王璐 作品数:60 被引量:257 H指数:10 供职机构: 中国农业科学院茶叶研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家茶叶产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 理学 医药卫生 更多>>
茶树钙依赖性蛋白激酶基因CsCDPK17的鉴定及表达分析 被引量:7 2019年 钙依赖型蛋白激酶(Calcium-dependent protein kinases,CDPKs或CPKs)是植物细胞中重要的钙离子信号受体,普遍参与了植物生长发育和胁迫响应等调控过程。本研究从茶树龙井43中克隆到1条CDPK基因,经测序验证该序列包含1611bp的完整ORF,编码536个氨基酸。结合序列比对和进化分析发现该蛋白N-末端具有豆蔻酰化位点,具备钙依赖性蛋白激酶的保守结构域,并且与拟南芥AtCDPK17的同源关系最近,因此命名为CsCDPK17(Genbank登录号为:MK238482)。蛋白质理化特性分析发现其蛋白分子量为59.9kD,理论等电点pI为5.43,属无跨膜结构域的亲水性蛋白。使用水稻原生质体和烟草叶片两种瞬时表达的方法均证明CsCDPK17是细胞质膜和细胞核双定位蛋白。对克隆到的CsCDPK17上游2000bp的启动子区分析发现了多个与基因转录、光、激素(ABA、SA、MeJA等)相关的顺式作用元件。表达分析显示,CsCDPK17在成熟叶和种子中表达水平较高,而在根中的表达水平最低;在龙井43、大面白等4个品种冷驯化过程中,该基因的表达随着冷驯化过程显著上调,随着脱驯化过程下调;同时还发现CsCDPK17能够不同程度地响应低温(最高5.1倍)、干旱(最高2.3倍)、渗透(最高2.4倍)胁迫。本研究的结果表明CsCDPK17在茶树的生长发育和低温、干旱、渗透等非生物胁迫响应的过程中均发挥一定的调控作用。 雷蕾 王璐 姚丽娜 郝心愿 曾建明 丁长庆 王新超 杨亚军关键词:茶树 亚细胞定位 非生物胁迫 茶树开花基因CsFT及其编码蛋白 茶树开花基因<I>CsFT</I>及其编码蛋白,属于分子生物学技术领域。本发明提供一种茶树开花基因<I>CsFT</I>转录本<I>CsFTa、</I>转录本<I>CsFTb</I>及其编码蛋白,并利用该基因构建植物表达... 郝心愿 王新超 杨亚军 王璐文献传递 猪轮状病毒NSP4蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的鉴定 猪轮状病毒(PoRV),属呼肠孤病毒科轮状病毒属,是引起各种幼龄动物腹泻的主要病原之一。猪轮状病毒常与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)混合感染,引起哺乳仔猪的严重腹泻,出现呕吐、脱水、高热,死... 王璐关键词:猪轮状病毒 MAB 抗原表位 文献传递 茶树生长素受体基因CsTIR1的克隆与表达分析 被引量:9 2015年 吲哚-3-乙酸(又称IAA或生长素),在植物生长发育中具有重要的调控作用,其作用主要通过信号转导途径来完成。生长素受体是其信号转导的关键元件之一。本研究通过RACE克隆,获得了茶树中生长素受体Cs TIR1基因的c DNA全长序列(NCBI登录号:JX050147)。Cs TIR1序列全长2 315 bp,含1 746 bp的完整开放阅读框,编码581个氨基酸,预测分子量65.18 k D,理论等电点(p I)5.64。茶树Cs TIR1与烟草TIR1的相似性最高达82%,亲缘关系最近。Cs TIR1含有1个F-box结构域和6个LRR结构域,三级结构形如"蘑菇状"。Cs TIR1在茶树的根、茎、叶和花中具有组织表达特异性;其表达受IAA诱导,3种不同浓度的IAA均能诱导Cs TIR1上调表达,且在50μmol·L-1浓度下表达量最大;ABA、GA3、Me JA和BR等激素也能够显著上调其表达;Cs TIR1在越冬休眠芽中的表达量低,在活跃期中上调表达。 曹红利 岳川 周艳华 王璐 郝心愿 曾建明 杨亚军 王新超关键词:茶树 植物激素 生长素 芽休眠 外源Ca2+及钙离子信号抑制剂对茶树抗寒性的影响 被引量:14 2015年 钙离子信号通路在植物抗寒响应中起着重要作用。为了解钙离子信号通路与茶树抗寒性之间的关系,采用人工气候室模拟低温胁迫和外源施用钙调素(CaM)抑制剂W-7[N-(6-Aminohexyl)-5-chloro-1-naphthalenesulfonamide]、钙信号通道抑制剂LaCl_3及CaCl_2溶液的方法,测定了低温胁迫下茶树叶片各种与抗寒相关的生理指标的变化情况。检测结果表明,钙离子信号抑制剂W-7、LaCl_3处理均能提高茶树叶片相对电导率,提高茶树叶片中丙二醛(MDA)、超氧阴离子自由基(O_2·^-)、脯氨酸的含量,抑制超氧化物歧化酶(SOD)的活性;而CaCl_2溶液处理茶树叶片相对电导率及叶片中MDA、超氧阴离子自由基和脯氨酸的含量降低,SOD活性提高。表明钙离子信号系统在茶树抗寒过程中发挥了重要作用。 黄玉婷 钱文俊 王博 曹红利 王璐 郝心愿 王新超 杨亚军关键词:茶树 抗寒 CA2+ 萌芽前叶面喷施硒酸钠提高茶叶含硒量及品质 被引量:2 2022年 【目的】探究在茶树不同生育时期叶面喷施不同硒肥对夏茶产量、品质及硒含量的影响,为生产富硒茶提供技术依据。【方法】田间试验在浙江嵊州进行,供试茶树品种为‘中茶108’。试验采用二因素列区设计,主处理为硒肥种类(A因素),副处理为硒肥喷施时期(B因素)。主处理设喷施清水对照(A0)、硒酸钠(A1)、亚硒酸钠(A2)和酵母硒(A3);副处理设夏茶顶芽萌发前(5月12日,B1)与1芽1叶期(5月20日,B2)两个喷施时期。硒肥喷施浓度均为Se 50 mg/L,硒肥溶液喷施量为1.8 L/m^(2)。当茶树蓬面1芽2叶占比达30%左右时,每个小区随机选取30 cm×30 cm茶蓬,调查蓬面新梢总数、1芽2叶数量、1芽2叶长度和百芽重。同时,取1芽2叶新梢样品,测定茶多酚、儿茶素、咖啡碱、游离氨基酸、花青素以及硒含量。【结果】与A0B1处理相比,A3B1处理茶树萌展值显著降低了0.14,但对茶树蓬面新梢总数无明显影响;A2B1处理茶树1芽2叶新梢长度和百芽重分别显著降低了1.04 cm和1.94 g。A1B2和A3B2处理茶树蓬面新梢总数分别显著降低了17.66和22.33,但不影响其萌展值;A1B2显著降低茶树1芽2叶新梢长度和百芽重,分别降低0.88 cm和1.70 g。A1B1和A2B1处理的茶叶总硒含量分别显著提高了1.15和1.47 mg/kg,有机硒含量分别显著提高了1.13和1.38 mg/kg,但A3B1处理未显著提高茶叶硒含量。A1B2、A2B2和A3B2处理均显著提高了茶叶总硒和有机硒含量,其中总硒增加量分别为5.97、7.88和2.61 mg/kg,有机硒含量分别增加了5.17、7.51和2.48 mg/kg。另外,A1B1显著降低了茶叶咖啡碱、没食子酸和儿茶素含量;A1B2处理显著降低了茶叶游离氨基酸含量,但显著增加了茶多酚和儿茶素总量,儿茶素组成中的没食子酸、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯等酯型儿茶素显著增加。【结论】夏茶萌芽前喷施外源硒能够提高茶叶总硒和有机硒含量,改善茶� 李晓嫚 郭丽娜 郝心愿 王璐 王月琪 王新超 岳川 曾建明关键词:茶叶 喷施时期 酵母硒 硒含量 茶叶品质 茶树Copine家族基因CsBON3的克隆与表达分析 被引量:1 2017年 Copine蛋白是一类包含2个C2(N端)和1个vWA(C端)保守域的Ca^(2+)依赖蛋白或磷脂结合蛋白,在胞内信号转导中发挥重要作用。基于序列相似性分析,从茶树转录组数据库中筛选出1条与Copine家族基因高度同源的EST序列。经测序验证该序列包含1 746 bp的完整ORF,编码581个氨基酸。同源比对显示该基因与拟南芥At BON3序列相似度最高(65%),将其命名为CsBON3(Gen Bank登录号为KY435900)。生物信息学分析显示,CsBON3蛋白分子量为63.66 k D,理论等电点为5.48;具有Copine家族蛋白特有的保守结构域;属亲水性蛋白,无信号肽位点,非分泌性蛋白,无跨膜结构域。表达分析表明,CsBON3在茶树花和根系中表达量最高,茎干和成熟叶中表达量最低。低温(4℃)处理茶树1 d后,其表达被显著上调;在生长阶段,该基因表达量高于休眠阶段;同时在接种炭疽菌的茶树叶片中,该基因也被快速上调,表明该基因可能与茶树低温、生长发育及抗病相关。 姚利娜 郝心愿 王璐 李娜娜 曾建明 杨亚军 王新超关键词:茶树 休眠 茶树CsPHT1;3基因特性及其对硒的响应研究 2023年 茶树具有较强的富硒能力,有关磷酸盐转运体参与硒吸收的分子机理研究较少。克隆茶树CsPHT1;3基因,并探究该基因的特性及对硒浓度和价态、pH、时间的响应,以及在不同聚硒茶树品系中的表达情况。基因特性分析表明,CsPHT1;3属于磷酸盐转运蛋白PHT1亚家族成员,定位于质膜且具有PHT1蛋白保守结构域GGDYPLSATIxSE。在不同器官中表达模式分析表明,CsPHT1;3在成熟叶和根中表达量显著高于其他器官。不同浓度和价态硒诱导结果表明,CsPHT1;3在茶树根系中于1 d和7 d显著受低浓度Se^(4+)诱导表达;除处理后3 d外,茶树根系中CsPHT1;3显著受Se^(6+)诱导上调表达且基本不受Se^(6+)浓度影响。不同pH处理茶树结果表明,茶树根系中CsPHT1;3在pH=5时对Se^(4+)响应于24 h达最高;在pH=3时对Se^(4+)响应于48 h达最高;而在pH=7时,对Se^(4+)响应于72 h达最高。硒酸钠处理不同聚硒茶树品系结果表明,CsPHT1;3在不同品系的叶和根中的表达均不响应硒酸钠处理;而亚硒酸钠处理不同聚硒茶树品系结果表明,CsPHT1;3在高聚硒品种叶中显著上调表达。以上研究结果表明,CsPHT1;3可能参与茶树根系对亚硒酸盐的吸收和再分配,其对富硒茶树品系的选育具有重要意义。 郭丽娜 郝心愿 王璐 祁蒙 李晓嫚 任恒泽 郑青华 王新超 曾建明关键词:茶树 亚硒酸盐 硒 PH 茶树己糖转运体基因CsSWEET1a的应用 本发明公开了一种茶树己糖转运体基因CsSWEET1a在提高植物耐低温能力中的应用,通过在拟南芥中过表达该基因进行生物学功能验证,证明所述CsSWEET1a基因通过提高植物体内的蔗糖和葡萄糖含量,提高拟南芥的低温抗性,为培... 王璐 姚利娜 王新超 杨亚军文献传递 茶树β-淀粉酶基因CsBAM3的克隆及其响应低温的表达模式 被引量:7 2017年 β-淀粉酶(BAM)是植物中参与淀粉水解的关键酶类,在应对非生物胁迫中发挥重要作用。从前期茶树冷驯化转录组分析中分离到1个参与淀粉代谢的差异表达基因,cDNA全长克隆及序列分析鉴定该基因为拟南芥BAM3同源基因,命名为CsBAM3。该基因编码548个氨基酸残基,与拟南芥的BAM1和BAM3一起归为第Ⅱ亚家族,推测为叶绿体定位、具有淀粉水解活性的β-淀粉酶编码基因。启动子克隆及序列分析显示该基因可能受生理节律、光、低温及多种激素等信号共同调控。CsBAM3在叶片中表达量最高,茎和花中表达量较低,根中基本不表达。CsBAM3在冷驯化初期被显著上调且一直保持相对较高的水平。成熟叶片及嫩芽(一芽二叶)中的CsBAM3均可以被4℃及0℃低温显著上调,且嫩芽中基因的表达量上调幅度明显高于成熟叶。模拟倒春寒低温条件下,检测不同萌发阶段新梢中CsBAM3的表达情况表明,CsBAM3在鲜叶初展的嫩芽中即可快速受低温诱导。以上结果表明,CsBAM3是茶树中调控淀粉水解的一个重要β淀粉酶编码基因,在茶树成熟叶和嫩芽受到不同低温胁迫时其表达可被快速诱导。 郝心愿 岳川 唐湖 钱文俊 王玉春 王璐 王新超 杨亚军关键词:茶树 基因克隆 低温胁迫