秦巧平
- 作品数:65 被引量:525H指数:14
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- 相关领域:农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 枇杷EJPFPb及其编码基因改善烟草糖水平的方法
- 一种枇杷EJPFP b 及其编码基因改善烟草糖水平的方法,按如下五个步骤进行:一是分离 克隆枇杷 EJPFP b 基因的cDNA片段序列,二是分离克隆枇杷 EJPFP b 基因的cDNA全长序列,三是枇杷 EJPFP b...
- 秦巧平崔永一林飞凡
- 文献传递
- 下一代测序cDNA样品制备及优化技术探讨
- 2010年
- 下一代测序技术目前已经应用于微生物、人类、动物、植物等的基因组分析。样品制备是开展大规模测序的必要前提和测序成功的根本保证。对大规模测序造成干扰的主要因素有:polyA干扰测序信号及高丰度基因对低丰度基因的掩盖等。文章以堇菜(Viola verecumda A.Gray)叶片为试材,提取总RNA,合成双链cDNA,利用DSN核酸酶对双链cDNA进行均一化处理,并对双链cDNA polyA进行了切除,将处理后的cDNA进行了TA克隆,挑取100个克隆随机测序。结果表明,未处理的cDNA样本测序有15个克隆由于polyA的存在而影响了附近碱基的正确阅读,独立克隆只有62个,而处理后的cDNA样本经测序未发现polyA,独立克隆有94个。序列分析发现,经过处理的cDNA样本随机测序有两个克隆是经MALDI-TOF检测在样本中有蛋白质峰,而基因克隆一直没有分离到的序列。以处理后的cDNA样本为模板扩增2个已知表达丰度差异较大的基因显示,处理后这2个基因的PCR扩增产量差异明显减小。这些结果表明polyA切除、DSN核酸酶处理的cDNA样本完全满足大规模测序、寻找新基因的要求。
- 秦巧平张岚岚李南羿崔永一徐凯
- 关键词:CDNA下一代测序
- 柑橘果糖激酶基因的克隆及表达被引量:5
- 2004年
- 植物果糖激酶(FRK)在果糖磷酸化中起重要作用。通过PCR技术从温州蜜柑(Citr usunshiu Marc.)基因组中扩增得到编码果糖激酶基因的2个基凶组DNA片段,分别命名为Cufrk1、Cufrk2,利用RT—PCR从果实中分离到了与Cufrk1外显子序列一致的cDNA序列,并通过RACE技术分离到这个基因的全长cDNA序列,命名为CuFRK1(GenBank号:AY561840)。Cufrk1与Cufrk2编码氨基酸序列相似性为68%。CuFRK1 cDNA全长为1459bp,5'端和3’端的非翻译区分别为167bp和239bp,该序列含有一个完整的开放读码框,编码350个氨基酸,蛋白质分子量约为37.5kD,等电点为5.03,含有2个果糖激酶糖特异结合域及3个ATP结合域,其氨基酸序列与其他植物中已分离的果糖激酶基因相似性在62%~78%:Northern分析显示,CuFRK1(Cufrk1)与Cufrk2在柑橘幼叶、发育初期果实中表达量较高,在果皮和茎中不表达,在化瓣及成熟果实中表达模式有一定差异。酶活性分析表明,果实中的果糖激酶活性随果实的发育而降低,同时,果实中的果糖不断积累,在果实整个发育过程中果糖含量与果糖激酶活性呈极显著负相关。
- 秦巧平张上隆陈俊伟谢鸣金勇丰陈昆松SyedASGHAR
- 关键词:柑橘果糖激酶
- 枇杷果实糖酸积累的分子生理机制被引量:32
- 2012年
- 糖酸含量及糖酸比是果实品质的重要指标。糖不仅决定果实甜度,也是色素、氨基酸、维生素和芳香物质等其他营养成分合成的基础原料。果实有机酸与糖一起形成糖酸比,决定果实风味,同时,果实有机酸作为呼吸底物为合成其他物质提供基础。糖酸比是影响果实口感的最主要因子。对糖酸代谢机制的阐明可为果树栽培管理及高品质育种提供理论依据。文章综述了近年来国内外有关枇杷Eriobotrya japonica糖酸代谢的生理学、分子生物学及栽培措施对糖酸积累的影响等方面的研究进展,并结合笔者的研究经验提出未来在枇杷糖酸代谢机制与调控方面的主要研究重点:进一步明确栽培措施和环境因子对果实糖酸代谢的影响及分子机制;探明果实糖、酸运输的分子机制;应用遗传工程调控果实糖酸组成;探明糖积累与酸积累的相互作用机制。
- 秦巧平林飞凡张岚岚
- 关键词:园艺学枇杷果实有机酸代谢机制
- 枇杷液泡转化酶及其编码基因改善烟草糖水平的方法
- 一种枇杷液泡转化酶及其编码基因改善烟草糖水平的方法,按如下五个步骤进行:一是分离克隆枇杷液泡转化酶基因的cDNA片段序列,二是分离克隆枇杷液泡转化酶基因的cDNA全长序列,三是枇杷液泡转化酶基因双元表达载体的构建,四是烟...
- 秦巧平张岚岚赖齐贤
- 文献传递
- 转化酶和己糖激酶调控草莓聚合果内糖积累被引量:18
- 2007年
- 以设施栽培的草莓品种‘枥乙女’为试材,用高效液相色谱法分析了果实发育进程中草莓聚合果内不同部位糖含量及相关酶活性的变化。果实成熟过程中草莓聚合果果顶部分含糖量高,中间部位次之,果柄端最低。转化酶活性呈现与糖含量相似的梯度变化。己糖激酶和果糖激酶则表现出与糖梯度相反的变化。上述结果表明,聚合果顶端转化酶活性高,有利于形成蔗糖梯度,从而促进光合产物向果顶端转移;聚合果近果柄端的己糖代谢酶活性高,促进果柄端的己糖消耗,导致果柄端相对低的糖含量。
- 谢鸣陈俊伟秦巧平蒋桂华孙崇波张慧琴徐红霞
- 关键词:转化酶果糖激酶己糖激酶糖积累
- 壳聚糖魔芋葡甘聚糖复合涂膜对白沙枇杷保鲜效果的影响被引量:7
- 2016年
- 将白沙枇杷[Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.]果实浸泡在不同浓度的壳聚糖和魔芋葡甘聚糖复配剂中60 s,置于4℃低温冷藏,观测了复配剂对白沙枇杷的保鲜效果。结果表明,1%壳聚糖+0.5%魔芋葡甘聚糖涂膜可显著抑制白沙枇杷失重率和腐烂率的上升,延缓可滴定酸、可溶性固形物和维生素C(VC)含量的下降,减少褐变指数,可较好地保持白沙枇杷采后品质,低温贮藏2个月以上仍然有较好的口感。
- 冯若瑶杨亚卉王衍鹏秦巧平
- 关键词:壳聚糖魔芋葡甘聚糖涂膜
- 浙江发展精品柑橘产业存在的问题及对策被引量:2
- 2010年
- 柑橘是浙江的传统特色水果,产量占中国宽皮柑橘总量的20%左右,世界宽皮柑橘总量的10%,橘瓣罐头加工出口量占世界的60%,在浙江省水果面积、产量、产值中分别占39.0%、
- 张岚岚肖金平秦巧平徐凯徐春燕高洪勤
- 关键词:柑橘产业特色水果罐头加工出口量
- 杨梅酸性转化酶基因cDNA分离及表达分析被引量:4
- 2006年
- 杨梅果实富含蔗糖,酸性转化酶是蔗糖代谢关键酶,根据植物酸性转化酶基因保守区序列设计引物,提取杨梅叶片RNA,逆转录获得cDNA,以此为模板通过PCR技术扩增到长度为516bp的基因片段,克隆入pMD18-T载体中,命名为MrIVR1(GenBank:DQ339699)。测序及同源性检索表明,该基因推导氨基酸序列与君子兰、葡萄、草莓、胡萝卜等酸性转化酶基因氨基酸序列同源性为60%~69%。运用ClustalX软件对植物转化酶基因进行了系统树分析,结果显示,MrIVR1编码的蛋白质属于细胞壁酸性转化酶。半定量RT-PCR表达分析显示,MrIVR1基因在杨梅果实发育早期表达量最高,随着果实的发育表达量下降,在成熟果实中表达水平较低。
- 秦巧平陈俊伟程建徽刘晓坤谢鸣张上隆
- 关键词:杨梅酸性转化酶基因克隆
- 不同有色膜对丰香草莓再生的影响及机理研究被引量:11
- 2005年
- 以丰香草莓叶片为材料,MS附加1.5 mg·L-1TDZ和0.4 mg·L-1IBA为基本培养基,研究了不同有色膜对草莓再生的影响,并对其机理进行了探讨.结果表明,绿膜和红膜对不定芽再生有明显的促进作用,其再生率达95%以上,平均每个外植体再生芽数25个以上;而蓝膜和黄膜则不利于芽的分化.分析发现,不同有色膜光波差异主要集中在300~700 nm,红、绿膜在该波段光强较弱,而黄、蓝膜和荧光下较强.红膜和绿膜有较高的叶绿素含量,较低的Chl a/b比值.抗氧化酶的活性以红膜最高,绿膜其次,黄膜最低;而丙二醛(MDA)的含量则相反.内源激素与草莓离体器官的发生之间关系密切,培养15 d后,红、绿膜和荧光下赤霉素(GA3)的含量较高;45 d后,GA3和玉米素(ZT)的含量以红、绿膜处理最高,而吲哚乙酸(IAA)的含量以黄膜和蓝膜下的较高.
- 秦永华ZHANG Shang-long 秦巧平吴延军徐凯
- 关键词:有色膜丰香草莓植株再生抗氧化酶吲哚乙酸玉米素