王璐
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：北京科技大学应用科学学院生物科学与技术系更多>>
- 发文基金：北京市教育委员会共建项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 调节胆固醇代谢的新药物靶点LXR被引量：4
- 2009年
- 本文对细胞核受体LXRs(Liver X Receptors)及其天然和人工合成配体的发现进行了系统简介,着重描述了部分激动剂的药理作用,及其作为胆固醇代谢调节因子在疾病动物模型上的初步验证。LXR选择性激动剂可以对动脉粥样硬化和老年痴呆症的延缓及预防起积极作用,有潜力成为临床治疗药品。
- 王璐谢元翼李雪蔡怀涵王小岩刘旭东宋青
- 关键词：胆固醇老年痴呆
- 细胞核受体LXRβ的体外酶标测活方法的建立与应用
- 2010年
- 目的:克隆并表达大鼠细胞核受体LXRβ配体结合区(LBD)序列,并进行配体依赖性受体与共激活因子结合区短肽相互作用的酶标法分析,建立简易经济可靠的体外高通量筛选LXR调节剂方法。方法:从含大鼠LXRβcDNA序列的pSG5/rLXRβ上扩增LBD区序列,测序核实序列后,将此序列克隆入表达载体,构建原核表达载体pET28a(+)-rLXRβ-LBD;将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白,通过SDS-PAGE、Western blotting检测及Ni2+亲和层析柱分离纯化;建立ELISA方法检测配体依赖性受体-共激活短肽相互作用。结果:重组蛋白rLXRβ-LBD在大肠杆菌中高效表达(占菌体总蛋白30%),SDS-PAGE显示在36kDa处有免疫特异性蛋白,纯化后全长蛋白占90%以上。ELISA结合测试显示在激动剂猪脱氧胆酸二甲酰胺存在时,rLXRβ-LBD能与共激活短肽结合,亲和力与双荧光酶报告基因测活结果吻合。结论:成功克隆并表达rLXRβ-LBD序列,建立起ELISA筛选方法,为LXR-LBD配体功能活性的研究和配体的高通量筛选提供新方法。
- 蔡怀涵王璐谢元翼刘旭东宋青
- 关键词：LXR胆固醇高通量药物筛选
