窦娟
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外源性干细胞因子对糖尿病胃轻瘫大鼠胃动力的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨外源性干细胞子(Stem cell factor,SCF)对糖尿病胃轻瘫大鼠(diabetic gastroparesis,DGP)胃电及胃阻抗的影响。方法 30只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)50 mg/kg并高糖高脂饲料喂食建立DGP模型;成模后随机分为糖尿病组(DM组,n=8)、糖尿病+外源性干细胞因子治疗组(DM+SCF组,n=8);DM+SCF组腹腔注射SCF 0.4μg/(kg·d),共15天,对照组和DM组每天腹腔注射等量的磷酸盐缓冲液(pH=7.4)。阻抗式胃动力系统检测大鼠胃动力和同步胃电,透射电镜观察胃窦平滑肌细胞超微结构的变化。结果 DM组大鼠胃电节律紊乱,胃电主功率百分比较对照组显著降低(P<0.01);DM组大鼠阻抗主功率百分比明显降低(P<0.01),阻抗胃动过缓功率百分比明显升高(P<0.01);DM大鼠予SCF干预后,胃电、胃阻抗主功率百分比均有所改善(p<0.01;P<0.05);DM组大鼠胃窦平滑肌细胞胞核肿胀、肌浆网、内质网扩张,部分细胞胞质内细胞器溶解、消失;DM组大鼠予SCF干预后胃窦平滑肌细胞超微结构改善,电镜下仅见平滑肌细胞胞核轻度肿胀,密斑、密体、肌丝稍减少,余细胞器未见明显异常改变。结论外源性SCF能显著改善DGP大鼠的胃电,并能部分改善其胃蠕动,其机制与胃窦平滑肌结构的改善有关。
- 窦娟刘纯伦谢黎李章勇
- 关键词：糖尿病胃轻瘫干细胞因子胃平滑肌细胞超微结构
- 外源性干细胞因子对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal细胞的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨外源性干细胞因子(SCF)能否改善糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦Cajal细胞(ICC)的异常病变。方法 SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射链脲佐茵素(STZ)50 mg/kg并高糖高脂饲料不规律喂养构建DGP模型,对照组腹腔注射等量生理盐水并普通饲料规律喂养。成模后随机分为糖尿病组(DM组)、糖尿病+外源性干细胞因子治疗组(DM+SCF组);DM+SCF组腹腔注射SCF 0.4 ug/(kg·d),共15天,对照组和DM组每天腹腔注射等量的磷酸盐缓冲液(pH=7.4)。RT-PCR、Westernblot检测胃窦组织中SCF及C-kit的mRNA及蛋白表达;免疫组化、透射电镜观察胃窦组织中Cajal细胞的变化。结果 DM组大鼠胃窦组织SCF及C-kit的mRNA及蛋白表达下降,Cajal细胞数量减少,细胞内线粒体肿胀、内质网扩张;予外源性SCF干预后,胃窦组织中SCF及C-kit的mRNA及蛋白表达上调,Cajal细胞数量增多、超微结构明显改善。结论外源性SCF能在一定程度上改善或逆转糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal细胞的异常病变。
- 谢黎刘纯伦徐晓萌窦娟
- 关键词：糖尿病胃轻瘫干细胞因子CAJAL细胞
- FOXC1蛋白基因shRNA干扰质粒对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨FOXC1蛋白基因RNA干扰质粒对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法采用RT-PCR及Westernblot法检测SGC-7901细胞和胃黏膜上皮细胞GES-1中FOXC1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。构建3个FOXC1基因shRNA真核表达质粒pshRNA-FOXC1a、pshRNA-FOXC1b、pshRNA-FOXC1c,分别转染SGC-7901细胞,并设pGenesil-1空质粒转染组和未转染的细胞对照组,RT-PCR及Western blot法分别检测转染细胞中FOXC1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;MTT法检测转染细胞的增殖活力;流式细胞术检测转染细胞的细胞周期。结果 SGC-7901细胞中FOXC1基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平均显著高于GES-1细胞(P<0.05)。pshRNA-FOXC1a组、pshRNA-FOXC1b组和pshRNA-FOXC1c组SGC-7901细胞中FOXC1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均显著低于pGenesil-1组和SGC-7901组(P<0.01);细胞增殖抑制率显著高于pGensil-1组(P<0.05)。处于G1、G2期的细胞比例显著高于SGC-7901组(P<0.01),S期细胞比例显著低于SGC-7901组(P<0.01)。结论成功构建了FOXC1蛋白基因shRNA真核表达质粒。FOXC1在胃癌细胞SGC-7901中呈高表达,抑制其表达后,细胞周期被阻滞在G1～G2期,细胞增殖受到抑制。
- 张瑶刘纯伦刘代江窦娟
- 关键词：胃癌SGC-7901细胞细胞增殖
- 共转染沉默5-LOX/COX-2基因对胃癌细胞SGC-7901生长的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察沉默环氧合酶2(COX-2)基因和5-脂氧合酶(5-LOX)基因对胃癌细胞SGC-7901生长的影响。方法分别构建5-LOX/COX-2基因的靶向短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,共同转染胃癌细胞SGC-7901。将细胞分为空白对照组、空质粒组、单独转染组(P-sh5-LOX或P-shCOX-2)及共同转染组(P-sh5-LOX+P-shCOX-2)。分别采用RT-PCR及Western blotting检测COX-2/5-LOX的mRNA及蛋白表达情况,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与空白对照组及空质粒组比较,5-LOX和COX-2基因单独转染组及共同转染组的mRNA和蛋白表达量均受到显著抑制(P<0.05)。P-sh5-LOX组(27.38%±0.64%)、P-shCOX-2组(29.05%±0.61%)及共同转染组(50.23%±1.73%)细胞增殖抑制率均显著高于空质粒组(3.78%±0.39%,P<0.05),共同转染组细胞增殖抑制率显著高于单独转染组(P<0.05)。P-sh5-LOX组、P-shCOX-2组及共同转染组的细胞凋亡率(分别为15.31%±1.53%、16.69%±1.28%、27.27%±1.18%)均显著高于空质粒组(0.99%±0.46%,P<0.05),且共同转染组显著高于单独转染组(P<0.05)。结论同时沉默胃癌细胞SGC-7901的5-LOX及COX-2基因,可显著抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡,其效果优于单独沉默其中一个基因。
- 刘代江刘纯伦张瑶窦娟
- 关键词：基因沉默前列腺素内过氧化物合酶类
