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王文静: 作品数：21 被引量：56H指数：5; 供职机构：中国农业科学院烟草研究所更多>>; 发文基金：中国烟草总公司科技项目中央高校基本科研业务费专项资金国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>

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烟草根系分泌物对烟草疫霉菌的抑制作用被引量：5: 2018年; 为明确烟草根系分泌物对烟草疫霉菌的影响,采用液相色谱-质谱联用仪(Liquid chromatograph-mass spectrometry,LC-MS)检测小黄金1025和革新3号根系中共有分泌物含量的变化。通过菌落生长、孢子囊形成、菌丝生长量明确含量差异较大的5种共有根系分泌物对烟草疫霉菌的抑制效果,并利用盆栽试验检测其对烟草黑胫病的防治效果。结果表明,共有根系分泌物中,含量差异较大的化合物为酒石酸、二硝托胺、茉莉酮、棕榈酸和油酸。在低浓度(100μg/mL)条件下,5种化合物对烟草疫霉菌均具有显著的抑制效果,且随浓度的增加其抑制效果增强。酒石酸对菌丝生长、孢子囊形成的抑制率分别为36.72%和50.16%,棕榈酸对菌丝生长量的抑制率为59.86%。酒石酸和棕榈酸对烟草黑胫病的防治效果分别为53.11%和52.70%。因此,烟草根系分泌物中存在抑制烟草疫霉菌生长的物质,且能够在一定程度上防治黑胫病的发生。; 冯超战徊旭崔萌萌徐传涛王静王文静王晓强陈德鑫; 关键词：烟草根系分泌物

植物病原菌效应蛋白与茉莉素信号途径互作的研究进展被引量：1: 2016年; 茉莉素信号途径是植物抗病信号途径的重要组成部分,病原菌的致病过程与茉莉素信号途径密切相关。近几年来,植物病原菌效应蛋白在侵染植物过程中与茉莉素信号途径关键组分的互作研究取得了深入快速的发展。本文分别就植物细菌病原菌、真菌病原菌和卵菌病原菌在致病过程中与寄主茉莉素信号途径相互作用的最新研究进展加以概述,以期对相关领域的研究起到一定的启迪作用。; 丁永强张鼎宇尹国英张洁石小于王凤龙陈德鑫王文静; 关键词：病原菌

恩施烟区烤烟黑胫病菌致病力测定及抗性品种差异鉴定被引量：2: 2018年; 为有效进行恩施烟区烟草黑胫病的防控,本研究采用菌丝块茎基部创伤接种法鉴定了恩施烟区烟草黑胫病菌的致病力。根据黑胫病菌菌株接种K326、红花大金元、云烟202后的AUDPC(病害流行曲线下面积)数值进行了聚类分析,将恩施烟区烟草黑胫病菌划分为I、II、III 3种致病型。3种致病型病原菌没有表现出典型的强、中、弱致病特性。7个抗性烟草品种对不同致病型黑胫病菌表现出抗性差异,革新3号对3种致病型菌株均表现出较好的抗性。; 黎妍妍黎妍妍王文静王林周红审周红审陈德鑫李锡宏; 关键词：黑胫病菌致病力抗性差异

甘蓝型油菜COI1的调控功能分析被引量：7: 2015年; 【目的】研究甘蓝型油菜中茉莉素受体复合体核心成员CORONATINE INSENSITIVE 1(COI1)蛋白的基因表达特性及生理调控功能。【方法】利用基因组数据分析甘蓝型油菜及其亲本种白菜和甘蓝基因组的COI1构成情况;使用定量和半定量RT-PCR扩增方法检测油菜COI1的组织特异性表达;克隆油菜COI1保守区片段,构建病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)载体,以农杆菌侵染方法培育VIGS诱导COI1沉默的油菜植株,然后,用鉴定出的COI1沉默植株研究油菜COI1在育性调控及虫害抗性等方面的调控功能。【结果】基因组数据分析表明,甘蓝型油菜亲本种白菜和甘蓝共有7个高度同源的COI1,依序列同源性可分为4类:COI1a、COI1b.1、COI1b.2和COI1c;甘蓝型油菜有8个COI1,也由上述几类同源基因组成。半定量和定量RT-PCR扩增试验表明甘蓝型油菜COI1在茎中的表达水平最低。从培育的VIGS诱导COI1沉默油菜中,共鉴定出COI1表达水平被抑制超过70%的株系25个,其中抑制效果最明显的10个株系被用于育性调控及蚜虫抗性试验。育性分析结果证明,VIGS沉默COI1油菜的结实能力受到严重影响,其角果在授粉20 d以后的长度只达到对照油菜角果授粉5 d后的长度,且角果中无正常种子;沉默COI1油菜的雄蕊长度短于相同花期的对照油菜雄蕊,其花药开裂延迟;显微观察发现,沉默COI1油菜的花粉中有超过80%呈不正常形态。在相同处理条件下进行的蚜虫抗性比较试验中,沉默COI1油菜叶片上的蚜虫数量超过对照油菜1倍多,而且有很多小蚜虫围绕大蚜虫的虫落,繁殖态势比对照油菜叶片上的蚜虫旺盛。【结论】甘蓝型油菜COI1具有组织特异表达特性,沉默COI1会导致油菜雄性不育性状发生,并降低油菜植株对蚜虫的抗性。; 王文静杨小川丁永强尹国英马浩然张洁石小于张鼎宇李加纳张洪博; 关键词：甘蓝型油菜 COI1 茉莉素雄性不育

一种白粉病的防治药剂: 本发明属于植物病害防治技术领域，涉及一种白粉病的防治药剂。本发明提供的一种白粉病的防治药剂包括下述重量份的有效成分：磷酸三钾1‑5份、脂肪酸1‑2份，脂肪酸为油酸、亚油酸、硬脂酸、亚麻酸、花生酸中的任一种；此防治药剂为溶...; 张洪博张忠锋王文静刘艳华刘晓峰杜咏梅; 文献传递

短小芽孢杆菌AR03挥发性有机物的抑菌活性及其组分分析被引量：19: 2018年; 【目的】对分离自烟草根际土壤中的一株短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)AR03菌株产生的挥发性有机物进行抑菌活性测定和组分分析。【方法】采用培养皿对扣熏蒸法和凹玻片孢子萌发法测定挥发性有机物对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)和赤星病菌(Alternaria alternata)菌落、菌丝生长以及孢子萌发的影响,采用离体叶片接种法测定挥发性有机物对烟草黑胫病和赤星病的防治效果;采用顶空加热法收集抑菌挥发性有机物,对其进行气相色谱-质谱(GC-MS)检测,并结合保留指数(retention index,RI)和内标(internal standard,IS)1-十五烯对其组分进行定性和定量分析。【结果】短小芽孢杆菌AR03菌株分泌的挥发性有机物对供试的两种病原真菌均具有一定的抑制作用,表现为经处理后的烟草黑胫病菌菌丝生长稀疏缓慢变粗、分支增多且扭曲、断裂;赤星病菌菌丝生长畸形,其上不产生分生孢子梗,内含物大部分聚集成团导致菌丝干瘪、缢缩。对峙培养2、4、6和8 d时,挥发物对黑胫病菌和赤星病菌菌丝生长的抑制率分别为56.21%和59.23%、64.75%和59.86%、66.13%和61.10%、67.04%和70.00%;对黑胫病菌游动孢子和赤星病菌分生孢子的抑制作用表现为延迟萌发且萌发后的芽管生长缓慢;黑胫病菌产生孢子囊数明显减少,赤星病菌分生孢子各分隔处的细胞畸形肿胀成泡状。离体叶片抗病测定结果显示,挥发性有机物抑制黑胫病菌和赤星病菌病斑在叶片的扩展,对峙熏蒸40 h时,对照叶片黑胫病的发病率为92.50%,圆形坏死病斑直径是25.10 mm,经挥发物处理后叶片发病率为70.83%,病斑直径为9.45 mm,对黑胫病斑扩散的抑制率为62.35%;对峙熏蒸80 h时,对照叶片赤星病的发病率为88.33%,病斑扩散为近圆形的褐色坏死斑,平均直径为8.32 mm,经挥发物处理后赤星病的发病率为60.80%,病斑扩展较慢,平均直径为2.85 mm,挥发�; 王静曹建敏陈德鑫邱军王晓强冯超王文静; 关键词：挥发性有机物烟草黑胫病菌烟草赤星病菌

烟草PR3b转录后剪切元件NRSE1与GUS融合表达后的可变剪切: 2020年; 【目的】烟草(Nicotiana tabacum L.)碱性几丁质酶基因PR3b在低烟碱突变体(nic1和nic2)中存在转录后mRNA可变剪切现象,但其可变剪切的发生机制仍不清楚。将PR3b的可变剪切元件NRSE1(nicotinesynthesis related splicing element 1)与GUS融合表达,分析NRSE1元件的独立可变剪切特性,以揭示其作用机制。【方法】利用PCR扩增方法获得PR3b cDNA序列中的NRSE1元件片段,并利用基因重组技术构建了烟草PR3b可变剪切元件NRSE1与GUS的融合表达载体。将融合表达载体导入农杆菌LBA4404后,通过农杆菌介导的叶盘转化法培育了表达NRSE1与GUS融合子的低烟碱突变体nic1和nic2及野生型烟草转基因植株;通过RT-PCR检测及GUS染色鉴定出阳性植株后,利用RT-PCR分析NRSE1与GUS融合表达后在低烟碱突变体和野生型烟草中的可变剪切特性;对转基因植株的幼苗进行乙烯(ET)和茉莉酸(JA)处理,通过GUS染色方法分析ET和JA处理对转基因植株中GUS活性的影响,并通过RT-PCR方法分析ET和JA处理对转基因植株中NRSE1与GUS融合子的可变剪切特性影响,以及对转基因植株中NRSE1与GUS融合子表达水平的影响。【结果】通过RT-PCR检测及GUS染色鉴定出表达NRSE1元件与GUS融合子的低烟碱突变体和野生型烟草转基因植株;RT-PCR检测及测序分析证明,NRSE1元件与GUS融合表达后仍能在低烟碱突变体发生高水平的可变剪切,剪切修饰区段的序列变化与烟草中PR3b的mRNA可变剪切修饰一致;利用ET和JA处理转基因植株进行的GUS染色表明,ET和JA处理对转基因植株的GUS活性有不同程度的影响;但利用ET和JA处理转基因植株进行的RT-PCR分析表明,ET和JA处理不改变NRSE1元件原有的诱导剪切特性,也不影响转基因植株中NRSE1元件与GUS融合子的表达水平。【结论】PR3b的可变剪切元件NRSE1与GUS在烟草中融合表达后,仍能在低烟碱突变体nic1和nic2中发生高水平的可变剪切;NRSE1在烟草�; 赵雪王锋王文静刘晓峰卞士权刘艳华刘新民杜咏梅张忠锋张洪博; 关键词：烟草茉莉酸

酸碱度对烟草青枯菌生长特性的影响被引量：5: 2018年; 为探究酸碱度对烟草青枯菌生长特性的影响,在混合青枯菌的不同酸碱度土壤中测定烟草青枯病的发病情况。应用qRT-PCR方法测定不同酸碱度条件下烟草青枯菌的消长动态,通过结晶紫法和半固体培养基法分别测定青枯菌的生物膜和运动性在不同酸碱度条件下的变化。结果表明:烟草青枯病在弱酸性和中性(pH 6.0~7.0)土壤中发病严重。烟草青枯菌的消长动态结果显示,青枯菌数量在pH 6.5的土壤中最多,为9.1×108cfu·g^(-1) FW。烟草青枯菌生物膜成膜能力在pH 5.5时最强,pH 7.0时最弱。pH6.5时烟草青枯菌的运动性最强,pH 8.0时最弱。土壤酸碱度通过影响青枯病菌的消长、成膜能力和运动性进而影响烟草青枯菌对烟株的侵染。; 王贻鸿赵云峰孔凡玉王新伟陈德鑫冯超王文静王晓强王静; 关键词：烟草青枯病酸碱度

酵母表面展示系统的改进及其在筛选烟草PMT基因启动子结合蛋白中的应用: 2014年; 筛选DNA结合蛋白常用的酵母单杂交系统在应用中有时会因内源干扰而影响筛选结果。与之相比,酵母表面展示系统(yeast surface display system)将外源蛋白展示在细胞表面,可通过接近体外实验的方法筛选DNA结合蛋白,能在一定程度上避免酵母内源干扰,但是,该系统在DNA结合蛋白筛选研究中的应用还很有限。本研究对酵母表面展示系统常用载体p YD1进行改造,使其与Clontech公司的Smart cDNA文库构建系统相匹配,提高了cDNA酵母表面展示文库的构建效率,并通过比较试验建立了一个以酵母表面展示系统筛选DNA结合蛋白的试验体系。在以酵母单杂交筛选烟草腐胺甲基转移酶基因PMT(putrescine N-methyltransferase)启动子结合蛋白的研究中,其茉莉素信号应答元件GAG片段是一段筛选效率极低的DNA片段。本研究利用改进的酵母表面展示系统对GAG片段的DNA结合蛋白进行了筛选,并获得若干烟草蛋白基因,其中包括2个可能结合GAG片段的ERF(ethylene responsive factor)转录因子。进一步研究发现,这2个ERF转录因子可与GAG片段在体外结合,但不能在酵母单杂交系统中激活由GAG片段操纵的报告基因表达。本研究也证明酵母表面展示系统可有效克服酵母内源干扰,弥补酵母单杂交系统在筛选易受酵母内源干扰DNA结合蛋白方面的不足。; 陈红牛海峡王文静马浩然李加纳柴友荣张洪博; 关键词：酵母表面展示 DNA文库 DNA结合蛋白酵母单杂交

植物根系分泌物发生及收集装置及其收集方法: 本发明提供了一种植物根系分泌物发生及收集装置及其使用方法，包括植物生长器，根系生长引导装置和根系洗脱及分泌物收集装置，根系生长引导装置由网状结构和一个塑料隔板组成。本方法为在自然条件下，不扰动根系生长，不破坏根际环境，土...; 冯超陈德鑫王凤龙张成省王静王文静田雪莹

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