罗加烈 作品数:14 被引量:34 H指数:4 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家自然科学基金 海南省教育厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
不同初级感觉神经元ATP-激活电流的特征及意义 被引量:4 2006年 为探讨大鼠不同初级感觉神经元ATP-激活电流的电生理学特征及意义,本实验在新鲜分离的大鼠三种初级感觉神经元标本上,应用全细胞膜片钳技术记录,对外加ATP引起的膜电流的变化进行了研究。结果显示:(1)受检的细胞绝大多数对ATP敏感,外加ATP记录到内向电流,在背根神经节和三叉神经节神经元记录到三种形式的ATP-激活电流:快速激活快速失活型(fasttype,F型)、快速激活缓慢失活型(intermediatetype,I型)和缓慢激活缓慢失活型(slowtype,S型),但在结状神经节神经元主要记录到S型电流,三种形式的电流均具有浓度依赖性;(2)三种形式的ATP-激活电流上升相(risingphase,R)从10%至90%的时间(R10-90)有明显差异(P<0.05),去敏感相(desensitizingphase)从10%至90%的时间(D10-90)也有明显差异(P<0.05);(3)三种形式的电流EC50非常接近,I型的量-效曲线居中间,F型的下移,S型的上移;(4)小细胞的ATP-激活电流多表现为F型特征,大细胞多表现为S型特征,而中等大小的细胞多表现为I型特征,结状神经节神经元电流形式与细胞大小没有相关性。以上结果提示:躯体和内脏初级感觉神经元ATP-激活电流的类型可能与不同的感觉性质有关;不同形式的ATP激活电流可能由ATP受体的不同亚单位组成的各种亚型中介。 聂辉 张玉芹 程剑侠 罗加烈 李之望关键词:全细胞膜片钳 初级感觉神经元 大鼠三叉神经节神经元ATP-激活电流的药理学特性 被引量:7 2007年 本实验应用全细胞膜片钳技术探讨了大鼠三叉神经节神经元ATP-激活电流的药理学特性。结果显示:(1)92.3%(60/65)的细胞对ATP敏感,有反应的细胞可记录到三种型式的ATP-激活电流:快速激活快速失活型(Fasttype,F型)、快速激活缓慢失活型(Intermediate type,I型)和缓慢激活缓慢失活型(Slow type,S型),三种电流均具有浓度依赖性。(2)动力学特征:三种类型的ATP激活电流上升相从10%到90%的时间:F型:33.6±4.5ms;I型:62.2±9.9ms;S型:302.1±62ms。去敏感相从10%到90%的时间:F型:399.4±58.2ms;S型:>500ms。(3)量-效关系:I型的量-效曲线居中间,F型的下移,S型的上移,三种类型电流的量-效曲线的EC50非常接近。(4)ATP受体的激动剂激活三种类型电流的效能顺序为:ATP>2-MeSATP>α,β-MeATP>UTP>ADP,其拮抗剂PPADS、RB-2和Suramin对这三种电流的拮抗作用基本相同。以上结果提示:三种型式的ATP-激活电流可能是由不同亚单位组合的P2X受体亚型所介导,不同的亚型介导的电流可能具有不同的功能。 张玉芹 罗加烈 聂辉 朱凡 李之望关键词:全细胞膜片钳 三叉神经节 药理学特性 致痛致炎因子BK和ATP在外周伤害性反应中协同作用的电生理和行为学研究(英文) 被引量:1 2007年 目的采用电生理记录和行为学观察研究了外周初级传入神经元对单独和联合使用ATP及缓激肽(BK)的反应及其机制。方法在大鼠新鲜分离背根神经节(DRG)神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录ATP激活电流(I_(ATP))以及BK对I_(ATP)的调制作用,并结合痛行为实验进行整体行为观察。结果在大鼠新鲜分离的DRG细胞上预加BK后再加ATP,则I_(ATP)明显增强,其增强程度依赖于BK的浓度(10^(-6)~10^(-4) mol/L)。预加BK后ATP的量—效曲线上移,其电流最大值与对照相比增加20.75%,而BK预加前后ATP量—效曲线的EC_(50)值非常接近(1.65×10^(-5)(?) 2.0×10^(-5)mol/L)。在大鼠后肢掌底皮下分别注射BK和ATP均引起浓度依赖性的痛行为(抬腿)反应.当联合应用BK(10^(-6)mol/L)和ATP(10^(-5),10^(-4) and 10^(-3)mol/L)时,后爪抬腿时间随ATP浓度的增大而急剧地增强。结论炎性介质BK、ATP等在外周感觉神经来梢疼痛信息的产生、传递和调制方面起着重要的作用。ATP和BK具有协同作用,这种作用是非竞争性的,BK能明显增强I_(ATP)预加BK后,随着ATP浓度的增高所诱导的痛行为反应急剧增加。 张健 罗加烈 周克纯 谷奇海 刘长金 茹立强 李之望关键词:大鼠背根神经节 膜片钳技术 行为学实验 伤害性反应 缓激肽 5-HT_2和5-HT_3受体在外周初级感觉神经末梢痛反应和痛调制中的相互作用 被引量:16 2006年 目的:探讨5-HT2和5-HT3受体亚型在5-HT引起外周痛反应和痛调制中的相互作用及其机制;方法:在大鼠三叉神经节神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录5-羟色胺激活电流(I5-HT),并结合痛行为实验进行观察。结果:在大多数受检细胞(54/88,61.4%)特别是中、小型细胞外加5-HT可引起一快去敏感的内向电流,此内向电流能被5-HT3受体特异性激动剂2-甲基-5-羟色胺所模拟,被5-HT3受体拮抗剂ICS250-930可逆性阻断,而5-HT2受体激动剂α-甲基-5-羟色胺则有明显增强I5-HT的作用,5-HT1受体激动剂R-(+)-UH301无明显反应。在进一步的整体清醒动物的行为学试验中我们观察到,大鼠后肢掌底皮下注射5-HT(10-5,10-4和10-3mol/L)引起浓度依赖性的痛行为反应,而用5-HT2和5-HT3受体特异性拮抗剂Cyproheptadine和ICS250-930分别阻断相应受体亚型后,5-HT引起的痛行为反应的强度序列为:5-HT>5-HT+ICS>5-HT+Cyp。结论:本文结果提示:5-HT所引起的痛反应中,在初级感觉神经元水平5-HT3受体可能仅起着启始作用,而5-HT2受体则在伤害性信息的维持和调制过程中发挥更大的作用。 张健 胡旺平 周克纯 罗加烈 樊友珍 茹立强 李之望关键词:5-HT3受体 膜片钳技术 Baclofen对机械分离的大鼠海马锥体细胞GABA-激活电流的抑制作用 2004年 在机械分离的海马锥体细胞上,应用全细胞膜片钳技术。证明大多数细胞(88.5%,46/52)对GABA敏感。10-5-10-3mol/L的GABA引起一剂量依赖性、有明显去敏感作用的内向电流。预加3×10-5mol/L baclofen(GABAB受体的特异性激动剂)30 s后再加GABA,84.8%(39/46)的细胞GABA-激活电流被抑制,其中仅有一个细胞(2.2%,1/46)GABA-激活电流幅值增强,13%(6/46)的细胞GABA-激活电流幅值无变化。预加baclofen后,GABA-激活电流量-效曲线明显下移。预加baclofen前后IGABA量效曲线的Kd值非常接近(1.0×10-4 vsl.4×10-4 mol/L)。经saclofen预处理可消除baclofen对GABA-激活电流的抑制。这与我室以往在外周神经元上的研究结果一致。本文结果不仅证明了GABAA和GABAB受体在海马锥体细胞上的共存,而且也证明了GABAB受体激活后对GABAA受体功能抑制这一现象无论在外周或中枢神经系统均具有普遍性。 甘志强 罗加烈 郑少萍 李之望关键词:GABAB受体 海马锥体细胞 大鼠海马 激活电流 全细胞膜片钳技术 大鼠三叉神经节不同直径神经元ATP-激活电流的特征 被引量:1 2007年 目的:探讨大鼠三叉神经节不同直径神经元ATP-激活电流的特征。方法:应用全细胞膜片钳技术进行实验。结果:①92.3%(60/65)的细胞对ATP敏感,有反应的细胞可记录到三种型式的ATP-激活电流:快速激活快速失活型(Fast type,F型)、快速激活缓慢失活型(Intermediate type,I型)和缓慢激活缓慢失活型(Slowtype,S型)。三种电流均具有浓度依赖性。②小直径的细胞多表现为F型特征,大直径的细胞多表现为S型特征,而中等大小的细胞多表现为I型特征。③动力学特征:三种类型的ATP激活电流上升相从10%到90%的时间:F型:(33.6±4.5)ms;Ⅰ型:(62.2±9.9)ms;S型:(302.1±62)ms。去敏感相从10%到90%的时间:F型:(399.4±58.2)ms;S型:〉500ms。④I-V曲线:三种电流均表现为内向整流的特性,而且翻转电位均为0~5mV。⑤量-效关系:Ⅰ型的量-效曲线居中间,F型的下移,S型的上移,三种类型电流量-效曲线的EC50非常接近。结论:三种型式的ATP-激活电流可能是由不同亚单位组合的P2X受体各亚型所介导,这些亚型分布于不同大小的三叉神经节神经元,从而传导不同的信息。 张玉芹 罗加烈 聂辉 朱凡 李之望关键词:全细胞膜片钳 三叉神经节 Bis(7)-tacrine对大鼠初级感觉神经元钾通道的抑制作用 <正>Bis(7)-tacrine是-种新型二聚体胆碱脂酶抑制剂,由庚烯链连接两个tacrine分子组成。与治疗Alzheimer disease (AD)的tacrine相比,效能强150倍,选择性高250倍。该化合物... 李享元 罗加烈 聂辉 吴鸿修 韩怡凡 李之望关键词:钾电流 DRG 文献传递 双极电压钳技术在促离子型受体研究中的应用 被引量:6 2005年 目的探讨双极电压钳技术在促离子型受体研究中的应用。方法将外源性促离子型受体的mRNA注入爪蟾卵母细胞进行表达,用双极电压钳技术记录受体激活时产生的膜电流。结果与结论在促离子型受体的研究中,实现了电生理实验与分子生物学实验的有机结合。 王照宇 张玉芹 聂辉 罗加烈 李之望关键词:爪蟾卵母细胞 基因表达 大鼠三叉神经节神经元三种不同类型的ATP-激活电流 第一部分:大鼠三叉神经节神经元三种不同类型的ATP激活电流;该实验采用全细胞膜片箝技术探讨了大鼠三叉神经节神经元ATP-激活电流的特征.第二部分:Bis(7)-tacrine抑制急性机械分离之大鼠海马锥体细胞的NMDA-... 罗加烈关键词:全细胞膜片钳 三叉神经节 海马锥体细胞 SP 辣椒素受体 文献传递 P物质对大鼠三叉神经节神经元辣椒素激活电流的调制作用 2006年 目的研究P物质(SP)对急性分离的大鼠三叉神经节神经元辣椒素受体亚型1(VR1)的调制作用,探讨SP对辣椒素在疼痛传导中作用的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的三叉神经节神经元膜VR1介导的电流,并观察预加SP对VR1介导的电流的调制作用。结果大多数三叉神经节细胞对辣椒素敏感,细胞外应用辣椒素(1×10-7~3×10-6mol/L)后可引起缓慢激活无明显去敏感的内向电流,且呈浓度依赖性;分别预加1×10-9、3×10-9和1×10-8mol/L SP 1 min后,辣椒素引起的电流幅值分别增加2.4%、20.8%和51.8%,增加的程度与SP的浓度和预加的持续时间有关。应用SP受体特异性阻断剂GR82334(1×10-6mol/L)可以阻断SP对辣椒素激活电流的增强作用。结论SP可增强三叉神经节神经元膜辣椒素受体介导的电流。 罗加烈 胡旺平 樊友珍 甘志强 李之望关键词:P物质 辣椒素受体 全细胞膜片钳 三叉神经节