董娜
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核疫苗评价用豚鼠I型过敏反应检测方法的建立
- 疫苗接种引起的不良反应是疫苗安全性评价中存在的主要问题之一,其中,与免疫毒性相关的不良反应居多,并以Ⅰ型过敏反应最为常见和凶险。近年来,国内外公布的与疫苗免疫毒性评价相关的指导原则中多以大鼠和小鼠作为Ⅰ型过敏反应的动物模...
- 董娜
- 关键词：疫苗豚鼠模型
- 文献传递
- 结核分枝杆菌H37Rv两种抗原Ag85b、HspX的制备及其与佐剂的联合应用被引量：4
- 2009年
- 目的用分子生物学方法制备H37Rv的两种抗原Ag85b、HspX,通过与铝佐剂和CpG佐剂联用免疫小鼠进行初步药理学实验以观察其生物学活性。方法常规方法分别构建重组表达质粒pET30a-Ag85b和pET30a-HspX,内切酶鉴定目的片段后两种质粒分别转化BL-21大肠杆菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导后分别产生两种蛋白;用阴离子交换柱Source30、QHP以及疏水层析柱对两种蛋白进行纯化;蛋白测序进行鉴定。纯化后的两种蛋白分别与铝佐剂和CpG佐剂联用(Ag85b,Ag85b+Al,Ag85b+CpG,Ag85b+Al+CpG;HspX,HspX+Al,HspX+CpG,HspX+Al+CpG),免疫C57/BL小鼠,同时设置生理盐水对照组,取脾细胞进行酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测干扰素-γ(IFN-γ)的分泌;同时进行淋巴细胞增殖实验检测脾淋巴细胞经体外刺激后的增殖情况。结果成功构建了两种重组表达质粒pET30a-Ag85b和pET30a-HspX,成功诱导表达了两种蛋白;经过纯化,两种蛋白纯度均达到95%;经鉴定两种蛋白纯化产物的N端15个氨基酸序列与目的序列相同;Ag85b+CpG、Ag85b+Al和Ag85b+CpG+Al组经Ag85b(80μg/ml)体外刺激后分泌IFN-γ显著升高,与生理盐水组比较差异具有显著性(P<0.05);HspX+CpG+Al组经HspX(80μg/ml)体外刺激后分泌IFN-γ显著升高,与生理盐水组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论成功表达并纯化了结核分枝杆菌H37Rv的两种抗原Ag85b和HspX,与铝佐剂和CpG佐剂联用后成功刺激小鼠产生了细胞免疫反应,证实了两种重组蛋白的生物学活性,为下一步药效学评估奠定了基础。
- 陈磊徐苗都伟欣陈保文王志玉王雅君董娜苏城沈小兵王国治
- 关键词：结核分枝杆菌重组蛋白质佐剂AG85BHSPX
- 疫苗免疫毒理学评价的研究进展被引量：1
- 2010年
- 由于疫苗引起的不良反应多与免疫反应相关,因此免疫毒理学评价在疫苗的安全性评价中显得尤为重要。本文就疫苗免疫毒性包括超敏反应、免疫抑制和自身免疫反应的发生机理及其评价方法的研究进展作一综述。
- 董娜徐苗秦川王国治
- 关键词：疫苗免疫毒理学
- 结核分枝杆菌低剂量感染小鼠模型的建立与分析
- 2012年
- 目的建立结核分枝杆菌低剂量感染的小鼠模型,分析感染小鼠组织荷菌量、组织病理随感染时间的动态变化。方法以100菌落形成单位(CFU)的结核分枝杆菌标准株H37Rv经尾静脉途径感染雌性C57BL/6J小鼠40只,于感染后1、3、5、8、12、16、20、24周取材,每个时间点5只小鼠,脾、肺组织匀浆培养检测脾脏组织的荷菌量,脾脏、肺脏及肝脏组织经HE染色分析病理变化。结果小鼠感染后3周脾脏荷菌量达到(4.97±0.19)lgCFU,在感染后5周下降至(3.64±0.22)lg CFU,至感染后8周降到最低的(2.75±0.23)lg CFU;感染后3周肝、脾、肺等脏器出现病理改变,感染5周时病变加重,感染8周时病变自然减轻。结论成功建立了结核分枝杆菌低剂量感染小鼠模型,为结核分枝杆菌慢性持续感染或潜伏感染的研究可提供有用的工具。
- 林树柱董娜向志光徐艳峰占玲俊马春梅秦川
- 关键词：结核
- 豚鼠过敏抗体的分离纯化及在PCA试验中作用规律的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的 建立豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,对致敏血清中过敏抗体（IgE、IgG）进行初步分离纯化,并探讨过敏抗体的作用特点.方法 以卵白蛋白（OVA）和Al（OH）3作为免疫原制备豚鼠Ⅰ型过敏反应模型,ELISA法检测抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀、Protein A柱亲和层析的方法 对致敏血清中IgE、IgG抗体进行初步分离纯化,以豚鼠连续被动皮肤过敏试验分别观察两种抗体在致敏后不同时间激发时引起皮肤蓝斑的变化情况.结果 模型组和对照组血清中IgE抗体含量分别为719.3750ng/ml、2.5250 ng/ml,IgG抗体吸光度（A）值分别为0.9921、0.0174,模型组两种抗体含量均比对照组显著升高（P〈0.05）.豚鼠9 d连续被动皮肤过敏试验中,IgE抗体在5 d PCA时产生的蓝斑直径达到最大,之后持续存在;IgG抗体在2 d PCA时产生蓝斑直径最大,之后迅速下降.结论 成功将致敏血清中两种过敏抗体进行了初步分离纯化,IgE和IgG抗体均参与了豚鼠Ⅰ型过敏反应,IgG抗体较IgE抗体可能作用更为迅速、短暂,有可能成为疫苗Ⅰ型过敏反应毒理学评价的另一主要指标.
- 董娜陈磊徐苗邓海清苏城秦川王国治
- 关键词：IGEIGG
- 结核疫苗评价用豚鼠Ⅰ型过敏反应检测方法的建立
- 疫苗接种引起的不良反应是疫苗安全性评价中存在的主要问题之一，其中，与免疫毒性相关的不良反应居多，并以Ⅰ型过敏反应最为常见和凶险。近年来，国内外公布的与疫苗免疫毒性评价相关的指导原则中多以大鼠和小鼠作为Ⅰ型过敏反应的动物模...
- 董娜
- 文献传递
- 小鼠对结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因的免疫反应被引量：2
- 2011年
- 目的研究结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因的免疫原性。方法将40只BALB/c小鼠随机分成4组,NS组、BCG组、pcDNA-HspX组和pcDNA-Ag85B-Esat6-HspX组,每组10只。BCG组只在0周时皮内注射卡介苗1次。NS组、pcDNA-HspX组及融合基因组分别于0、2、4周肌肉注射生理盐水和重组质粒DNA,共免疫3次。在免疫的第2周,4周及最后一次免疫后2周检测体血清中的总IgG水平。同时,最后一次免疫后2周,取脾细胞检测细胞免疫反应。结果构建的融合基因重组质粒DNA免疫动物后能产生针对结核杆菌特定抗原的特异性细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。结论结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因可作为DNA疫苗进行保护作用的研究。
- 袁伟董娜张丽芳林树柱向志光乔红伟秦川
- 关键词：结核分枝杆菌AG85BESAT6HSPXDNA疫苗
- 结核分枝杆菌感染小鼠的脾脏和肺脏组织荷菌量与病理变化被引量：6
- 2011年
- 目的分析结核急性感染小鼠脾脏和肺脏的组织荷菌量以及病理的动态变化。方法以3×105CFU结核分枝杆菌标准株H37Rv尾静脉途径感染雌性C57BL/6J小鼠,测定感染后1 d、1周、2周、3周、4周、6周和8周肺脏及脾脏组织的荷菌量,脾脏和肺脏组织经HE染色分析病理变化。结果感染动物的脾脏荷菌量在前3周逐步提高,在4～8周脾脏荷菌量维持稳定,肺脏组织在2～8周组织荷菌量逐步升高。病理分析显示动物感染3周后肺脏和脾脏出现肉芽肿,在6～8周病理损伤加重。结论小鼠经尾静脉感染高剂量结核分枝杆菌在8周前表现为急性感染状态,适用于抗结核药物的体内药效学评价。
- 向志光林树柱董娜袁伟徐艳峰秦川
- 关键词：结核分枝杆菌小鼠急性感染
