程金科
- 作品数：8 被引量：36H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺病毒介导的反义c-myc选择性诱导肿瘤细胞G1期阻滞和凋亡的研究被引量：15
- 1999年
- 目的 构建介导反义ｃｍｙｃ 的重组腺病毒，研究其对人肺腺癌细胞的细胞周期、增殖和凋亡的影响。方法 将ｃｍｙｃ 基因反向克隆于穿梭质粒载体ｐ Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ 中，通过脂质体与ｐ Ｊ Ｍ１７ 共转染２９３ 细胞，经同源重组产生编码反义ｃｍｙｃ 的重组腺病毒。体外观察和检测重组腺病毒感染人肺腺癌细胞系 Ｇ Ｌ Ｃ８２ 和 Ｓ Ｐ Ｃ Ａ１ 以及人胚肺二倍体细胞２ Ｂ Ｓ后，细胞周期的改变、凋亡的发生和相关基因表达的变化；体内观察对肿瘤细胞致瘤能力和裸鼠皮下移植瘤生长的影响。结果 构建并扩增、纯化得到编码反义ｃｍｙｃ 的重组腺病毒 Ａｄ Ａ Ｓｍｙｃ，滴度达３３ ×１０１０ 噬斑形成单位（ｐｆｕ）／ｍｌ。肿瘤细胞感染 Ａｄ Ａ Ｓｍｙｃ ３ ～５ 天后，逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 和 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 分析显示ｃｍｙｃ 基因表达下调；同时出现了明显的 Ｇ１ 期阻滞和凋亡， Ｇ１ 期正调控基因ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 表达下调，凋亡相关基因ｂｃｌ２ 和ｂａｘ基因的表达分别出现下调和上调；人胚肺二倍体细胞感染 Ａｄ Ａ Ｓｍｙｃ 后无上述变化。肿瘤细胞体外克隆形成能力和裸鼠皮下移植瘤生长被 Ａｄ Ａ Ｓｍｙｃ 抑制。结论 反义?
- 隗玥林晨张雪艳程金科邢嵘吴晣
- 关键词：腺病毒反义RNA肿瘤基因治疗
- 全文增补中
- 野生型p53基因重组体腺病毒介导的肿瘤抑制作用被引量：7
- 1999年
- 采用同源重组方法构建了野生型p53全长cDNA的重组体腺病毒.通过转导人卵巢癌细胞系SK-OV-3和黑色素瘤细胞系WM-983A,证实腺病毒能介导p53基因进行有效转移;并能显著抑制这两种肿瘤细胞的生长和集落形成能力,生长抑制率分别达到93％和86％.对两种肿瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的治疗实验表明,p53能明显抑制肿瘤的生长.流式细胞计数、DNA片段化及TUNEL分析证实,p53可诱导肿瘤细胞凋亡和G1期阻滞.结果显示p53重组体腺病毒是一种有良好前景的肿瘤基因治疗药物.
- 程金科林晨牟巨伟张雪艳邢嵘吴旻
- 关键词：腺病毒载体P53基因基因治疗
- 应用于基因治疗的重组体腺病毒的构建方法被引量：5
- 1997年
- 应用于基因治疗的重组体腺病毒的构建方法程金科林晨张雪艳吴（中国协和医科大学，中国医学科学院肿瘤研究所，北京１０００２１）ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｓｆｏｒＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙＣｈｅｎｇＪｉｎｋｅＬｉｎＣｈ...
- 程金科林晨张雪艳
- 关键词：基因治疗
- 腺病毒介导RA538基因转移及其肿瘤抑制作用
- 采用同源重组方法构建RA538 cDNA重组体腺病毒载体,通过转导人卵巢癌细胞系SK-OV-3和人黑色素瘤细胞系WM-983A,证实腺病毒可高效转导RA538基因,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其抑制率分别达85%和73%;...
- 程金科林晨张雪艳邢嵘牟巨伟隗纮王秀琴吴旻
- 关键词：腺病毒载体RA538人卵巢癌细胞人黑色素瘤细胞
- 文献传递
- 重组RA538腺病毒对人胃癌细胞的体内及体外分子治疗研究
- 1999年
- 目的：研究重组ＲＡ５３８腺病毒对胃癌细胞的体内外生物学作用。方法：采用ＬａｃＺ基因Ｘ－ｇａｌ染色、ＭＴＴ、克隆形成试验、ＤＮＡ梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪、裸鼠致瘤性、裸鼠皮下移植瘤模型实验等方法，对ＲＡ５３８重组腺病毒在人胃癌ＳＧＣ７９０１细胞系中的作用进行体内外研究。结果：Ａｄ－ＲＡ５３８对ＳＧＣ７９０１细胞产生明显的生长抑制作用，ＭＴＴ显示生长抑制率为７６．３％。ＤＮＡ梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪显示Ａｄ－ＲＡ５３８诱导了ＳＧＣ７９０１细胞凋亡。经Ａｄ－ＲＡ５３８处理的ＳＧＣ７９０１细胞裸鼠致瘤性消失。Ａｄ－ＡＳｃ－ｍｙｃ对裸鼠皮下移植瘤模型瘤内注射能有效降低肿瘤的生长速度，生长抑制率为６０．６６％。结论：Ａｄ－ＲＡ５３８对胃癌细胞具有显著的体内外生长抑制及凋亡诱导作用。
- 陈洁平徐采朴林晨张雪艳付明邓友平程金科吴旻
- 关键词：腺病毒基因治疗维甲酸胃肿瘤RA538
- 腺病毒载体的应用及进展被引量：8
- 1996年
- 腺病毒载体是近年来继逆转录病毒载体之后被广泛应用的一个基因运载系统。它具有宿主细胞广泛、繁殖滴度高、不整合及相对安全等特点,在基因治疗中发挥越来越大的作用。本文介绍了以E1区缺失为特征的第一代腺病毒载体应用的有效性、安全性等方面的研究情况,和旨在克服第一代腺病毒载体不足的第二代载体构建方面的进展。
- 程金科林晨吴旻
- 关键词：腺病毒载体病毒载体基因疗法
- 腺病毒介导RA538基因转移及其肿瘤抑制作用
- 1999年
- 采用同源重组方法构建RA5 3 8cDNA重组体腺病毒 ,通过转导人卵巢癌细胞系SK OV 3和人黑色素瘤细胞系WM 983A ,证实腺病毒可高效转导RA5 3 8基因 ,能显著抑制肿瘤细胞的生长 ,其抑制率分别达 85 %和 73 % ;并显著降低两细胞系的集落形成能力 .对两细胞系的裸鼠皮下移植瘤进行治疗实验结果表明 ,RA5 3 8能明显抑制肿瘤的生长 .流式细胞计数和DNA片段化分析证实 ,RA5 3 8可引起肿瘤细胞G1期阻滞和 /或凋亡 .对c myc蛋白的Westernblot分析发现 ,RA5 3 8有明显下调c myc基因表达的作用 .根据这些结果 ,我们认为RA5 3 8重组体腺病毒有可能成为有应用价值的肿瘤基因治疗药物 .
- 程金科林晨张雪艳邢嵘牟巨伟隗玥王秀琴吴旻
- 关键词：肿瘤基因转移腺病毒载体RA538基因治疗
- 腺病毒介导RA538基因转移及其诱导肿瘤细胞凋亡的研究被引量：1
- 2000年
- RA538是从维甲酸诱导终末分化的人食管癌细胞系中分离出的一个与分化相关的基因。通过重组体腺病毒将RA538基因成功地转导到人肺腺癌细胞系 (GLC - 82 )中 ,经X -gal染色证实转导效率达 10 0 % (MOI为 2 5) ,转导RA538基因后的GLC - 82肿瘤细胞生长受到明显的抑制 ,抑制率为 77 2 %。经流式细胞计数 (FCM)及TUNEL检测证实RA538可诱导肿瘤细胞发生凋亡 ,凋亡率为 59 4%。利用Westernblot法检测转导了RA538基因GLC - 82肿瘤细胞中癌基因蛋白发现 ,c -myc基因蛋白表达下调。结果提示 :RA538作为抑癌基因将有可能应用于肿瘤基因治疗。
- 邢嵘林晨牟巨伟程金科付明吴旻
- 关键词：腺病毒载体肿瘤基因治疗凋亡
