袁耀佐
- 作品数：69 被引量：275H指数：10
- 供职机构：中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程理学环境科学与工程更多>>
- 蒜氨酸光学纯度和立体构型的研究被引量：3
- 2007年
- 目的:研究国产蒜氨酸的光学纯度及其立体构型。方法:采用邻苯二甲醛/N-异丁酰基-L-半胱氨酸(OPA/IBLC)为柱前手性衍生化试剂,建立了柱前衍生化 RP-HPLC 法测定蒜氨酸的光学纯度,色谱条件为:SHIM-PACK CLC-ODS 柱(5μm,4.6mm×150mm),流动相为甲醇-醋酸盐缓冲液(1000 mL 水,加醋酸铵1 g 和冰醋酸1 mL)(50:50),UV/MS 检测,UV检测波长230 nm,MS 采用 SIM[M+H]^+m/z 467检测;流速1.0 mL·min^(-1),UV 检测限约为0.4μg·mL^(-1),MS 检测限约为0.04μg·mL^(-1),采用高效液相色谱制备蒜氨酸工作对照品,测定其比旋度,确定其立体构型。结果:手性衍生化柱前 RP-HPLC 测定结果表明国产蒜氨酸中无光学异构体存在,自制蒜氨酸对照品比旋度测定结果与文献报道值一致。结论:国产蒜氨酸中无手性对映体杂质,其立体构型为(+)S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜。
- 袁耀佐顾洁贺霞杭太俊陈坚张正行
- 关键词：蒜氨酸光学纯度立体构型
- HPLC法测定羟苯甲、乙、丙、丁酯中的有关物质被引量：4
- 2008年
- 目的：建立快速、准确的高效液相色谱法（HPLC）测定羟苯甲、乙、丙、丁酯中的有关物质。方法：采用C18柱，流动相为甲醇-1％的冰醋酸（60：40），流速为1．0mL·min^-1，检测波长254nm。结果：羟苯甲、乙、丙、丁酯的自身对照溶液在各供试品溶液0．25％～4％浓度范围内呈线性，对羟基苯甲酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯的检测限分别为0．5065。0．4935，0．4900，0．4975，0．5430ng，5组分之间的校正因子均在0．8～1．3范围内，5组分的响应因子（峰面积／供试品的浓度，y）与其化学结构侧链上含碳数（n）成正比，Y=-0．0727n＋1．2179E-09，r=0．9932。结论：该方法简单、快捷，灵敏度高，同时适用于羟苯甲、乙、丙、丁酯有关物质的测定。
- 袁耀佐钱文黄敏文贺霞
- 关键词：HPLC
- 多西环素及有关物质测定的HPLC方法研究被引量：1
- 2010年
- 目的建立一种快速而全面的测定多西环素及有关物质的高效液相色谱法。方法色谱柱：高聚物型苯乙烯—二乙烯基苯（PS-DVB）装填的反相高效液相色谱柱（MKF-RP-ZH）;流动相：磷酸二氢钾,四丁基硫酸氢铵,EDTA,叔丁醇混合的水溶液,用1mol/L氢氧化钠溶液调pH到9.5±0.1;检测波长为270nm;流速为1.0mL/min;柱温60℃。结果多西环素保留时间7min左右;在1.25-40μg/mL的浓度内r=0.9993（n=6）,线性关系良好。结论该法可以快速测定多西环素及有关物质土霉素、6-表多西环素、美他环素和4-表多西环素的含量,各杂质的分离度≥1.5,相对于USP32及中国药典2005版该品种项下的色谱条件,系统适应性强。
- 魏荣卿李晴刘晓宁袁耀佐张玫
- 关键词：高效液相色谱多西环素
- HPLC-MS/MS法研究精制蒜氨酸中有关物质被引量：17
- 2007年
- 研究精制蒜氨酸样品中的有关物质。采用HPLC-MS/MS一级质谱扫描总离子流谱测定有关物质的准分子离子,并利用他们的色谱保留时间、二级质谱及/或对照品对照进行结构鉴定。全扫描总离子流谱结果表明,精制蒜氨酸中主要含7个有关物质成分,[M+H]+离子m/z分别为116,133,147,152,175及两个m/z同为178的蒜氨酸同分异构体。其中m/z为116,133,147,175的[M+H]+离子相应的物质分别鉴定为脯氨酸、门冬酰胺、谷氨酰胺、精氨酸,m/z为152的[M+H]+离子鉴定为甲基-L-半胱氨酸亚砜,m/z178的两个蒜氨酸同分异构体分别经二级质谱鉴定为异蒜氨酸和环蒜氨酸。精制蒜氨酸中主要有关物质分别为氨基酸及蒜氨酸的同系物及同分异构体。
- 袁耀佐顾洁杭太俊陈坚张正行
- 关键词：HPLC-MS/MS
- 大蒜蒜酶/蒜氨酸催化动力学及临床应用研究被引量：7
- 2009年
- 目的从鲜蒜中分离纯化蒜酶,并研究其酶学性质、动力学特性以及临床常用溶剂对酶活力的影响,为今后进一步优化蒜酶的提取纯化工艺和临床应用提供必要理论参数。方法采用盐析、超滤、冷冻干燥等方法提取纯化蒜酶,SDS-Page凝胶电泳法测定纯化蒜酶分子量,丙酮酸法和考马斯亮蓝G-250法测定蒜酶活力。结果分离纯化所得蒜酶的分子量为97.88KDa,纯度大于60%;蒜酶催化裂解天然蒜氨酸的最适温度为35℃,最适pH为7.00;随着温度的升高,蒜酶的稳定性下降;蒜酶在pH6.5的缓冲体系中最稳定;以天然蒜氨酸为底物测得米氏常数Km=2.139mmol.L-1,最大反应速度Vmax=41.67U.mg-1(蛋白);临床常用溶剂0.9%氯化钠注射液、复方氯化钠注射液(含0.85%NaCl、0.03%KCl、0.033%CaCl2)对蒜酶具有显著的激活作用,而5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液(含5%葡萄糖、0.9%氯化钠)则较强的抑制了蒜酶活力,75%和95%乙醇具有强烈的杀酶作用。结论蒜酶具有热不稳定性和pH不稳定性;其酶解反应选择在35℃和pH7.00的缓冲体系中最佳;而蒜酶溶解在pH6.5的缓冲体系中能较长时间保持稳定;临床常用溶剂中,含氯化钠的注射液(不含葡萄糖)对蒜酶活力有显著的激活作用,而含有葡萄糖的注射液强烈抑制蒜酶活力;75%和95%乙醇作为消毒液使用时也应避免其对蒜酶的杀伤作用。实验结果对进一步优化蒜酶的提取纯化工艺研究以及蒜酶的临床应用具有指导意义。
- 曹红袁耀佐陈坚
- 关键词：大蒜酶学性质动力学特性
- 液相色谱-蒸发光散射-电喷雾离子阱质谱法测定硫酸依替米星及其有关物质
- 目的建立液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）测定硫酸依替米星含量和有关物质,采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱法（HPLC-ESI-MSn）对硫酸依替米星成品中的有关物质进行鉴定。方法采用Gemini NXC18（4...
- 袁耀佐张玫钱文谭力严菲张正行
- 关键词：硫酸依替米星
- 文献传递
- 用微生物方法测定盐酸左氧氟沙星的含量被引量：1
- 1999年
- 建立了用微生物二剂量法测定盐酸左氧氟沙星含量。测定条件为：检定菌：枯草芽孢杆菌；培养基：Ｉ号培养基（ｐＨ７．８）；缓冲溶液：磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．８）；剂距比为２１。剂量反应直线方程的范围在０．４～２．０ｍｇ／Ｌ，ｒ＝０．９９９７，实验结果稳定，误差小。
- 袁耀佐张玫
- 关键词：左氧氟沙星
- 高效液相色谱-电喷雾-离子阱质谱法推定硫酸依替米星中有关物质的结构被引量：14
- 2010年
- 采用高效液相色谱-电喷雾-离子阱质谱法(HPLC-ESI-IT-MSn)对硫酸依替米星中有关物质结构进行推定。采用Phenomnex Gemini NX C18色谱柱,以水-氨水-冰醋酸(96∶3.6∶0.4,V/V)-甲醇(70∶30,V/V)为流动相,质谱条件:电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式;离子源温度350℃;雾化氮气压力275.8kPa;干燥氮气流速10L/min;离子阱质谱检测器,Smart扫描模式,扫描质量范围m/z100～900。硫酸依替米星样品中共检出18种有关物质,对其中的13种物质的结构进行了推定,其余5种有关物质的结构未进行解析,只提供了分子量和二级质谱信息。
- 袁耀佐张玫钱文张正行
- 关键词：硫酸依替米星
- HPLC柱前衍生化法测定硫酸阿米卡星的含量
- 本文建立了反相高效液相色谱柱前衍生化法测定硫酸阿米卡星的含量的方法,并与微生物法的测定结果进行了比较,实验结果基本满意.
- 袁耀佐张玫张正行
- 关键词：硫酸阿米卡星抗生素高效液相色谱柱前衍生化法
- 文献传递
- 反相高效液相色谱法测定注射用克林霉素磷酸酯的含量被引量：4
- 2001年
- 采用反相高效液相色谱法测定注射用克林霉素磷酸酯的含量。色谱条件:色谱柱为C_(18)柱:流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用85％磷酸溶液调节pH值为5.0)-乙腈(80:20);检测波长为210nm;流量为1 ml/min。线形范围:0.05～0.8mg/ml,r=0.9999;平均加样回收率为100.1％,RSD为0.33％。该方法简便、准确、重复性良好。
- 袁耀佐张玫
- 关键词：反相高效液相色谱法克林霉素磷酸酯
