方法,观察鸡胚前脑神经细胞及其上清液(S_1)对小鼠腹腔巨噬细胞的作用。发现神经细胞及S_1可使培养的巨噬细胞酸性磷酸酶(AcP_(ase))和三磷酸腺苷酶(ATP_(ase))含量增加。MTT定量的结果表明在神经细胞及S_1作用下,巨噬细胞OD值比对照组明显高。S_1经各种处理后,进一步观察对巨噬细胞的影响,发现影响巨噬细胞活性的物质,很可能是一种膜糖蛋白。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：神经细胞巨噬细胞上清液
