胡键阳 作品数:11 被引量:20 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学附属儿童医院 更多>> 发文基金: 国家临床重点专科建设项目 国家科技重大专项 重庆市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
心脏死亡幼儿供肝移植治疗幼儿胆道闭锁一例 被引量:1 2012年 目的总结心脏死亡幼儿供肝移植治疗幼儿先天性胆道闭锁的体会。方法供者为女孩,年龄16个月,体重10kg,因严重缺氧性脑病继发心脏死亡行器官捐赠;受者为女孩,年龄2岁,体重12kg,因先天性胆道闭锁行肝门-空肠吻合术,术后出现黄疸并发胆汁性肝硬化晚期。肝移植手术采用经典肝移植术式,供肝热缺血时间为7min,冷缺血时间为360min,移植物与受者标准肝体积比(GV/SLV)为1.02。术后严格监测受者的生命体征和移植肝功能,积极进行抗感染、抗凝血,改善微循环等护理措施,采用他克莫司、吗替麦考酚酯和泼尼松的三联免疫抑制方案预防排斥反应。结果受者手术耗时480min,无肝期65min,术中出血230ml。受者于术后12h拔除气管插管,48h开始进食。术后3和15d时,受者出现肝动脉血栓形成,用介入法经肝动脉插管持续灌注尿激酶溶栓等治疗后肝动脉恢复血流,移植肝功能逐渐恢复正常,术后42d时出院,健康生活至今。结论心脏死亡肝供幼儿可以成为婴幼儿肝移植的供肝来源,并获得良好的肝移植效果;供、受者肝脏体积的匹配可以减少手术并发症的发生;熟练的显微外科技术和围手术期精细的管理是手术成功的保证。 张明满 戴小科 郭春宝 蒲从伦 李英存 康权 任志美 邓玉华 熊强 陈柏林 胡键阳 陈凯关键词:幼儿 心脏死亡 组织供者 肝移植 用生物传感器方法测定正常小鼠肝脏中miR-21活性 2013年 目的:建立生物传感器检测小鼠肝脏中microRNA(miRNA)活性的方法,测定miR-21在正常小鼠肝脏中的活性。方法:首先,分子克隆方法构建检测miRNA活性的通用型质粒传感器Dsensor。将各种miRNA的互补序列插入Dsensor中构建成相应miRNA活性检测传感器。用水动力法将检测miR-21的Dsensor注射至正常小鼠体内,以miR-122 Dsensor为阳性对照,miR-206Dsensor为阴性对照,以不插入任何miRNA互补序列的Dsensor为空白对照。不同时间点尾静脉采血测定Gluc表达,处死小鼠测定肝脏中Fluc表达,比较计算得出miRNA活性。最后,用QRT-PCR法测定小鼠肝脏组织中miR-21、miR-122和miR-206表达水平。结果:用RIF(Relativeinhibiting fold)值表示miRNA活性,miR-21、miR-122和miR-206活性分别为80.03±21.25,29.90±5.90和0.92±0.29,表明小鼠正常肝脏中miR-21的负调控活性明显高于miR-122。然而,QRT-PCR法测定结果显示,miR-21的表达水平明显低于miR-122,而miR-206几乎没有表达。从miR-21与miR-122的活性与表达水平比较发现,miR-21的表达水平并没有真实反映其活性。结论:成功建立了一种小鼠肝脏中miRNA活性检测方法;首次发现小鼠正常肝脏中miR-21活性水平比miR-122更高,而表达水平却明显低于miR-122。提示miR-21对于维持肝脏的正常生理功能的重要作用,值得进一步研究其调控的靶基因和机理。 田文洪 胡键阳 董小岩 李明皓 吴小兵关键词:MIRNA MIR-21 肝脏 重组Ⅱ型腺相关病毒介导的TIMP-1感染B16细胞对其体外侵袭及体内成瘤性的抑制作用研究 2016年 目的研究重组Ⅱ型腺相关病毒(AAV2)介导的TIMP-1对小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16细胞)侵袭性及体内成瘤性的抑制作用。方法重组构建携带金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的AAV2(r AAV2-TIMP1)质粒,以r AAV2-TIMP1体外感染B16细胞,经蛋白质印迹法(Western blotting)检测TIMP-1表达。选择能够明确表达TIMP-1的B16细胞,并根据其对肿瘤细胞侵袭性的抑制作用探究TIMP-1的作用,将感染r AAV2-TIMP1的B16细胞接种至小鼠的皮下与尾静脉,进而观察AAV2介导的TIMP-1对体内成瘤情况的影响。结果 TIMP-1经AAV2成功导入B16细胞并获得有效表达,表明AAV2介导的TIMP1能够明显抑制体外肿瘤细胞的侵袭性,明显降低体内肿瘤细胞的成瘤性。结论 AAV2介导的TIMP1在体外能很好地抑制B16细胞的侵袭性,在体内可以明显抑制肿瘤的形成和生长。 胡键阳 李明皓关键词:金属蛋白酶组织抑制因子-1 B16细胞 腹腔镜肝脏肿瘤切除术5例报告 目的:总结我科开展的5例腹腔镜下肝脏切除术,为更多的开展这一操作积累经验。方法:运用超声刀腹腔镜下成功实施5例肝脏切除。结果:手术顺利,出血量为10—400ml术后无并发症,1—3天可进食,8-10天出院。结论:腹腔镜肝... 李明皓 胡键阳 黄驿胜 高向明关键词:腹腔镜 肝肿瘤切除术 超声刀 出血控制 文献传递 自体肝移植治疗婴幼儿复杂肝母细胞瘤一例及文献复习 被引量:3 2018年 目的总结体外肝切除联合自体肝移植术治疗婴幼儿复杂肝母细胞瘤的临床经验。方法患儿为18个月女孩,身高81 cm,体重11 kg。确诊为肝母细胞瘤Ⅳ期,病变位于肝中叶,并侵犯第一、第二及第三肝门,并形成瘤栓沿肝上腔静脉蔓延至右心房。经3个疗程化疗,病灶稍有缩小。先行心脏切开,清除心房及肝上下腔静脉瘤栓,恢复循环后整体切除肝脏、肝脏肿瘤及肝后下腔静脉。经门静脉UW液灌注及降温后,完整切除肝脏肿瘤。残肝断面充分结扎、门静脉、肝静脉及胆道修整及重建后,植入患儿体内。术后入重症监护室(PICU),常规监测患儿生命体征、肝肾功能及出凝血状况等,每天B型超声检查残肝血供,常规抗感染治疗。结果手术持续时间360 min。其中,心脏手术及体外循环132 min,静脉转流时间261 min。肝脏冷缺血时间131 min。术中输入红细胞悬液1 200 ml。术后5 d开始进食,12 d患儿肝功能指标恢复正常。术后并发症包括:空肠微小肠穿孔、胆漏和胸腔积液等。经再次行肠穿孔修补、腹腔引流及胸腔闭式引流灌洗后痊愈。术后41 d出院,出院时AFP降至正常。结论自体肝移植能完整切除常规手术无法切除的婴幼儿复杂肝母细胞瘤。术前精确计算残肝体积、术中仔细修复重要管道、术后抗凝治疗能取得良好疗效。 张明满 宁禹 李英存 戴小科 邓玉华 康权 唐艳 郭春宝 胡键阳 王浩民关键词:肝肿瘤 肝移植 体外循环辅助下半离体肝切除自体肝移植治疗儿童复杂肝脏肿瘤 被引量:2 2018年 目的探讨半离体肝切除自体肝移植术在儿童复杂肝脏肿瘤切除中的应用。方法分析重庆医科大学附属儿童医院近期完成的1例多次化疗后儿童肝母细胞瘤患儿,其肿瘤侵犯肝Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ段并伴有下腔静脉及右心房瘤栓形成,常规肝叶切除难以完成肿瘤切除。采用体外循环辅助下半离体肝切除、下腔静脉及右心房瘤栓取出、自体肝移植手术方式进行治疗,分析其手术方式及术中术后注意事项。结果手术顺利,手术时间8 h,肝脏冷缺血时间190 min。术后恢复顺利,术后2周复查肝功能及甲胎蛋白水平已逐渐趋向于正常。超声检查示肝静脉、门静脉、肝动脉血液流速良好。患儿术后3周康复出院。结论半离体肝切除自体肝移植术对儿童常规肝叶切除无法完成的肝脏肿瘤具有良好的应用价值。 康权 李英存 戴小科 胡键阳 王浩名 张明满关键词:肝移植 肝切除术 儿童肝移植术后发生早期肝动脉血栓的影响因素分析 被引量:5 2020年 目的探讨儿童肝移植术后发生早期肝动脉血栓(HAT)的影响因素。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2011年7月至2019年11月重庆医科大学附属儿童医院收治的93例儿童肝移植受者的临床资料;男50例,女43例;中位年龄为7个月,年龄范围为3个月至15岁;体质量为7.0 kg(6.5 kg,11.0 kg)。观察指标:(1)随访情况。(2)术后发生早期HAT及其治疗情况。(3)影响术后发生早期HAT的影响因素分析。(4)术中尿量体质量比、术中平均尿量对HAT的预测能力。采用住院、门诊、电话及微信群联系方式进行随访,了解受者术后1个月内有无早期HAT。随访时间截至2019年12月。正态分布的计量资料以x±s表示,偏态分布的计量资料以M(范围)或M(P25,P75)表示,计数资料以绝对数表示。单因素分析采用单因素Logistic检验,不符合单因素Logistic回归条件的使用Fisher确切概率法,多因素分析采用Logistic检验。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算约登指数。结果(1)随访情况:93例肝移植受者均获得随访,随访时间为1~98个月,中位随访时间为18个月。(2)术后发生早期HAT及其治疗情况:93例受者中,术后7例发生早期HAT;男1例,女6例;中位年龄为7个月,年龄范围为5个月至15岁。1例受者为二次手术后再次发生早期HAT。7例受者首次发生早期HAT时间为术后4 d(1 d,9 d)。7例受者肝移植手术时间为9.0 h(7.3 h,17.5 h)。7例受者肝动脉吻合均使用8⁃0 Prolene线,3例行连续缝合,4例行间断缝合,血管吻合直径为0.25~0.40 cm。7例受者供肝动脉选择肝总动脉4例,肝固有动脉2例,腹主动脉侧壁带腹腔干1例;7例受者动脉选择肝固有动脉3例,肝左右动脉分叉成形2例,肝右动脉1例,变异肝右动脉1例。7例受者中,5例首选血管介入溶栓治疗,2例首选肝动脉取栓及肝动脉重建;5例血管介入溶栓受者中1例溶栓后预后良好,4例溶栓后复查B超血流无明显改善,行肝动脉取� 胡伟 康权 张明满 李英存 熊强 邓玉华 胡键阳 王浩名 王瑞珏 韩环立 乐盈 戴小科关键词:肝脏疾病 肝移植 肝动脉血栓 尿量 儿童 儿童心脏死亡器官捐献供者供肝移植11例疗效分析 被引量:5 2014年 目的评估儿童心脏死亡器官捐献(DCD)供者供肝婴幼儿肝移植的临床疗效。方法回顾性分析2011年11月至2013年5月间完成的11例儿童DCD供肝移植的临床资料。11例供肝均为儿童DCD供肝,由中国人体器官分配与共享系统(COTRS)获得。原发疾病为颅脑外伤8例、缺血缺氧性脑病2例及颅内良性肿瘤i例,年龄7个月~9岁。11例受者中男孩3例,女孩8例,原发病为胆道闭锁伴胆汁性肝硬化9例,急性肝坏死和肝糖原累积症各1例,儿童终末期肝病模型(PELD)评分为8.5~31.5,移植时年龄4个月~5岁,体质量5~20kg。供、受者血型相同4例、相容7例。供肝重量为180~690g。经典式肝移植9例,背驮式肝移植2例,8例为全肝移植,3例为减体积肝移植。胆管-空肠Roux-en-Y吻合9例,胆道端端吻合2例。移植后9例采用以环孢素A为主的免疫抑制方案,其中1例后将环孢素A替换为他可莫司;2例采用以他可莫司为主的免疫抑制方案。结果供肝热缺血时间平均为4.3min,冷缺血时间平均为10h。平均手术耗时10.9h,无肝期78min。移植肝重量与受者标准肝体积比(GV/SLV)平均为1.15,移植肝重量与受者体质量比(GRwR)平均为4.35%。术后并发症包括肝动脉血栓(HAT)4例,原发性移植物无功能(PNF)1例,门静脉血栓1例,腹腔血肿和乳糜腹水各1例。住院时间21~52d。随访期3~21个月,4例(36%)死亡,7例(64%)痊愈,目前均健康生活。结论儿童DCD供肝可以成为儿童肝移植的肝源,术后HAT发生率高,是影响肝移植疗效的主要因素,需积累经验和改进技术以提高成功率。 张明满 戴小科 任志美 蒲从伦 李英存 康权 张桂芳 熊强 邓玉华 陈柏林 胡键阳关键词:心脏死亡器官捐献 儿童 供者 肝移植 利用分泌型荧光素酶体外长期监测小鼠肝脏microRNA活性 被引量:4 2011年 活体动物microRNA(miRNA)检测技术对阐明miRNA的生物学功能非常重要.但是,目前缺乏一种方便灵敏的实时反映活体动物miRNA活性及其变化的体外监测手段.通过在分泌型荧光素酶Gluc(Gaussia princeps luciferase)mRNA的3′非翻译区插入相应miRNA的靶序列构建一系列miRNA传感器.将miRNA传感器体外转染培养细胞和通过水动力注射方法转染小鼠肝脏,通过检测细胞培养上清和外周血液中的Gluc来反映细胞内和活体动物肝脏的miRNA活性.结果显示,CMV启动子驱动的miRNA传感器可以长期监测体外培养细胞中的miRNA和短期监测小鼠肝脏的miRNA,但由于启动子在肝脏的沉默不能用于长期监测肝脏miRNA;CAG启动子驱动的传感器则成功地实现了对肝脏内源性miR-122,miR-142和miR-34a以及对肝脏过表达的miR-34a的长期实时监测.利用以Gluc为报告基因的miRNA传感器,通过检测外周血Gluc可以方便地在体外长期连续监测小鼠肝脏的miRNA. 王刚 董小岩 胡键阳 田文洪 尉迟捷 王岳 吴小兵MicroRNA-122调控的TK基因有效降低TK/GCV治疗系统的肝毒性 2010年 目的:探讨利用肝脏特异性microRNA-122(miR-122)调控外源基因在肝细胞的表达,减轻单纯疱疹病毒1型胸苷激酶和更昔洛韦(herpes simplex virus type 1-thymidine kinase/gancyclovir,TK/GCV)治疗系统的肝毒性。方法:通过在相应基因的3′非翻译区(3′UTR)插入miR-122靶序列,构建miR-122调控的pEGFP-122T、pLuc-122T和pTK-122T表达载体,分别转染miR-122阳性的Huh7肝癌细胞和miR-122阴性的HeLa宫颈癌细胞,观察细胞中报告基因的表达及TK/GCV的细胞毒杀伤作用。水动力法分别注射上述质粒至小鼠体内,冰冻切片和活体成像观察肝脏EGFP和Luc的表达,通过小鼠血清ALT、体质量变化、存活率和肝脏病理变化评价TK/GCV系统的肝毒性。结果:在Huh7细胞,miR-122靶序列的插入抑制了EGFP的表达和Luc的活性,减轻TK/GCV的毒性杀伤;而在HeLa细胞,miR-122靶序列的插入对报告基因表达和TK/GCV的杀伤无影响。体内实验结果显示,pEGFP-122T处理组的肝细胞不表达EGFP,而pEGFP处理组的肝细胞有30%高表达EGFP;与pLuc处理组相比,pLuc-122T处理组的Luc活性下调了33.70%。pTK处理组小鼠血清ALT显著升高、体质量进行性下降、肝脏出现明显病理损伤,进而引起小鼠死亡;而pTK-122T处理组小鼠血清ALT正常、无体质量下降、肝脏切片未见病理改变。结论:miR-122靶序列的插入可抑制外源基因在肝脏的表达,并可有效地降低TK/GCV系统的肝毒性。 王刚 董小岩 田文洪 尉迟捷 胡键阳 付昕阳 柳云帆 谭文杰 吴小兵关键词:胸苷激酶 肝毒性 宫颈肿瘤 自杀基因治疗