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免疫荧光双标法在小鼠表皮干细胞分子标记筛选中的应用被引量：3: 2011年; 目的用标记滞留细胞(LRCs)及免疫荧光双标记法进行小鼠表皮干细胞可靠分子标记的筛选。方法选择出生5 d的昆明小乳鼠进行腹腔注射5-溴,2-脱氧尿嘧啶(5-bromodeoxyuridine,BrdU),隔日注射,连续7 d。于注射后第90天进行取材,在冰冻切片上分别进行BrdU与整合素β1、P63和CD34的双重免疫荧光标记,观察这些标记物与BrdU的符合度。结果 90 d后小鼠皮肤上皮细胞中仍有少数阳性细胞,主要存在于毛囊的隆突部位,另有少数阳性细胞散落在基底层。免疫荧光双标的结果示,Brdu与整合素β1双标阳性的细胞占所有整合素β1阳性细胞的81%,占所有Brdu阳性细胞的94%;Brdu与P63双标阳性的细胞占所有P63阳性细胞的65%,占所有Brdu阳性细胞的86%;Brdu与CD34双标阳性的细胞占所有CD34阳性细胞的30%,占所有Brdu阳性细胞的62%。结论整合素β1与BrdU的符合率最高,P63其次。β1和P63是这些分子标记物中筛选干细胞最好的指标。; 陈萌任宁刘文君秦晓敏李劲松; 关键词：标记滞留细胞

二甲双胍抑制人前列腺癌细胞上皮间质转化及其作用机制被引量：3: 2013年; 目的研究二甲双胍对前列腺癌Vcap细胞增殖、侵袭及上皮间质转化（EMT）的影响，初步探讨microRNA（miRNA）相关的作用机制。方法以PBS处理组作为对照，使用不同浓度二甲双胍（1～50mmol／L）处理前列腺癌Vcap细胞，MTS比色法检测细胞的增殖能力；流式细胞术分析二甲双胍对Vcap细胞周期分布的影响；划痕和侵袭小室实验分别检测5mm01／L二甲双胍和miR30a对细胞迁移和侵袭能力的作用；使用RT—PCR和Westernblotting测定5mmol／L二甲双胍对Vcap细胞上皮指标物（E—cadherin、B—catenin）和间质指标物（Vimentin、Snail）mRNA和蛋白表达水平的影响；使用RT—PCR检测miR30a、miRl43、miRl85、miRl96、miR205的表达水平变化。结果二甲双胍抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖，且呈浓度和时间依赖性。5mmol／L二甲双胍明显影响Vcap细胞的周期分布并显著抑制Vcap细胞的迁移和侵袭能力。二甲双胍在mRNA和蛋白水平上，显著上调Vcap细胞中E—cadherin和[3-catenin的表达（P均〈0．05），下调Vimentin和N—cadherin的表达（P均〈0．05）。进一步的实验发现，二甲双胍显著上调milL30a的表达水平（P〈0．05），而后者可显著抑制Vcap细胞的增殖和EMT的发生。结论二甲双胍明显抑制前列腺癌Vcap细胞的增殖、侵袭能力和上皮间质转化的过程。该过程可能涉及二甲双胍对miR30a的表达的上调。; 张晶王林夏平钿秦晓敏韩博郭秀丽; 关键词：二甲双胍上皮间质转化前列腺肿瘤

HIF-1α、VEGF和MMP-9在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义被引量：3: 2013年; 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床病理关系。方法应用免疫组织化学PV-9000二步法检测60例子宫内膜样腺癌和30例良性子宫内膜对照组标本中HIF-1α、VEGF和M M P-9的表达,采用χ2检验进行分析,用Spearman相关性检验分析3个指标的关联性。结果 HIF-1α、VEGF和MMP-9在子宫内膜样腺癌中的阳性率高于良性子宫内膜对照组(P<0.05);在淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组:三者表达在子宫内膜样腺癌中呈正相关(P<0.05)。结论 HIF-1α、VEGF和MMP-9均在子宫内膜样腺癌中表达增高且呈正相关,并与肿瘤发展转移联系密切。; 邢海燕薛凤华秦晓敏张建平; 关键词：缺氧诱导因子-1Α 基质金属蛋白酶-9 子宫内膜样腺癌组织芯片

两种冷冻方法对人大块卵巢组织卵泡活性的影响被引量：3: 2013年; 目的探讨两种冷冻方法冻融人类大块卵巢组织的冷冻效果及对卵泡活性的影响。方法收集15例人卵巢组织,每例修剪成3块卵巢组织(约15 mm×15 mm×2mm),分别随机分配到新鲜对照组(A组)、玻璃化冷冻组(B组)、两步法冷冻组(C组),组织学分析3组卵泡形态学变化,并进行卵巢组织体外培养后测定培养液上清中雌激素、孕激素浓度,免疫组织化学染色测定培养后的卵巢组织细胞核增殖相关抗原Ki67及B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)表达水平,评估卵泡增殖及凋亡活性。结果 A组正常形态卵泡比率(91.9%)显著高于B组(71.3%)和C组(82.9%),差异有统计学意义(P<0.05),C组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组的始基卵泡和初级卵泡的正常形态率分别为86.8%、54.4%,均分别高于B组73.8%、44.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。同一时期3组激素测定结果差异不显著(P>0.05)。C组Ki67的阳性率为73%,分别显著高于A组50%和B组55%(P<0.05),A组低于B组(P<0.05)。Bcl-2阳性率,A组为57%和C组61%相比无差异(P>0.05),但B组42%阳性率分别低于A组和C组(P<0.05)。结论人体大块卵巢组织冻融后仍具有活性,并且两步法冻存效果优于玻璃化冷冻法。; 赵硕赵淑琴时庆秦晓敏韩亦龙晁岚邓晓惠; 关键词：卵巢组织 KI67 冷冻保存玻璃化冻存

DNA倍体图像分析用于评价宫颈非典型不成熟化生: 2008年; 目的:探讨DNA图像分析技术在评价宫颈非典型不成熟化生(AIM)生物学性质中的作用。方法:运用计算机图像分析软件测定宫颈非典型不成熟化生30例的DNA质量、非整倍体(AN)含量、DNA指数(DI),以40例良、恶性宫颈病变为对照,其中正常上皮组10例,CINⅠ组10例,CINⅢ组10例,宫颈鳞癌组10例。结果:DNA质量、非整倍体含量、DNA指数随病变严重程度的增加而升高,三者联合分析有助于评价病例的生物学性质,从30例宫颈非典型不成熟化生病例中筛选出2例,其DNA质量、非整倍体含量、DNA指数均达到CINⅢ组的均值水平,认为是高恶性潜能病例。结论:计算机分析技术方便客观,通过综合分析DNA质量、非整倍体含量和DNA指数有助于提示宫颈非典型不成熟化生病例的生物学性质,对高恶性潜能病例具有筛查作用。; 武杰孙秀彬孙育红杨雷英刘文君王妍衣向玮秦晓敏张娟杨敏张廷国; 关键词：DNA图像分析子宫颈

二烯丙三硫对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及与uPA系统关系的初探被引量：1: 2012年; 目的:研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物(uPA)系统的调节作用。方法:细胞增殖活性(MTS)比色法测定20、40、60μmol·L-1DATS处理前列腺癌PC-3细胞24、48、72h后PC-3细胞的增殖能力;细胞体外侵袭试验检测20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞侵袭能力的作用;划痕试验观察40μmol·L-1DATS处理PC-3细胞24h后PC-3细胞迁移能力;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法分别检测40μmol·L-1DATS作用PC-3细胞后的uPA、uPAR和PAI-1的mRNA及其蛋白表达水平。结果:20、40、60μmol·L-1DATS对PC-3细胞的生长均有较明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;DATS呈浓度依赖抑制细胞的浸润能力,其中40μmol·L-1与体内试验更接近;40μmol·L-1DATS明显抑制细胞的迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达无显著影响。结论:DATS抑制PC-3细胞的增殖、浸润和迁移,该效应可能与DATS显著上调PAI-1的表达有关系。; 张晶沈承武王春妮戚美周志强秦晓敏韩博; 关键词：二烯丙三硫前列腺癌 PC-3细胞 UPA UPAR

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秦晓敏

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