蔡青松
- 作品数：9 被引量：23H指数：3
- 供职机构：四川大学更多>>
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- 喉癌患者血细胞线粒体DNA控制区发现高频率变异
- 2002年
- 利用PCR SSCP技术检测线粒体DNA(mtDNA)复制控制区中 16 4bp的片段 ,在 2 2例喉癌患者的血细胞中发现 3例同质性突变 ,5例异质性突变 ,而在 12例正常人中未发现带型改变 (0 /12 ) .序列分析发现其中一个样本有T146A ,T199C和T2 0 4C的变异 ,T146A为新发现的线粒体DNA多态性 ;这个研究结果提示血细胞线粒体DNAD Loop区的变异 ,可能与喉癌发生有一定的联系 ,对线粒体DNA突变的更深入的研究可以考虑与细胞内信号传导联系起来 ,这将有助于理解线粒体DNA在实体瘤和恶性血液病的研究以及肿瘤细胞中线粒体DNA的复制机制 ,这对寻找新的肿瘤基因诊断的标志物和监测肿瘤发生的遗传易感性是有意义的 .
- 蔡青松张楠张艳翟朝阳
- 人源性神经营养素-6成熟肽基因融合表达载体的构建及表达产物的纯化被引量：1
- 2005年
- 为了得到人源性神经营养素-6(N eurotroph in-6,NT-6)成熟肽片段,本研究以经测序鉴定的人源性NT-6 cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(Po lym erase cha in reaction,PCR)扩增得到NT-6蛋白成熟肽编码区基因片段;将该基因克隆到融合表达载体pGEX 1-λT,构建重组原核融合表达质粒pGEX-NT-6;在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropy l-βD-th ioga lactos ide,IPTG)诱导的条件下,观察融合蛋白在大肠杆菌JM 109中的表达情况;利用蛋白回收试剂盒对表达产物进行纯化。结果表明经PCR扩增后,得到一分子量为460 bp左右的片段;含有该片段的重组质粒经电泳及双酶切鉴定表明,所得到的重组质粒即为含有目的片段的pGEX 1-NT-6;与带有pGEX 1-λT质粒的细菌相对照,pGEX 1-NT-6质粒转化的大肠杆菌JM 109,在IPTG诱导下表达了特异性的融合蛋白,该蛋白分子量为41 KD。获得的融合蛋白经凝血酶酶切后,得到了分子量大约为15 KD的NT-6成熟肽。本研究成功构建了人源性NT-6成熟肽编码区基因融合表达载体,并纯化了其表达产物,为研究人源性NT-6的生物学功能奠定了基础。
- 张承武蔡青松李自成翟朝阳郑煜
- 关键词：成熟肽
- 喉癌组织及其患者血液中发现线粒体DNA复制转录控制区高频率变异
- 目的：鉴定从微量样本中制备线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）片段的技术,使之适合于对mtDNA进行PCR-SSCP分析;以健康年青人和健康老年人的血液样本作为对照,对喉癌组织样本及喉癌患者血液...
- 蔡青松
- 关键词：核DNA线粒体DNA喉癌
- 文献传递
- 新型抗菌肽分子的计算机辅助设计被引量：13
- 2002年
- 目的 通过计算机辅助设计 ,获得具有高活性的新型抗菌肽分子序列 ,为合成这类抗菌肽和通过基因工程方法生产新型药物提供理论依据。方法 通过互联网和计算机软件比较和分析了大量有关抗菌肽的序列和空间结构 ,根据分析结果 ,设计了可能具有很好抗菌活性的抗菌肽分子 ,并用空间结构分析软件观察其可能的结构 ,进行三维结构的计算和预测 ,与已知的抗菌肽分子进行比较。结果 分析发现抗菌肽一般在肽分子的两头分别形成螺旋 ,螺旋趋势强弱与抗菌肽的活性呈一定的正相关。根据这些资料和分析结果 ,设计了一些抗菌肽序列。其中一个序列为 :GWL RKIGKRIKRIGQYFSDAAL EVL GVA。经一级结构分析和空间构象分析显示 ,这一设计的抗菌肽分子可能具有较强的抗菌活性。结论 随着各种数据库和分子生物学软件的完善和丰富 ,充分利用它们进行新分子的设计成为可能。
- 蔡青松张艳翟朝阳
- 关键词：抗菌肽分子序列
- 从微量血中快速制备线粒体DNA片段被引量：5
- 2002年
- 目的 建立并鉴定用于从微量血中快速制备线粒体DNA片段的技术 .方法 采用微量血样品 ,改进提取线粒体DNA的方法 ;以不同的方法提取的血DNA为模板 ,同时扩增nDNA上的基因片段和mtDNA上的基因片段 ,PCR相对定量分析比较各种方法提取的mtDNA片段的纯度 ;结果 用华美公司生产的ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和作者的方法都得到了mtDNA ,而用作者的方法获得的mtDNA的纯度较高 ;结论 由于线粒体DNA与核DNA存在有同源片段 ,ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和常规酶解法提取DNA不适合用于对mtDNA的鉴定 ,作者的方法简便快捷地排除了核DNA的污染 ,非常适合于对mtDNA进行PCR分析 .
- 蔡青松张楠张艳翟朝阳
- 关键词：线粒体DNA核DNA微量血
- 人源性神经营养素－6基因及该基因表达的成熟肽片段的应用
- 本发明提供一种新的神经营养素——人源性神经营养素-6(neurotrophin-6，NT-6)基因的碱基序列，并证明此种人源性NT-6基因的用途。本发明所述人源性NT-6基因，采用逆转录多聚酶链反应方法，由流产胎儿脑组织...
- 郑煜张承武蔡青松翟朝阳胡火珍
- 文献传递
- 人源性神经营养素－6基因及其应用
- 本发明提供一种新的神经营养素——人源性神经营养素－6(neurotrophin－6，NT－6)基因的碱基序列，并证明此种人源性NT－6基因的用途。本发明所述人源性NT－6基因，采用逆转录多聚酶链反应方法，由流产胎儿脑组织...
- 郑煜张承武蔡青松翟朝阳胡火珍
- 文献传递
- 喉癌患者血细胞线粒体DNA控制区的变异
- 目的:通过检测喉癌患者血细胞中线粒体DNA控制区上发生的相应变化,探讨这种改变与癌症发生的可能关系.方法:收集临床确诊为喉癌患者以及正常人的外周血,采用我们建立的从微量血中快速提取线粒体DNA的方法提取线粒体DNA,通过...
- 蔡青松张楠张艳翟朝阳
- 文献传递
- 人脑源性神经营养素-6基因的克隆及在原核细胞中的表达被引量：4
- 2002年
- 目的 克隆人脑源性神经营养素 - 6 (neurotrophin- 6 ,NT- 6 )基因 ,并观察其在大肠杆菌中的表达情况。方法 从流产胎儿大脑皮层提取总 RNA,用逆转录聚合酶链反应扩增得到人的 NT- 6基因c DNA片段 ;经酶切回收后克隆进 p BK- CMV质粒 ,构建 NT- 6的表达载体。通过诱导 ,使 NT- 6基因在大肠杆菌中表达。结果 分离克隆了人脑源性 NT- 6基因 ,含该基因的大肠杆菌在异丙基 -β- D-硫代半乳糖苷诱导的情况下 ,表达了特异性的蛋白质。结论 人脑源性 NT- 6基因的克隆表达为进一步研究 NT- 6的结构、功能及临床应用奠定了基础。
- 张承武蔡青松庄旭翟朝阳郑煜
- 关键词：克隆原核表达蛋白质
